Questões de Microbiologia Veterinária

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Estudo Dirigido – Microbiologia
Caracterize a célula fúngica.
São células eucariotas (apresentam o material genético separado por um envoltório nuclear). A membrana plasmática, além de todas as funções que elas apresentavam nas células bacterianas, possui colesterol que garante rigidez e menor permeabilidade. Apresenta também mitocôndria (produz energia por reação oxidativa), lisossomos livres no citoplasma e ligados ao retículo endoplasmático rugoso (síntese proteica), complexo de Golgi, retículo endoplasmático liso (síntese lipídica) e vesículas. 
Caracterize os fungos de uma maneira geral.
São organismos ubíquos (presentes em todo lugar), quimiorganotróficos, a maioria é saprofítica e suas exigências nutricionais são simples. Apenas a minoria causa infecção que são denominadas micoses. Por causa dos tratamentos com imunossupressores (debilitam o sistema imunológico), o fungo teve sua importância elevada por ter a característica de se aproveitar dessa debilidade.
Como é a estrutura dos fungos filamentosos?
Apresentam parede celular formada por quitina (NAG), celulose, lipídios, proteínas e polissacarídeos. O filamento é chamado de hifa e pode ser septado (apresentando riscos verticais nas hifas e poros para a passagem de substâncias) ou não septado. 
O que é o micélio? Como pode ser classificado?
O micélio é o conjunto de hifas e pode ser classificado em:
Micélio aéreo: visto em cima do meio de cultura e responsável pela reprodução do fungo.
Micélio vegetativo: visto embaixo do meio de cultura e responsável pelas funções “fisiológicas” do fungo. 
Quais são as características morfológicas da colónia dos fungos filamentosos?
São colônias algodonosas, pulvurulentas (causam levantamento de pó), com pigmentação (em geral verde), crateriformes (formato de cratera) e a coloração do micélio aéreo para o vegetativo difere. 
Como é a estrutura dos fungos leveduriformes?
Apresentam formatos ovais ou esferoidais, são unicelulares, a parede celular é formada por polissacarídeos, proteínas e quitina (pouca quantidade). São bem similares às bactérias, porém são maiores. 
O que é o dimorfismo?
É a capacidade que alguns fungos leveduriformes apresentam de se comportar de maneira diferente frente a temperaturas diferentes, em dada temperatura assumem a morfologia de levedura e em outra assumem a morfologia de filamento. 
Quais são as características morfológicas da colónia dos fungos leveduriformes?
São colônias que possuem o formato ovoide, são esbranquiçadas e parecido com colônias de bactérias, porém maiores. 
O que são o clamidoconídeos, blastoconídeos e artroconídeos?
São fragmentos de hifa que podem se desprender do micélio vegetativo e cumprir funções de propagação, uma vez que as células fúngicas são autónomas.
Clamidoconídeos: têm a função de resistência, semelhante à dos esporos bacterianos. São células, geralmente arredondadas, de volume aumentado, com paredes duplas e espessas, nas quais se concentra o citoplasma. Em condições favoráveis se desprendem e dão origem a uma nova célula fúngica. É observado no micélio aéreo. Podem ser produzidos tanto por fungos filamentosos quanto por leveduriformes. 
Blastoconídeos: são comuns nas leveduras e derivam do brotamento da célula-mãe. Por vezes, os blastoconídios permanecem ligados à célula-mãe, formando cadeias, as pseudo-hifas, cujo conjunto é o pseudomicélio.
Artroconídeos: são formados por fragmentação das hifas em segmentos retangulares. Em condições favoráveis é possível visualizá-lo pois está associado com a reprodução celular. São característicos de fungos filamentosos. 
O que são macroconídeos e microconídeos?
São estruturas na ponta do hifa capazes de liberar os conídios responsáveis pela reprodução do fungo. Característico de fungos filamentosos. 
Quais são as principais formas de reprodução assexuada de cada tipo de fungo?
Filamentosos: artroconídeos e conídios.
Leveduriformes: fissão e brotamento. 
Qual é a importância do fungo?
São decompositores, auxiliam na produção de antibióticos, pois produzem resíduos de metabolismo que são tóxicos para outros micro-organismos, como bactérias. 
Como é a classificação dos fungos?
A classificação é feita de acordo com a natureza dos estágio sexual em seu ciclo de vida. É complexa pois em alguns fungos não são observados os ciclos sexuais. 
