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RESUMO: TÉCNICA HISTOLÓGICA Métodos: Imediato – observa-se na hora Mediato – realiza-se processos para depois observar Método imediato Material biológico observado sem uso de substâncias que promovam a sua preservação. Observa-se na hora. Coleta o material, coloca corante ou água, coloca a lamínula por cima e observa-se no microscópio. Método mediato Realiza diversos processos para depois observar no microscópio. Etapas: Coleta, fixador, desidratação, diafanização ou clarificação, impregnação, inclusão, emblocagem, microtomia, pescagem, coloração e montagem de laminas. Coleta: Anestesia o local e retira a amostra do material. Fixador: Imergir o material em fixadores (formol 10%, Bouin, Glutaraldeido 4%) Desidratação: Remover a água do material (utiliza-se álcool de forma crescente (70%, 80%... 100%, 100%) passando duas vezes em 100% para garantir que não tenha mais água na peça) Diafanização ou clarificação: Tornar a peça translúcida (utiliza-se xilol, benzol, toluol...) Impregnação: Coloca-se parafina fundida na peça para penetrar nos vasos e espaços, tornando mais fácil a obtenção dos cortes no micrótomo. Inclusão: A peça é colocada num molde com parafina fundida com a finalidade de formar um bloco de parafina para ser cortado no micrótomo. Emblocagem: Faz-se um bloco de parafina com a peça dentro, e leva para o micrótomo fatiar. Microtomia: Fatiar o bloco de parafina, que após sua coloração são visualizados no microscópio. Pescagem: Os cortes são aquecidos em “banho Maria”, depois são pescados e colocados na lâmina. Coloração Desparafinização: Utiliza-se o Xilol Hidratadação: Utiliza-se o álcool de forma decrescente, terminando com água (100%, 100%, 90%...) Hematoxilina: Corante básico (+) Água da torneira: Lava com a água da torneira para ativar a hematoxilina. Eosina: Corante ácido (-) Desidratação: Utiliza-se o álcool de forma crescente (80%, 90%, 100%, 100%) Diafanização: Utiliza-se o Xilol para deixar a peça translucida. Montagem: Coloca-se um gota de resina sintética (Entellan, Bálsamo Canadá) na lamínula, comprimi de modo a espalhar-se em fina camada entre a lamina e lamínula.
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