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FURB – Universidade Regional de Blumenau Professora: Isabel D Machado Acadêmica: Maria Beatriz S Albuquerque Farmácia – 6º semestre Imunologia II RELATÓRIO AULAS PRÁTICAS IMUNOLOGIA II HBsAg • marcador para hepatite B; • significa presença da doença; • HBeAg -> replicação viral (antígeno solúvel); HbcAg não representa a doença (antígeno de núcleo) só que entrou em contato com a doença. • para o HBsAg tem o anti HBs (antígeno Austrália) é um anticorpo que indica cura imunização. Anti HBs + pode ser a vacina ou contraiu a doença; necessário fazer Anti HBc. Anti HBc IgM – fase aguda; Anti HBc total – entrou em contato/quase crônica. •HbcAg + total: replicação vírus – fase crônica replicativa •HbeAg+ + AntiHBc total: fase crônica não replicativa • marcadores bioquímicos são importantes (AST, ALT, BD BT, JGT, FAL). • transmissão: parenteral, via sexual, perfuro cortantes contaminados, vertical (gestação). • prevenção: vacinação. IMUNOCROMATOGRAFIA: teste direto (quando se pesquisa antígenos). HBsAg liga-se ao anticorpo marcado com ouro coloidal. Na posição controle encontra-se anti imunoglobulina. E ao lado da amostra fica os reagentes. HCG • ELISA • ensaio de reação imunológica ligada a enzima; • hormônio secretado no início da gestação para manutenção; • monitoramento de neoplasia e detecção de gravidez. - > tumores: mama, próstata, testículo, ovário. E = enzima anti HCG marcado com peroxidase Para o teste é adicionado as amostras de soro nos poços e enche com água para realizar a lavagem. Teste lavado com água destilada 5x. Coloca-se substrato para a enzima que tem como base peróxido de hidrogênio e produz uma cor. Lavar novamente com água 5x. Adicionar a soução sttopper onde ficar azul significa presença para HCG. HIV – ELISA Anti HIV da amostra do ambiente no lado +. Anti imunoglobulina (conjugado) marcado com peroxidase -. • O teste não diferencia IgM e IgG. Substrato é adicionado após lavagens. O substrato é a base de H2O2 produzindo uma cor. Depois acrescenta-se solução de parageno/solução Sttoper, tornando a cor de azul para amarelo se o resultado positivo. Obs. Janela imunológica pode durar até 6 meses. Esse teste foi realizado com base na 3ª geração. Prática: 1º soro e diluente amostra; 2º descartado; 3º lavar 5x com tampão diluído em água; 4º secar bem com auxílio de um papel para tirar todo líquido; 5º 1 gota do conjugado (esperar 30 minutos); 6º lavar 5x com tampão diluído em água; 7º secar bem com auxílio de um papel toalha; 8º 1 gota do substrato (1 tubo amarelo e 1 tubo rosa) aguardar 30 minutos. “Câmara” para deixar a amostra úmida por 30min, para reação acontecer. Chagas Prática: 1º soro e diluente amostra; 2º descartado; 3º lavar 5x com tampão diluído em água; 4º secar bem com auxílio de um papel para tirar todo líquido; 5º 1 gota do conjugado (esperar 30 minutos); 6º lavar 5x com tampão diluído em água; 7º secar bem com auxílio de um papel toalha; 8º 1 gota do substrato (1 tubo amarelo e 1 tubo rosa) aguardar 30 minutos.
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