Zygomycota (Bolores de Pão) – Micélio complexo formado por hifas não septadas com parede quitinosa. Os esporos são facilmente disseminados (transportados pelo ar) e produzem novas hifas. Ex.: Rhizopus.
Ascomycota (Fungos em forma de saco) – Hifas septadas em forma de saco. Ex: Penicillium notatum, P. roquefortii e P. camemberti. Leveduras: Saccharomyces.
Basidiomycota (Fungos em forma de clava – basídios) – Cogumelos, cogumelos venenosos. Fungos causadores de ferrugem e fungos fitopatogênicos Ex. Cryptococcus.
Deuteromycota (Fungos Imperfeitos) – Não foi observado estágio sexual em seu ciclo de vida. Produzem esporos assexuados e com formato de saco.
Como é o metabolismo dos fungos?
Os fungos são microrganismos heterotróficos e, na sua maioria, aeróbios obrigatórios. São parasitas de plantas, animais e humanos. Se alimentam de vegetação em decomposição ou carcaças em putrefação. Os fungos de importância médica, em geral, são mesófilos, apresentando temperatura ótima entre 20° e 30°C. A maioria dos fungos tolera amplas variações de pH.
Descreva sobre a Candida spp.
É um fungo leveduriforme dimórfico com formação de blastoconídeos e clamidoconídeos. Podem formar pseudo-hifas (proliferação ativa e invasividade). São aeróbio obrigatório, toleram ampla faixa de pH e de temperatura e são resistentes ao congelamento. Habita a mucosa da maioria dos mamíferos e aves (trato digestivo e genital). Normalmente acomete imunossuprimidos. Causa “sapinho” em aves, primatas e mamíferos marinhos, lesões ulcerativas em potros, suínos e carnívoros de pequeno porte, mastite em bovinos. No trato genital de equinos pode causar metrite, abortos e infertilidade. Infecções intestinais, respiratórias e septicêmica ocorrem eventualmente. 
Quais são os fatores de virulência da Candida spp.?
Produzem enzimas peptidolíticas e protease e neuraminidase (responsável pela quebra de membranas no hospedeiro).
Como é feita a identificação de Candida?
Inoculação em soro (0,5 ml) e incubação por 3h a 37 graus. Visualização em lâmina: filamento fino e cilíndrico, originado do blastoconídio da levedura, no qual não se observa nenhuma zona de constrição, quer na base ou ao longo de sua extensão (tubo germinativo). As colônias são brancas, cremosas a pastosas. Pode ser usado meios de cultura como o Ágar sangue, Ágar sabouraud, Ágar fubá e Ágar batata. O auxanograma é usado quando a espécie em questão não é Candida albicans. É feito assimilação de carboidratos 
O que é candidíase? 
Doença causada por Candida albicans, está vinculada a desequilíbrios imunes e hormonais, diminuição da resistência à colonização ou intensa exposição dos hospedeiros debilitados. O agente é encontrado possivelmente no trato digestório anterior (infecções no trato genital, unha, pele, trato respiratório e septicemia podem ocorrer). Na maioria das vezes a contaminação é endógena (microbiota).
Como é feito o tratamento para a candidíase?
Na avicultura é utilizado o sulfato de cobre na água. Para mamíferos com infecções na mucosa e pele é utilizado a anfotericina B e o miconazol. Para cães e gatos o fluconazol é mais utilizado (TU).
Como é feito o diagnóstico de Candida albicans?
Coleta de swabs, imprints e cortes histológicos. Na microscopia são observados pseudo-hifas e o tubo germinativo. O Ágar mais indicado é o CHOMágar que é seletivo e diferencial para Candida. 
Descreva sobre o fungo Cryptococcus neoformans. 
Trata-se de um fungo dimórfico (basidiomiceto), apresenta cápsula em sua forma leveduriforme que lhe confere proteção pois inativa o sistema complemento. Cresce em meios comuns e em temperatura corporal ou ambiental (25ºC ou 37ºC). Viveem superfícies sujas e excrementos ricos em creatinina (excrementos secos de pombos que são animais reservatórios). Acomete animais e humanos. A transmissão se dá pela inalação, porém não é contagiosa. Apresentam antígenos A e D (ao contrário da variedade gatti que apresenta antígenos B e C. Elas se diferenciam na bioquímica, epidemiologia e morfologia). 
O que é criptococose? Qual é o tratamento e como é feito o controle?
