Imunologia prática - resumo

Prévia do material em texto

Imunofluorescência 
Anticorpo ou anti-anticorpo com ITCF (fluorocromo) 
Direta – procura antígeno
Anticorpo com ITCF
Antígeno
MV: Sangue
Lab: Anticorpo marcado 
Indireta – procura anticorpo
Anti-anticorpo com ITCF (busca anticorpo)
Anticorpo
Antígeno
MV: Sangue
Lab: Antígeno
Resultado:
Positivo: fluorescência
Negativo: ausência de fluorescência
ELISA
Teste para HIV (lab fornece antígeno que procura anticorpo no sangue fornecido)
Enzima detectada por colorimetria
Lab fornece: antígeno e antianticorpo(marcador) que é uma enzima peroxidase. 
Enzima – Ac + Substrato (cromógeno) = produto colorido
Cada indivíduo ->fazer o teste em duplicata
Anti-anticorpo com enzima 
ELISA indireto – procura anticorpo
Anti-anticorpo + substrato
Anticorpo
Antígeno
MV: sangue (para procurar anticorpo)
Lab: antígeno e anti-anticorpo + substrato
*caso haja anticorpo no sangue para aquele antígeno, o anti-anticorpo marcará*
Resultado:
Positivo: apresenta cor 
Negativo: sem cor
ELISA SANDUÍCHE – procura antígeno
Anticorpo marcado com enzima 
Antígeno
Anticorpo 
MV: antígeno
Lab: Anticorpo e anticorpo marcado com enzima 
*A coloração é proporcional a quantidade de antígeno*
Resultado:
Positivo: apresenta cor
Negativo: não apresenta cor
ELISA Competitivo
Anticorpo
Antígeno não marcado
ou
Anticorpo
Antígeno marcado com enzima
MV: antígeno não marcado
Lab: anticorpo e antígeno marcado
*competição entre um antígeno marcado e um não marcado*
Resultado:
Positivo: não apresenta cor
Negativo: apresenta cor (porque o material marcado é do laboratório)
Fixação de Complemento
É um método sorológico usado para determinar a presença ou semi-quantificar anticorpos ou antígenos 
Via clássica
Lab: antígeno
MV: hemácias(anticorpo)
Em duas etapas
Resultado:
Negativo: Lise celular (tubo fica rosa)
Positivo: sem lise (hemácias de decantam no fundo do tubo)
Radioimunoensaio – procura ligação antígeno-anticorpo
Muito semelhante a ELISA de competição
MV: antígeno não marcado (paciente)
Lab: antígeno marcado com radioisótopos (iodo 125)
Antes do teste:
Anticorpo + Antígeno marcado
Depois do teste:
Anticorpo + Antígeno marcado + Antígeno não marcado
*Antígeno não marcado irá substituir antígeno radiomarcado*
Resultado:
Positivo: pouca radiação (antígeno marcado substituído pelo não marcado)
Negativo: muita radiação (material do laboratório se ligou e do MV não)
Obs: material é radioativo e caro, o que dificulta o uso no dia a dia.
Prova do antígeno acidificado tamponado – Card Test (Brucella abortus)
Bactéria é englobada mas não é destruída
Vacina: vacina estoque, simples porque é específica APENAS para brucelose. Vacina B19, deve ser aplicada em bezerras de 3 á 8 meses.
Reação de aglutinação – procura anticorpo e IgG
Anticorpo com IgG
Antígeno (brucela morta)
MV: sangue com anticorpo IgG
Lab: antígeno (brucela morta e corada)
Resultados:
Positivo: formação de grumos (ligação antígeno-anticorpo)
Negativo: sem formação de grumos
Teste do anel em leite – milk ring test (Brucella abortus)
Procura anticorpo no leite
Brucelas coradas no leite
Anticorpo no leite
*Formam um complexo anticorpos e glóbulos de gordura que ascendem, formando um anel no topo*
MV: leite com anticorpos
Lab: antígeno- Brucella morta e corado com hematoxilina
Resultados:
Positivo: anel colorido no topo, coluna branca
Negativo: anel branco no topo, coluna colorida
Fixação de complemento – mostrar reação antígeno-anticorpo