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Salvador-BA, 16/08/2013 Priscila Machado “AMOSTRAGEM E ANÁLISE DE MICOTOXINAS EM ALIMENTOS (CÁLCULO)” AMOSTRAGEM: Mas... Quanto devo coletar para amostra? Logo, a fórmula para tal, será: n: volume da produção diária ou tamanho do lote em toneladas x: quantidade da amostra coletiva desejada em quilos Ex: Uma fábrica de ração produz durante um dia de produção 30 toneladas. Qual a quantidade a ser amostrada? X= √ x= √ x= 24,5 Kg 25 Kg Pronto, agora já sabemos a quantidade para amostra!!! Após encontrar este valor( que no exemplo dado foi 25 Kg), temos que fazer outro cálculo para saber de quanto em quanto tempo coletaremos essa quantidade, mas pra quê? Obtenção de uma amostra representativa do lote ou sublote, na tentativa de minimizar os erros, para que assim não haja um alto grau de variabilidade analítica. Lembrando que a adequação da amostragem e da preparação das amostras é essencial para a qualidade de um teste de micotoxinas, sendo a etapa mais importante para se obter resultados precisos nesses testes! Mas então... voltando ao cálculo, utilizando os dados do EX1, como coletar esses 25 Kg? Simples! Terá que saber em quanto foi produzido as 30 toneladas naquela fábrica. tempo Ex2: Supomos que o tempo foi de . 8 horas 30 toneladas= 30.000 Kg 8 horas= 480 min 30.000 Kg em 8 h (480 min) 25 Kg nas mesmas 8 h(480 min) Em 1 hora serão coletados quantos quilos? 25 Kg ________8 h (480 min) X ________ 1 h (60min) X= 3 Kg a cada 1h (60 min) ou 1,5 Kg a cada 30 min DEPOIS: ANÁLISE DE MICOTOXINAS: Bem, com a amostra enviada ao laboratório, agora é o momento de detectar se há alguma micotoxina nesse alimento, através de métodos analíticos sensíveis e confiáveis. *Principais métodos de extração utilizados para análise de micotoxinas são: - Extração líquido–líquido - Extração por fluido supercrítico - Extração em fase sólida A toxina fica retida em cartuchos. EX: Técnica de colunas de Imunoafinidade (mais utilizada) * Principais métodos de separação para análise de micotoxinas são: - Cromatografia de camada delgada (CCD) - Cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas - Cromatografia líquida de alta eficiência - Cromatografia gasosa Para fazer o cálculo de quantificação de micotoxinas, vocês terão que antes detectar se há presença nas amostras através da CCD ( observem a figura acima), mas como interpretar? Vamos lá!!! Observem abaixo: Agora vamos quantificar as aflatoxinas da AMOSTRA 1: Então: Na AFB1 Pronto!!! Achou a quantidade da aflatoxina B1, agora deve-se fazer a quantificação das aflatoxinas: AFB2, AFG1, AFG2, utilizando o cálculo acima como exemplo. Depois se soma o resultado de todos para saber quantos ppb há naquela amostra de alimento, e verificar o limite para essas (segundo a legislação Internacional de aflatoxinas em alimentos) p.s: Pessoal, fiz isso muito rápido, se errei em algo (digitação, ou o que seja) e vocês ficaram confusos me desculpem, mas qualquer coisa é só falar! Espero ter ajudado! Ah! As figuras foram a partir da apresentação de slides da Professora. Fiquem com Deus! Priscila Machado
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