Doença que acomete principalmente o sistema nervoso central após disseminação dos pulmões. Em cães e gatos surgem lesões ulcerativas da mucosa do nariz, lesões cutâneas ulcerativas e hematogênicas. Em bovinos causa mastite com destruição do epitélio lactífero. 
O tratamento é feito com fluconazol e para o controle é preciso desinfectar superfícies com solução de cal utilizando máscaras. 
Como é feita o diagnóstico de Cryptococcus neoformans?
É uma levedura que não fermenta carboidrato. A identificação é feita por assimilação de carboidratos por meio oxidativo (glicose, maltose, sacarose). Faz hidrólise de ureia e não utiliza nitrato. Meio de cultura contendo dopamina a espécie forma colônia mucoide com pigmentação marrom (doce-de-leite) devido a produção de melanina. É um meio diferencial. 
Descreva sobre a Malassezia. 
Trata-se de um fungo dimórfico (basidiomiceto) e lipofílico, saprófita de conduto auditivo externo e superfície cutânea de mamíferos. M. furfur, M. sympodialis e M. slooffiae, M. globosa e M. obtusa são as espécies mais conhecidas. Está associada a doenças de pele e pelo em animais. No meio de cultura pode-se acrescentar azeite observando halos de atividade lipolítica. 
Quais são os sintomas da dermatite, otite e pododermatite canina causadas por Malassezia? Como é feito o tratamento?
Pelo escurecido, perda de pelo, regiões úmidas e de dobras (áreas de colonização). Otite externa apresentando secreção fétida e com aspecto escuro e dermatite em patas. 
O tratamento é feito com uso tópico de sulfito de selênio em adição à cetoconazol e tioconazol.
Descreva sobre o Penicilium spp.
É um fungo filamentoso, encontrado no solo, vegetação e vegetação em composição. Trata-se de um contaminante e está associado a doenças em imunossuprimidos. Fazem reprodução assexuada pelo micélio aéreo (disseminação de conídios). 
O que é a peniciliose?
Doença causada por Penicilium spp., causando comprometimento do trato respiratório (pneumonia), pois a transmissão é através da inalação e conforme a evolução da doença, comprometimento do trato urinário. Pode causar endocardite, peritonite, lesões traumáticas como foliculite traumática, ceratite, endoftalmite e otomicose. A ingestão dos conídios causa esofagite necrótica. Produção de micotoxinas: Ocratoxina A (nefrotóxica e carcinogênica).
Descreva sobre o Penicilium marneffei apontando os comprometimentos que pode causar no organismo e o tratamento.
Trata-se de um fungo dimórfico. O reservatório principal desse fungo são ratos. É um fungo patogênico e a doença causada por ele possui curso rápido e fatal (fungemia). A infecção ocorre através da inalação de conídios e causa doença pulmonar. A evolução compromete fígado, baço, ossos e sistema linfático (produz pápulas na face, tronco e extremidades). Apesar da doença apresentar curso fatal existem fungicidas, o uso de anfotericina B auxilia no tratamento contra surtos comuns da doença, porém é tóxico; o fluconazol é menos tóxico e também é usado. 
Qual micotoxina é produzida por esse fungo?
A principal é a ocratoxina presente em milho, cevada, arroz e grãos em geral; é uma toxina bioacumulativa, teratogênica, carcinogênica e nefrotóxica; responsável pela nefropatia micotóxica suína e aviária. Os sintomas envolvem: piora a conversão alimentar, diminuição da produção de ovos e da qualidade da casca do ovo, diarreia, tremores, lesões renais, menor ganho de peso, menor crescimento e excreção urinária alterada. 
Descreva sobre o fungo Fusarium.
São fungos saprófitos de solo, água e plantas. São filamentosos não-dimórficos. Causam infecções superficiais (pele), sistêmicas e podem ser contaminante ambiental e oportunistas. As espécies patogênicas são: Fusarium oxysporum, Fusarium solani e Fusarium moniliforme. Causa micoses superficiais como traumatismo, ceratite (formação de pseudomenbrana esbranquiçada) e doença nasal do cão (inalação de esporos). Na forma disseminada acomete trato respiratório e urinário.
Como se faz o cultivo e quais são as características das colônias?
O cultivo pode ser feito nos meios de cultura tradicionais (Ágar sabouraud, Ágar batata) e leva de 2-4 dias para se observar crescimento. As colônias são algodonosas e observa-se macroconídios fusiformes, hialinos, com forma de meia-lua ou canoa; podem ser bisseptados ou multisseptados. 
