Slides de Aula Prática

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Citologia
MICROSCOPIA ÓPTICA
Prof. Francisco Benedito Kuchinski
MICROSCÓPIO ÓPTICO COMPOSTO
(MICROSCÓPIO DE LUZ)
ATÉ A PRÓXIMA!
Citologia
EXERCÍCIO DE MICROSCOPIA 
Observação de células epiteliais da mucosa bucal
Prof. Francisco Benedito Kuchinski
 Identificar os componentes celulares:
-citoplasma e núcleo;
-membrana plasmática não é visível no MOC;
-observação da morfologia celular (são 
poliédricas) e da localização do núcleo 
centralmente na célula;
Objetivos Gerais do Exercício
- observação da morfologia do núcleo 
(esférica);
- células epiteliais são “observadas de frente, 
de perfil, isoladas e aglomeradas”;
- Observar granulações inespecíficas no 
citoplasma entre outros grânulos sobre as 
células (bactérias). 
Objetivos Gerais do Exercício
ATÉ A PRÓXIMA!
CITOLOGIA - ATIVIDADE EM LABORATÓRIO 2
INTERPRETAÇÃO DE CORTES
Prof. Francisco benedito kuchinski
 ASSUNTO: Interpretação tridimensional de cortes histológicos
bidimensionais
 MATERIAIS: Pecíolo de mamona, ovos cozidos, limão ou laranja,
abacate, faca bem afiada
 TIPOS DE CORTES: Transversal, Longitudinal Mediano e
Excêntrico, Oblíquo e Tangencial
INTERPRETAÇÃO DE CORTES
MÉTODOS DE ESTUDO
(www.prof.2000.pt e autor)
Tipos de cortes em uma esfera oca e em um tubo
(Livro de Histologia Básica – Guanabara Koogan / Gen 12ª. Ed. 2013)
TIPOS DE CORTES
(www. minerva.ufpel.edu.br e plantaodemedico.blogspot.com – Bacha Wood, 1991)
INTERPRETAÇÃO DOS CORTES
(www.fmatlaschg.blogspot.com e www.infoescola.com e www.elcuerpohumano.blogspot.com e 
www.wikipedia.org)
INTERPRETAÇÃO DOS CORTES
(www.atlaschg.blogspot.com e www.icb.usp.br) 
INTERPRETAÇÃO DOS CORTES
( Livro de Histologia Básica – Junqueira/Carneiro – Guanabara Koogan / Gen – 12Ed. 2013)
INTERPRETAÇÃO DOS CORTES
(www.gazetaweb.globo.com e autor) 
Sistema Respiratório - Laringe, Traquéia, Brônquios, 
Bronquíolos e Pulmão.
(www. pulmaosarss.w e www.minerva.ufpel.edu.br)
ATÉ A PRÓXIMA!
CITOLOGIA - ATIVIDADE EM LABORATÓRIO 
PREPARAÇÃO DE ESFREGAÇO DE SANGUE
Prof. Francisco benedito kuchinski
 Técnica de esfregaço (extensão) para sangue periférico:
 Leishman (é a mistura de “ROMANOWSKY): 
eosina + azul de azul de metileno + azur de metileno
MATERIAIS: lâminas de vidro, lanceta, algodão, álcool 70%, papel de 
filtro, água destilada, corante Leishman, pipeta, caixa para 
descarte, cuba com água para descarte, óleo de imersão e 
microscópio óptico composto (microscópio de luz).
Técnica do Esfregaço Sanguíneo
Método de Coloração - LEISHMAN
Técnica do Esfregaço Sanguíneo
Método de Coloração – LEISHMAN
(www.ebah.com.br e www.hematoufvfm.blogspot.com)
http://www.ebah.com.br/
Técnica do Esfregaço Sanguíneo
Método de Coloração – LEISHMAN
(www.hematoufvfm.blogspot.com )
http://www.hematoufvfm.blogspot.com/
Observação das Células Sanguíneas
Método de Leishman
(www.ebah.com.br e www.labmedvet.blogspot.com)
http://www.ebah.com.br/
CÉLULAS SANGUÍNEAS
Glóbulos Vermelhos e Glóbulos Brancos
Fragmentos Celulares: plaquetas (trombócitos)
(www.sil-novidadesemgeral.blogspot.com e www.mundobiomedico.com.br e 
www.cadernofarmacia.blogspot.com) 
http://www.sil-novidadesemgeral.blogspot.com/
http://www.mundobiomedico.com.br/
http://www.cadernofarmacia.blogspot.com/
TÉCNICA DO PANÓTICO
(www.biomedicinapadrão.com.br e www. pt.wikipedia.org) 
http://www.biomedicinapadrão.com.br/
 Técnica de PANÓTICO para esfregaço de sangue:
 são três os corantes utilizados: 
 corante I – solução de triarilmetano 0,1% - tempo de 10”
 corante II – solução de xantenos 0,1% - tempo de 8”
 corante III - solução de tiazinas 0,1% - tempo de 5”
 Após essas passagens pelos corantes, é só deixar secar e 
observar as células sanguíneas.
 Corante I = agente fixador
 Corante II = corante dos glóbulos vermelhos
 Corante III = corante dos glóbulos brancos e das plaquetas
TÉCNICA DO PANÓTICO
 Anemias microcíticas: anemia ferropriva e talassêmicas
 Anemias macrocíticas: megaloblástica e perniciosa
APLICAÇÃO DAS TÉCNICAS
Laboratório de Analises Clínicas – Hemogramas
Diagnósticos de Anemias. Poiquilocitose.
