MÉTODOS DE ESTUDO CITO HISTOLÓGICOS TÉCNICAS HISTOLÓGICAS

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PROCEDIMENTO 
TÉCNICO = TÉCNICA 
CITOLÓGICA E 
HISTOLÓGICA 
CONJUNTO DE ETAPAS QUE VISA O 
PREPARO DA LÂMINA 
 PROTOCOLO: ETAPAS: 
 
1. COLETA/OBTENÇÃO DO 
MATERIAL/ESFREGAÇO 
 Citologia Esfoliativa 
 esfregaços da mucosa bucal; 
 esfregaços de secreção vaginal; 
 esfregaços da cérvice uterina; 
 Secreção mamária 
 Escarro 
 Esfregaços de biópsia por punção de medula 
 Esfregaços sanguíneo. 
 
2. FIXAÇÃO: 
 meio: álcool 
 função: preservar os componentes celulares 
(núcleo, citoplasma), evitando a autólise e 
decomposição 
 
3. COLORAÇÃO: 
 meio: corantes: H.E. (Hematoxilina&Eosina); 
Papanicolau (Hematoxilina & Orange G); Tricromo 
de Shorr (Hematoxilina de Harris, Biebrich scarlat-
orange G e fast green) 
 função: diferenciar os componentes 
celulares (núcleo e citoplasma) 
4. ANÁLISE 
 PREPARADO PERMANENTE 
(MÉTODO DA PARAFINA) 
 PROTOCOLO: ETAPAS: 
 
1. Obtenção do material e Fixação 
2. Clivagem e Fixação 
3. Lavagem da peça 
4. Desidratação 
5. Diafanização (aclaramento) 
6. Impregnação 
7. Inclusão 
8. Microtomia: Cortes finos 
9. Esticamento dos cortes 
10. Coloração dos cortes 
11. Montagem (Colocação da lamínula) 
12. Identificação 
13. Análise dos resultados 
COLETA, CLIVAGEM E FIXAÇÃO 
FRASCOS DE COLETA – peças (0,5cm) 
CASSETES - peças (3mm) 
MEIO: por ex: formol 10% 
FUNÇÃO: preservar os componentes celulares e teciduais da amostra, evitando a 
autólise e decomposição 
LAVAGEM DA AMOSTRA 
Meio: conforme o fixador usado. Visa remover os resíduos do fixador 
 Visa remoção de água dos 
tecidos 
 Meio: série alcoólica ascendente 
(álcool 70% - 100%) 
 
 Tornar a peça translúcida 
 Fornecer um meio miscível para 
a entrada da parafina 
 Meio: solvente da parafina (xilol, 
toluol..) 
 Peencher espaços inter 
e intracelulares 
 Meio: parafina líquida 
 Local: estufa 56° - 60°C 
 Retirada da estufa 
 Fornecer meio 
sólido que permita 
o corte fino 
 Meio: parafina 
MICROTOMIA 
Fazer cortes finos 
Aparelho: micrótomo 
Espessura: 1-5 micrômetros (µ) 
COLETA E DISTENSÃO DOS CORTES FINOS 
Esticar os cortes finos em lâminas de vidro 
banho maria & água morna 
 
 Diferenciar as estruturas celulares e teciduais 
 Escolha da coloração 
 Colorações simples 
 Colorações combinadas 
 dicrômicas: H. E. (hematoxilina e eosina) 
 tricrômicos: Masson-goldner 
 
 CORANTE BÁSICO (HEMATOXILINA, AZUL TOLUIDINA, 
VERDE DE METILA) IRÁ CORAR ESTRUTURAS ÁCIDAS 
(NÚCLEO) QUE SERÁ CHAMADO DE ESTRUTURA 
BASÓFILA = CIANÓFILA 
 
 CORANTE ÁCIDO (EOSINA, ORANGE G, FUCSINA) IRÁ 
CORAR ESTRUTURAS BÁSICAS (CITOPLASMA) QUE SERÁ 
CHAMADO DE ESTRUTURA ACIDÓFILA = EOSINÓFILA 
 
 Colocação da lamínula 
 Proteção aos cortes 
 Cola: Bálsamo do Canadá ou Entelan 
1. DESCALCIFICAÇÃO (DESMINERALIZAÇÃO) 
◦ O agente descalcificador - ácido nítrico 5% ou EDTA 
◦ Age retirando a PORÇÃO INORGÂNICA (MINERAL) 
2. DESGASTE 
 Permite o estudo da organização microscópica 
da PORÇÃO INORGÂNICA. 
 Congelamento: diagnóstico cirúrgico; 
estudos histoquímicos, lipídios 
 Citoquímica/histoquímica: 
 Imunocito(histo)química: 
 Radioautografia: 
 Fracionamento celular: 
 Criofratura: 
 Cultura de tecidos/células: 
PRECIPITADO DE CORANTE ARTEFATO DE SEPARAÇÃO 
ARTEFATO DE FISSURA 
“DENTE” NA NAVALHA DO MICRÓTOMO 
DOBRA NO ESTICAMENTO 
 DVD TÉCNICAS HISTOLÓGICAS – UMA 
ABORDAGEM PRÁTICA (vídeo produzido pela 
FIOCRUZ), COM DURAÇÃO DE 1H10MINUTOS 
 https://www.youtube.com/watch?v=RlyTg64
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