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Imuno HAI CHAGAS A doença de chagas, também chamada de tripanossomose é causada pelo Trypanossoma cruzi. O vetor da doença é o mosquito Reduviidae, ou mosquito barbeiro. As fezes do mosquito contém tripomastigotas infectantes que penetram no organismo por meio da picada. A causa principal de morbidade e mortalidade na doença de chagas é o acometimento cardíaco, que ocorre de 5 a 30 anos após a infecção primária em cerca de 30% dos indivíduos infectados pelo T. cruzi. Na cardiopatia chagásica crônica (CCC), ocorre uma inflamação e destruição progressiva do tecido cardíaco, levando a alterações da condução dos impulsos elétricos no coração e arritmias. Princípio do Teste Eritrócitos de aves estabilizados, sensibilizados com componentes antigênicos altamente purificados, mostram aglutinação quando reagem com anticorpos contra esses antígenos presente no soro do paciente. Procedimento do Teste Deve-se usar soro de pacientes em jejum, frescos ou conservados a -20 Graus Celsius; Evitar o congelamento e descongelamento repetidos do soro. Os soros envelhecidos tendem a gelificar em contato com 2- mercaptoetanol, provocando resultados falso-positivos. É Recomendado o uso de soro inativado; coloca-se a placa sobre um pano úmido para neutralizar as forças eletrostáticas, logo usa-se uma cavidade de placa por amostra, incluindo sempre os controles positivo e negativo. A diluição recomendada da amostra é de 1/32 com solução diluente com 2- meercaptoetanol. Recomenda-se diluir em um tubo de ensaio 10 micolitros da amostra + 0,32 mL da solução diluente com 2- mercaptoetanol. Pipetar-se 50 microlitros do soro controle positivo, negativo e da diluição 1/32 de cada amostra nas respectivas cavidades da placa. Sugere-se: A1 controle positivo, A2 controle negativo e A3, A4, A5... Soros a serem testados. Adiciona-se 25 microlitros da suspensão homogênea de hemácias em cada cavidade. Agita-se a placa por vibração mecânica (agitador de placas). É importante que se deixe em repouso por 1 a 2 horas em temperatura ambiente, em local livre de vibrações e faz-se a leitura. Resultados Quando se observa o botão de aglutinação, o teste é positivo, e quando se observa o tapete de aglutinação, o teste é negativo. Referências utilizadas nesse e-book bônus. • (HENRY, 2008) • (NETO, 1997) • (IMUNO HAI CHAGAS, 1997) • (VAZ; TAKEI E BUENO, 2010) MUITO OBRIGADO
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