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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ CAMPUS DE PARNAÍBA CURSO DE BIOMEDICINA Disciplina: BIOINFORMÁTICA Prof. Jefferson Soares de Oliveira Roteiro de atividades da Aula Pratica – Identificação de Proteínas Para responder as questões a seguir, utilize a ferramenta “by experimental pI/Mw range” presente no site do SWISS-2DPAGE (http://world-2dpage.expasy.org/swiss-2dpage/). 1- Analisando mapas bidimensionais obtidos a partir da extração de proteínas de cultura de linfócitos humanos, indique quantas proteínas foram identificadas nos géis dentro do intervalo de pH 5.5 – 6.0 e massa molecular 20 a 30 kDa? 2- Descreva o ponto isoelétrico e massa molecular de cada proteína encontrada. A que genes estão relacionados? 3- Qual a estratégia experimental utilizada pra identificar as proteínas citadas na questão anterior? Para responder as questões a seguir, utilize a ferramenta “Peptide mass fingerprint” presente no site do Matrix Science (http://www.matrixscience.com/search_form_select.html). 1- Para estudar as mudanças na expressão de proteínas em células humanas em processo neoplásico, um pesquisador analisou o padrão de expressão de proteínas através da técnica de eletroforese bidimensional. Após análise criteriosa e comparação com mapas bidimensionais de células controle, o pesquisador selecionou 200 proteínas que apresentaram expressão alterada. Abaixo são apresentados os valores das massas de duas proteínas que chamaram especial atenção do pesquisador. Estes dados foram obtidas após excisão das proteínas do gel de eletroforese, digestão destas com tripsina e análise dos fragmentos por espectrometria de massas. Diante destas informações, indique os genes relacionados a cada uma das proteínas. Explique o que lhe permite relacionar (ou não) a proteína ao gene. Massa das proteínas obtidas após digestão com tripsina Proteína A Proteína B 801.3964 817.3913 822.4468 888.5149 907.4342 978.5619 979.4956 980.4935 1028.5597 1044.5547 1071.6045 1091.5844 1122.5612 1181.6273 1247.6743 1336.6500 1551.8602 1798.9666 1840.9772 1853.9830 1869.9779 1930.0071 1946.0020 1972.0177 1988.0126 2033.0801 2317.0589 2333.0538 2349.0488 2365.0437 977.4721 966.5003 961.4771 952.4959 907.4190 3648.6543 3632.6593 2700.2253 2634.2288 2618.2339 2602.2390 2586.2441 2457.1458 2412.2477 1988.0126 1972.0177 1946.0020 1930.0071 1869.9779 1859.7600 1853.9830 1843.7651 1840.9772 1798.9666 1792.8321 1600.7346 1584.7396 1568.7447 1551.8602 1513.7315 1471.7863 1386.7528 UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ CAMPUS DE PARNAÍBA CURSO DE BIOMEDICINA Disciplina: BIOINFORMÁTICA Prof. Jefferson Soares de Oliveira 2586.2441 2602.2390 2618.2339 2634.2288 2700.2253 2716.2202 2778.3227 2794.3177 2810.3126 2826.3075 3084.4374 3100.4323 3616.6644 3632.6593 3648.6543 1360.7120 1343.6914 1336.6500 1184.6092 1181.6273 1153.5670 1122.5612 1091.5844 1087.5742 1071.6045 1044.5547 1042.5316 1033.5465 1028.5597
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