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SEXAGEM DE ESPERMATOZOIDES • Consegue programar o nascimento só para machos ou só para fêmeas • Alto ganho genético para o produtor pois não haverá descarte de animais nascidos com sexo não desejado • Redução do tempo de seleção • Direcionamento nos testes de progênie (olhar o desempenho da filha para ver se o pai é bom) Técnica: feito através de maquinas (CIOMÊTRO DE FLUXO), sendo o fluxo do espermatozoide que vai passar um por um pelo laser e a citometria é a medição da luminosidade da célula. - Coleta o sêmen do animal cora e refrigera (diminui a viabilidade), depois coloca na maquina que quebra esse sêmen em microgotas que vão passando de modo que um sptz de cada vez, e a maquina emite laser: • Células de cromossomo X (FÊMEA) = brilham MAIS e recebem carga NEGATIVA e tem placa POSITIVA que atrai essa célula para um tubinho X • Células de cromossomo Y (MACHO) = brilham MENOS e recebem carga POSITIVA e tem placa NEGATIVA que atrai essa célula para um tubinho Y Processo demora porque a maquina vai passar célula por célula pelo laser e no final do processo se congela o sêmen em nitrogênio nas palhetas com identificação dos dados do animal sexado para X e para Y VANTAGEM: é inseminar uma vaca super ovulada que terá 6 embriões (TE) ou fazer FIV porque consegue 30 embriões com a palheta CLONAGEM Finalidade: • Melhoramento genético • Pesquisa • Clonagem de espécie em extinção • Clonagem de animais transgênicos Técnica: BIPARTIÇÃO de embriões e separação dos blastômeros (funciona com 16 células), não existe vantagem por não saber nada desse animal, hoje a finalidade é clonar um animal adulto (porque já passou por teste de progênie e performance) TN = se faz com MAIS de 16 células porque não pode clonar por Bipartição. Técnica: faz enucleação do oócito, através de uma mórula com mais de 16 células, separa essas células e fusiona-se a célula da mórula (2n) com o citoplasma do oócito enucleado com isso se tem um zigoto • Maturação = dos oócitos em metáfase II, maturando o núcleo e o citoplasma que há a produção de proteínas, organelas e grânulos citoplasmáticos • Retirada das células do cumulus = hialuronidase e seleção à presença do 1º CP, retira a células do cumulus e pipeta e solta a célula com uma enzima. • Enucleação = micropipeta à aspiração da cromatina, deve corar o oócito e colocar luz ultravioleta (é uma técnica agressiva, mas mais fácil) • Preparação = das células doadoras de núcleos: o Embrião = em estagio de mórula D5-D6 após fecundação. Retira ZP, aspira varias vezes com pipeta o Células somáticas = separação das células com lavagem. • Reconstrução dos embriões = fusão da célula doadora 2n com oócito receptor o Eletrofusão = é feita com choques onde as células se fundem o Para regredir a célula se animal for adulto = também usa choque TB = usou uma mórula de ovelha e replicou a técnica de TN isso gerou novo ser WILMUT = foi a 1ª clonagem com células somáticas adulto, antes era feito com células de embriões e germinativas do feto. Nesse se clona com pedaço de pele sem o sptz TRANSGÊNICOS Finalidade: Xenotransplante feito em suíno = transplante de órgãos entre espécies diferentes. Faz FIV em suíno e introduz o DNA do órgão de humano nesse embrião = nasce o suíno com órgão de humano. Esses animais são chamados de BIORREATORES (é feito porque o tamanho dos órgãos é compatível com o humano e as doenças dos suínos são diferentes das humanas, diminui o risco de contaminação Modelo para doenças genéticas gen knockout (EXÓGENO) introduzido para cancelar a expressão da doença Melhora de características produtivas aumento da produção de carne, aumento produção de leite, taxa de crescimento, composição da carcaça, resistência a doenças, performance produtiva, prolificidade à essa técnica não é introdução de outro gen, é do mesmo animal Biologia básica (EXPRESSÃO GÊNICA) feitas para entender a ação dos genes ETAPAS PARA FAZER UM ANIMAL TRANSGÊNICO • Construção do vetor = pipeta que fura a célula e introduz o DNA • Inserção do vetor na célula = pipeta deixa DNA exógeno/endógeno na célula • Seleção das células geneticamente modificadas = esse DNA introduzido deve ser incorporado • Criação do transgênico = o animal tem que ser incorporado e o animal deve nascer e expressar a característica
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