(www.autor, www.ebah.com.br e www.ganhebusqueaqui.blogspot.com e 
www.hematologia.familia.ufg.br) 
http://www.autor/
http://www.ebah.com.br/
http://www.ganhebusqueaqui.blogspot.com/
http://www.hematologia.familia.ufg.br/
ATÉ A PRÓXIMA!
CITOLOGIA - ATIVIDADE EM LABORATÓRIO 
TÉCNICAS DE COLORAÇÃO
Prof. FRANCISCO BENEDITO KUCHINSKI
MATERIAIS: 
Microscópio óptico composto / MOC - (Microscópio de luz)
Lâmina de fígado corada por H&E
Lâmina de fígado corada por H + PAS
PAS = Ácido Periódico + Reativo de Schiff
PROCEDIMENTO:
Observar com aumento de 40X, 100X e 400 X 
Fígado por H&E
Observar com aumento de 40X, 100X e 400 X: 
Fígado por H + PAS.
ASPECTO DE MESMO MATERIAL PREPARADO POR 
TÉCNICAS DIFERENTES DE COLORAÇÃO
H&E X H+PAS X PAS
Fígado corado por H&E, por H + PAS e só por PAS
(Fonte: autor e www.icb.usp.br)
Corante H&E:
H – Hematoxilina é um corante básico (alcalino);
Hematoxlina age sobre estruturas ácidas como o núcleo
Ácido + Base Sal + Água
Núcleo + Hematoxilina Roxo + Água
E – Eosina é um corante ácido
Eosina age sobre estruturas alcalinas como o citoplasma
Ácido + Base Sal + Água
Eosina + Citoplasma Róseo + Água 
ASPECTO DE MESMO MATERIAL PREPARADO POR 
TÉCNICAS DIFERENTES DE COLORAÇÃO
H&E X H+PAS
H = Hematoxilina (age sobre estruturas ácidas como o núcleo
PAS = Ácido Periódico + Reativo de Schiff é um tipo de reação que
produz aldeídos nas substâncias que contém carboidratos (CHO),
como é o caso do polissacarídeo GLICOGÊNIO.
Por oxidação com o Ácido Periódico , os aldeídos reagem com o
Reativo de Schiff produzindo um sal vermelho magenta.
Caso da contra-prova: uso da saliva (contém amilase salivar)
Fígado corado por H + PAS evidencia o glicogênio
Fígado tratado com saliva e corado por H+PAS não evidencia o
glicogênio
Nota: animal tratado com Água + Açúcar
ASPECTO DE MESMO MATERIAL PREPARADO POR 
TÉCNICAS DIFERENTES DE COLORAÇÃO
H&E X H+PAS (Técnica histoquímica)
ATÉ A PRÓXIMA!
CITOLOGIA - ATIVIDADE EM LABORATÓRIO 
PREPARAÇÃO DE MERISTEMA APICAL
Prof. Francisco benedito kuchinski
MATERIAIS: cebola, becker, papel alumínio, água, pinça, pincel,
gilete ou bisturi, vidro relógio, cadinho, placa de Petri, tubo de
ensaio, bico de Busen ou lamparina, pregador, corante orceína
e/ou frasco com orceína lático acético, papel de filtro,
microscópio e óleo de imersão.
Técnica para a obtenção da raiz de cebola.
Outras informações
 Consulte o site: http://www.biologia.seed.pr.gov.br
CICLO CELULAR MITÓTICO: Interfase + mitose
Preparação de raiz de cebola para observação da 
interfase, prófase, metáfase, anáfase e telófase.
Mitose em células vegetais – Raiz de cebola
( www.pt.dreamstime.com e www.saberesdojardim.wordpress.com )
http://www.pt.dreamstime.com/
http://www.saberesdojardim.wordpress.com/
1. Cortar duas pontas (coifas) das raízes ( uso da gilete) 
2. Colocá-las sobre a lâmina de vidro (uso da pinça)
3. Colocar 3 gotas de orceína lático acético (uso do frasco)
4. Colocar a lamínula
5. Ascender a lamparina – levar lâmina com o pegador ao fogo 
com distância de 5 cm por tempo aproximado de 3”
6. Repetir o procedimento anterior três vezes
7. Colocar a lâmina sobre a mesa e pressionar a lamínula com o
uso do dedo + papel de filtro e/ou com o uso da pinça com papel
de filtro. Se for necessário colocar antes do esmagamento mais
uma gota do corante (se possível quente).
Descrição dos métodos
Observação da técnica e do ciclo celular
(www.atlaschg.blogspot.com) 
http://www.atlaschg.blogspot.com/
Resposta: 1=P; 2=A; 3=M; 4=I; e 5=T
ESQUEMA DO CICLO CELULAR MITÓTICO
Identifique as indicações de 1 até 5
(www.ese.ipvc.pt) 
http://www.ese.ipvc.pt/
1. Preparações para obtençãodo material
2. Coleta das pontas das raízes ( VOIP - horários diferentes)
3. Colocar corante orceína no cadinho e adicionar as raízes
4. Levar o cadinho no suporte/bico de Busen até ferver
5. Com a pinça, colocar dois pedaços de raiz na lâmina, adicionar
uma gota do corante, cobrir com a lamínula e proceder ao
esmagamento com papel de filtro/dedo.
6. Observar no microscópio com aumento médio e máximo (uso do
óleo de imersão) a interfase (mais comum) e algumas fases da
mitose.
NOTA: Técnica do emblocamento da raízes com parafina e uso de
corante: hematoxilina férrica.
CICLO CELULAR MITÓTICO: Interfase + mitose
Preparação de raiz de cebola para observação da 
interfase, prófase, metáfase, anáfase e telófase.
Ciclo celular mitótico por Hematoxilina Férrica
ATÉ A PRÓXIMA!