INIBIDORES DE PROTEASES Copia

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Atividade Anticarcinogênica de Inibidores de Protease
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
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Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Inibidores Bowman-Birk
Introdução
Inibidor de Serino-proteases
Mello et al.,2003; Joanitti et al., 2006
Black-eyed pea Trypsin/Chymotrypsin Inhibitor (BTCI)
Fig.: Estrutura dimerica altamente estável de Inibidores da protease Bowman - Birk , das sementes de Vigna unguiculata .
Imagem: Rao &. Suresh, 2007
 
9,1 Kda;
Tripsina e quimiotripsina;
Termicamente estável: 95° C (60min)
Estável em pH 3 a 10
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
Realizado no Instituto de Ciências Biológicas da UnB, o estdudo descreve a descoberta de uma molécula chamada BTCI (do inglês, black-eyed pea trypsin and chymotrypsin inhibitor), que é encontrada nessa variedade de feijão e que em experimentos com ratos, conduzidos pela mestranda Graziella Joanitti, mostrou-se capaz de matar as células cancerígenas sem agredir as células sadias.
O BTCI, fragmentos protéicos do BTCI e suas variações são de interesse para a indústria, para a manufatura de composições medicamentosas, nutracêuticas ou cosméticas. Essas composições podem ser utilizadas para a prevenção, tratamento, ou tratamento coadjuvante de processos envolvidos na carcinogênese e em outros processos patológicos envolvidos com a inibição de proteases, para o uso em humanos e uso veterinário.
O BTCI faz parte de uma classe de substâncias importantes relacionadas com diversos processos celulares, como por exemplo, a resposta durante a infecção por bactérias e fungos e na coagulação. Ele atua fragmentando o DNA das células doentes e alterando outras organelas citoplasmáticas das células do câncer, o que acarreta em uma alteração da integridade da membrana e do núcleo, criando estruturas que digerem o conteúdo das células. Outra função descoberta no estudo é a inibição da atividade das enzimas tripsina, caspase e a quimotripsina-like do proteassoma – complexo de proteína que está relacionado à regulação do ciclo celular.
Em entrevista à Agência UnB, a professora e pesquisadora, Sônia de Freitas, disse que os testes em humanos e o desenvolvimento do novo tratamento deve acontecer nos próximos anos e que, provavelmente, ele será realizado via oral ou endovenoso, já que é uma substância consumida naturalmente pela população.
FIG. 5. A sobreposição da estrutura de BTCI - complexo tripsina ( 2g81 ) sobre a estrutura de dímero Vu -BBI ( 2ot6 ) . As coordenadas de um dos dímeros em Vu e -BBI BTCI ( vermelho ) têm sido utilizados para sobrepor as duas estruturas . Sobreposição mostra que a tripsina ( amarelo ) de ligação para um dos monómeros num dímero como Vu -BBI ( cinzento ) pode ter pouco impedimento a partir do segundo monome
Mello MO, Tanaka AS, Silva-Filho MC. (2003) Molecular evolution of
Bowman-Birk type proteinase inhibitors in flowering plants. Mol Phylogenet
Evol 27: 103–112.
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Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Introdução
Kennedy, 1995; Kennedy, 1998; Joanitti et al., 2010; Joanitti et al., 2010; Clemente et al., 2011 
Fragmentação da membrana plasmática;desorganização do citoplasma; inchaço mitocondrial; aumento no tamanho dos lisossomas; Fragmentação do DNA
BTCI efeitos citostáticos e citotóxicos significativos induzidas em células MCF-7 de câncer de mama
BTCI Reduziu volume de lesões pré-malignas no melanoma
BTCI efeitos citostáticos e citotóxicos significativos induzidas em células MCF-7 células de câncer de mama
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
fragmentação da membrana plasmática, citoplasma desorganização, e na presença de vesículas de dupla membrana, inchaço mitocondrial, e um aumento no tamanho dos lisossomas.
Kennedy AR. (1998) The Bowman-Birk inhibitor from soybean as an
anticarcinogenic agent. Am J Clin Nutr 68: 1406–1412.
13. Kennedy AR. (1995) Prevention of Carcinogenesis by Protease Inhibitors.
Cancer Research (Suppl.) 54: 1999–2005.
