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1 Normas de segurança no Laboratório de Microbiologia 1) Siga criteriosamente as instruções fornecidas pelo(a) professor(a); 2) O uso de jaleco é obrigatório, para proteção contra possíveis contaminações. 3) Utilize sapatos fechados e roupas com comprimento adequado para evitar acidentes e proteção contra possíveis contaminações. 4) Prenda os cabelos longos. 5) Não coma, beba, fume ou leve qualquer objeto à boca durante sua permanência no laboratório. 6) Lave as mãos antes e após o trabalho prático. 7) Deixe somente itens indispensáveis à execução do trabalho sobre a bancada. 8) Culturas e reagentes não devem ser pipetados com a boca. Utilize sempre o pipetador! 9) Nunca coloque qualquer material contaminado sobre a bancada. A alça de inoculação deve ser flambada antes e após o uso. Pipetas e ponteiras devem ser depositados em recipientes apropriados. 10) Ao final da aula deixe a bancada limpa e organizada. 11) Nunca retire qualquer equipamento, reagente ou culturas do laboratório. 12) Em caso de incidentes, avise imediatamente o(a) professor(a) para que as devidas providências sejam tomadas! 2 Universidade Federal do Oeste da Bahia Centro das Ciências Biológicas e da Saúde CBS 2015 – Microbiologia de Alimentos Aula Prática 1 – Demonstração da Presença de Micro-organismos no ambiente I – Introdução Durante as aulas de Microbiologia de Alimentos serão introduzidas técnicas microbiológicas básicas de isolamento, conservação e identificação dos micro-organismos, utilizadas na pesquisa, na indústria bioquímica e de alimentos, na agricultura, na medicina e na biotecnologia. Essas técnicas incluem observações microscópicas, cultivo em meios artificiais, esterilização e práticas de assepsia, isolamento, enumeração e identificação de bactérias e fungos, bem como estudos preliminares de fisiologia e genética microbianas. Os micro-organismos são encontrados em qualquer ambiente, em suspensão ou assentados com a poeira em várias superfícies. O meio aquático foi provavelmente o ambiente original dos micro-organismos, a partir do qual se especializaram e colonizaram o ambiente terrestre. Os micro-organismos estão presentes nas partículas de poeira e, portanto, são passíveis de entrar no nosso corpo cada vez que respiramos, sendo depositados nos cabelos, nas roupas, na pele e nas mucosas. Os micro-organismos do ar também contaminam alimentos e bebidas. Felizmente, na sua maioria, são inócuos ou benéficos, havendo relativamente poucos que causam prejuízos ao homem. Um microbiologista deve estar apto a estimular e otimizar o desenvolvimento dos micro-organismos benéficos e combater aqueles que causam doenças ou deterioram os alimentos e o ambiente. Nesta primeira aula iremos conhecer as normas básicas, os materiais e equipamentos necessários ao Laboratório de Microbiologia. Além disso, iremos realizar um experimento para demonstrar a presença de micro- organismos no ambiente. II. OBJETIVOS 1. Reconhecer materiais, equipamentos e normas do Laboratório de Microbiologia. 2. Demonstrar a presença de micro-organismos no ambiente. III. MATERIAIS Meios e soluções: Ágar nutriente estéril, caldo nutriente estéril. Equipamentos e utensílios: Placas de Petri, tubos de ensaio, bico de Bunsen. IV. PROCEDIMENTO A. Demonstração da presença de micro-organismos no ambiente: 1. Exponha a placa ou o tubo a uma condição de inoculação de sua preferência, como por exemplo, exposição ao ar, à pele, ao cabelo ou à respiração. Ar: . Abra a placa ou tubo e deixe expostos ao ar, por 15 minutos. Pele ou cabelo: . Passe os dedos em vários pontos da superfície do ágar. Coloque o dedo no caldo nutriente do tubo; 3 . Agite vigorosamente os cabelos em direção à superfície da placa ou tubo, ou coloque um fio de cabelo na placa ou tubo. Respiração: . Inocule a placa ou tubo tossindo, soprando ou espirrando diretamente sobre eles. B. Verificação da utilidade do bico de Bunsen ou lamparina: 1. Próximo à chama do bico de Bunsen, abra por 60 segundos uma placa ou tubo com meio de cultura estéril. 2. Incube as placas e tubos na estufa a 25 °C, por 7 dias (até a aula seguinte). 3. Após o período de incubação, anotar a presença e a diversidade morfológica das colônias microbianas que cresceram sobre a superfície do ágar. Observe também a ocorrência de turvação do meio líquido contido no tubo, sinal do crescimento de bactérias ou de leveduras. Observações: 1. Utilize como controle de qualquer procedimento uma placa ou tubo com meio de cultura estéril fechado. 2. As placas devem ser identificadas na borda do fundo da placa com o número da turma, bancada, data e condições de inoculação. Os tubos devem conter as mesmas informações identificadas na parte superior, abaixo da tampa.
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