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Título da aula prática: Hemaglutinação indireta (HAI) – Chagas. 2. Introdução O diagnóstico da infecção por Trypanosoma cruzi apoia-se em dados de exames laboratoriais, sendo a maioria baseada na demonstração de anticorpos específicos séricos. Diversos testes sorológicos já foram descritos (WENDEL, et al., 2004). O teste de hemaglutinação indireta (HAI), a par de alguns outros, destaca-se por apresentar características desejáveis aos estudos epideiniológicos. Este teste, com o decorrer do tempo, sofreu modificações quanto ao tipo de antígeno, tratamento de hemácias com aldeído e estabilização do reagente (CAMARGO, 2006). As hemácias utilizadas no teste HAI são de aves, sensibilizadas com o Trypanosoma cruzy, que aglutinam na presença de anticorpos contra o antígeno citado. 3. Método Utilizam-se placas descartáveis com fundo em “V” para a realização do teste. 1. Pipetar 50ul dos soros (controle positivo, controle negativo e amostra do paciente) em suas respectivas cavidades. 2. Pipetar 25ul da suspensão de hemácias. 3. Homogenizar 4. Deixar em repouso por 1 hora. 5. Fazer a leitura. 4. Resultados Controle negativo Formação de um “botão” Controle positivo Formação de um “véu de noiva” Amostra do paciente Formação de um “botão” A amostra do paciente não foi reagente. 5. Conclusões A amostra do paciente não foi reativa, entretanto o teste de hemaglutinação indireta é um teste de triagem, ou seja, necessita de testes mais específicos para se ter o fechamento do diagnóstico. As opções mais utilizadas para essa confirmação é imunofluorescência indireta (IFI) e ELISA. A reação de IFI baseia-se na interação do próprio T. cruzi (formas epimastigotas) com os anticorpos contra esse parasita presentes no soro. E o teste de ELISA é um teste imunoenzimático que se baseia na interação antígeno-anticorpo evidenciada pela ação de uma enzima e o substrato apropriado, e revelada por um cromógeno. 6.Bibliografia Camargo ME , H oshino-Shim izu S, Siqueira G R V . H em agglutination with preserved, sensitized cells, a p ractical test for serologic diagosis of american trypanosom iasis. Revista do Instituto de MedicinaTropical de São Paulo 15:81-85, 2006. Daniels GL, Fletcher A, Garratty G, Henry S, Jørgensen J, Judd WJ, et al. Blood group terminology 2004: from the International Society of Blood Transfusion committee on terminology for red cell surface antigens. Vox Sang. 2004;87(4):304-16 Lorenzi TF. Antígenos eritrocitários. In: Lorenzi TF. Manual de hematologia propedêutica e clínica. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2006. Wendel S, Brener Z , Camargo ME , Rassi A . Chagas D isease (American T rypanosom iasis): Its Impact on Transfusion and clinical m edicine. ISBT Brasil’, São Paulo, 2004.
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