14. Joanitti GA, Azevedo RB, Freitas SM. (2010) Apoptosis and lysosome
membrane permeabilization induction on breast cancer cells by an anticarcinogenic
Bowman–Birk protease inhibitor from Vigna unguiculata seeds. Cancer
Letters. 293: 73–81.
15. Clemente A, Sonnante G, Domoney C. (2011) Bowman-Birk inhibitors from
legumes and human gastrointestinal health: current status and perspectives. Curr
Protein Pept Sci 12 (5): 358–373.
16. Clemente A, Marı´n-Manzano MC, Jime´nez E, Arques MC, Domoney C. (2012)
The anti-proliferative effect of TI1B, a major Bowman-Birk isoinhibitor from
pea (Pisum sativum L.), on HT29 colon cancer cells is mediated through
protease inhibition. Br J Nutr 108, Suppl. 1: 135–144.
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Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Introdução
Kennedy, 1995; Kennedy, 1998; Joanitti et al., 2010; Joanitti et al., 2010; Clemente et al., 2011 
Fig.Sistema Ubiquitina-proteassoma. Imagem: Demasi & Bechara, 2004
LIMP2
LIMP7
BTCI efeitos citostáticos e citotóxicos significativos induzidas em células MCF-7 células de câncer de mama
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
fragmentação da membrana plasmática, citoplasma desorganização, e na presença de vesículas de dupla membrana, inchaço mitocondrial, e um aumento no tamanho dos lisossomas.
Kennedy AR. (1998) The Bowman-Birk inhibitor from soybean as an
anticarcinogenic agent. Am J Clin Nutr 68: 1406–1412.
13. Kennedy AR. (1995) Prevention of Carcinogenesis by Protease Inhibitors.
Cancer Research (Suppl.) 54: 1999–2005.
14. Joanitti GA, Azevedo RB, Freitas SM. (2010) Apoptosis and lysosome
membrane permeabilization induction on breast cancer cells by an anticarcinogenic
Bowman–Birk protease inhibitor from Vigna unguiculata seeds. Cancer
Letters. 293: 73–81.
15. Clemente A, Sonnante G, Domoney C. (2011) Bowman-Birk inhibitors from
legumes and human gastrointestinal health: current status and perspectives. Curr
Protein Pept Sci 12 (5): 358–373.
16. Clemente A, Marı´n-Manzano MC, Jime´nez E, Arques MC, Domoney C. (2012)
The anti-proliferative effect of TI1B, a major Bowman-Birk isoinhibitor from
pea (Pisum sativum L.), on HT29 colon cancer cells is mediated through
protease inhibition. Br J Nutr 108, Suppl. 1: 135–144.
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Associação entre BTCI e proteassoma 20S avaliada pela dinâmica de espalhamento de luz
Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Resultados
Souza et al., 2014
Dentre todas as familias de inibidores de serinoproteases, as familia Kunitz e Bowman-Birk sao as mais estudadas e melhor caracterizadas. Os inibidores de proteases são denominados de acordo com a protease
inibida e/ou sua fonte, como, por exemplo, o inibidor de tripsina
de soja. Agrupam-se, também, em famílias, as quais podem receber
o nome do pesquisador que primeiro as identificou. As famílias mais
citadas são de Kunitz (inibidor de tripsina pancreático e inibidor de tripsina
de soja), a Kazal (inibidor de tripsina de secreção pancreática), a de
inibidores Bowman-Birk, a família de inibidor de batata I e a do inibidor
de batata II (LASKOWSKI; KATO, 1980).
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Imunolocalização de BTCI e proteassoma nas células MCF-7 do câncer de mama
Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Resultados
Souza et al., 2014
Dentre todas as familias de inibidores de serinoproteases, as familia Kunitz e Bowman-Birk sao
as mais estudadas e melhor caracterizadas. Os inibidores de proteases são denominados de acordo com a protease
inibida e/ou sua fonte, como, por exemplo, o inibidor de tripsina
de soja. Agrupam-se, também, em famílias, as quais podem receber
o nome do pesquisador que primeiro as identificou. As famílias mais
citadas são de Kunitz (inibidor de tripsina pancreático e inibidor de tripsina
de soja), a Kazal (inibidor de tripsina de secreção pancreática), a de
inibidores Bowman-Birk, a família de inibidor de batata I e a do inibidor
de batata II (LASKOWSKI; KATO, 1980).
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Atividade inibitória do Proteassoma 20S
Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Resultados
Souza et al., 2014
Dentre todas as familias de inibidores de serinoproteases, as familia Kunitz e Bowman-Birk sao as mais estudadas e melhor caracterizadas. Os inibidores de proteases são denominados de acordo com a protease
inibida e/ou sua fonte, como, por exemplo, o inibidor de tripsina
de soja. Agrupam-se, também, em famílias, as quais podem receber
o nome do pesquisador que primeiro as identificou. As famílias mais
citadas são de Kunitz (inibidor de tripsina pancreático e inibidor de tripsina
de soja), a Kazal (inibidor de tripsina de secreção pancreática), a de
inibidores Bowman-Birk, a família de inibidor de batata I e a do inibidor
de batata II (LASKOWSKI; KATO, 1980).
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Atividade inibitória do Proteassoma 20S
Effect of an Anticarcinogenic Bowman-Birk Protease Inhibitor on Purified 20S Proteasome and MCF-7 Breast Cancer Cells
Resultados
Souza et al., 2014
Dentre todas as familias de inibidores de serinoproteases, as familia Kunitz e Bowman-Birk sao as mais estudadas e melhor caracterizadas. Os inibidores de proteases são denominados de acordo com a protease
inibida e/ou sua fonte, como, por exemplo, o inibidor de tripsina
de soja. Agrupam-se, também, em famílias, as quais podem receber
o nome do pesquisador que primeiro as identificou. As famílias mais
citadas são de Kunitz (inibidor de tripsina pancreático e inibidor de tripsina
de soja), a Kazal (inibidor de tripsina de secreção pancreática), a de
inibidores Bowman-Birk, a família de inibidor de batata I e a do inibidor
de batata II (LASKOWSKI; KATO, 1980).
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Atividade Anti-inflamatória de Inibidores de Proteases
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
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Achillea millefolium L. sl - É o anti-inflamatório
mediada pela atividade de inibição de protease?
Introdução
óleo essencial  sesquiterpenos e compostos fenólicos
Bieth, 1998; Wiedow & Meyer-Hoffert, 2005); Willuhn, 2002.; Lemmens-Gruber et al., 2006; 
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Achillea millefolium L. sl - É o anti-inflamatório
mediada pela atividade de inibição de protease?
Introdução
(Murphy,1998; Collier and Goldberg, 1998; Petrides, 1998)
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Achillea millefolium L. sl - É o anti-inflamatório
mediada pela atividade de inibição de protease?
Resultados
Inibição dependente da concentração da elastase de neutrófilos humanos por Extrato de Achillea
Benedek et al., 2007
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Achillea millefolium L. sl - É o anti-inflamatório
mediada pela atividade de inibição de protease?
Resultados
Ensaio de Inibição de MMP-2 e MMP-9
Benedek et al., 2007
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Proteínas laticíferas de Plumeria pudica inibem as respostas inflamatórias e nociceptivas pela diminuição da ação de mediadores inflamatórios e de citoquinas pró-inflamatórias
Efeito de um anticarcinogênico Bowman - Birk Inibidor de Protease de proteassoma 20S purificadas e células MCF-7 de cancro da mama
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Proteínas laticíferas de Plumeria pudica inibem as respostas inflamatórias e nociceptivas pela diminuição da ação de mediadores inflamatórios e de citoquinas pró-inflamatórias
Resultados
 Tratamentos químicos e físicos nas proteínas do látex de P. pudica 
 Fernandes et al., 2015
Polyacrylamide gel (12.5%) electrophoresis of LP and LP treatments (a) and corresponding zymogram showing proteinase activity upon gelatin (0.1%) (b). 1: LP; 2: LPDTT; 3: LPIAA and 4: LP100 °C. Molecular weight markers (MW) were as follows: albumin (66.0 kDa); ovalbumin (45.0 kDa); carbonic anhydrase (30.0 kDa); trypsin inhibitor (20.1 kDa); and lactalbumin (14.4 kDa).
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