Qual micotoxina é produzida por esse fungo? O que causa?
Produz fumonisina que causam leucoencefalomalacea equina, edema pulmonar em suínos, câncer esofágico humano, lesões hepáticas e pancreáticas em suínos e animais de companhia, imunosupressão em aves e câncer hepático em animais de laboratório.
Quais são os sintomas da leucoencefalomalacea equina?
Apatia, sonolência, paralisia faringeana, cegueira, andar em círculos, cambaleios, convulsão e incapacidade de levantar. A morte costuma ocorrer em 2 a 3 dias.
Qual fungo produz a micotoxina zearalenona? O que pode causar no organismo do animal acometido? 
Produzida por Fusarium roseum. Está relacionada a problemas hormonais como hiperestrogenismo com infertilidade, tumefação vaginal, prolapso de reto e aumento das glândulas mamárias. O leite apresenta resíduos dessa micotoxina, podendo ser passado para o filhote. 
Descreva sobre o Aspergillus.
Trata-se de fungos saprófitas, presentes no solo, vegetação, água. Em alimentos está presente em ração, grãos, vegetais, feno, silagem e adubo químico. Causam infecção oportunista através da inalação. A espécie patogênica é o A. fumigatus, causando doença em humanos e animais. As colônias podem ser brancas, verdes, amarelas, marrom ou negras. Não são dimórficos. 
Quais complicações podem ocorrer no organismo do animal acometido por esse fungo?
No pulmão pode haver formação de um aspergiloma (abcesso) levando a tosse e outros problemas respiratórios. Pode causar mastite com formação de abcessos no úbere (A. furmigatus), infecções intrauterinas levando a abortos micóticos (ocorre a partir de uma infecção pulmonar que alcançou a corrente sanguínea), ceratomicose equina com uveíte a partir de lesão da córnea, em cães causa osteomielite (em casos de cirurgias ortopédicas) e pode levar a aspergilose nos seios nasais. 
Em aves pode causar aspergilose aviária, a infecção ocorre através da inalação de esporos ambientais e condições de estresse. O foco primário é pulmonar e possui disseminação hematogênica. O animal apresenta distúrbios de comportamento, respiração ofegante e formação de granulomas caseosos nos sacos aéreos.
Qual micotoxina é produzida? O que pode causar no organismo do animal acometido?
É produzida a aflatoxina. A Aflatoxicose aguda ocorre quando há ingestão de aflatoxinas em grande quantidade. Os principais sintomas nesta intoxicação estão relacionados com doença hemorrágica aguda, lesão hepática aguda, edema e síndrome de má-absorção, podendo em alguns casos, evoluir para o óbito. A Aflatoxicose crônica ocorre pela exposição constante a baixas doses desta toxina. O paciente pode desenvolver doença hepática crônica com evolução para cirrose e carcinoma hepatocelular. Essa toxina está presente em amendoim, nozes, castanhas, amêndoas, trigo, aveia, milho, algodão, entre outros. 
Quais são os principais sintomas da aflatoxina em aves?
Dependendo da quantidade: diminuição da postura e do ganho de peso, redução da resistência, hemorragias, necrose hepática e morte aguda. 
Quais são os principais sintomas da aflatoxina em bovinos?
Dependendo da quantidade: resíduos no leite, redução na produção de leite, da conversão alimentar e do ganho de peso, imunossupressão e coagulopatias.Como é feito o diagnóstico das espécies de Aspergillus?
Pode ser feito com histopatologia ou sorologia. O diagnóstico clínico é feito correlacionando os dados clínicos com o micológico. O diagnóstico micológico é feito com esfregaço direto (KOH 10-40%) e observa-se hifas hialinas regulares, septadas com dicotomia (bifurcação) em ângulo reto. 
A cultura pode ser feita em Ágar sabouraud, Ágar sabouraud+cloranfenicol ou Ágar sabouraud+cloranfenicol+cicloheximida. A incubação é em temperatura de 25-30ºC por 2-4 dias. Observação das características macro e micromorfológicas da colônia.
Aspergillus fumigatus: colônia algodonosa e branca (fase inicial); formação da cabeça aspergilar, coloração cinza-esverdeada e colônia veludosa. Reverso branco ou castanho.
Aspergillus niger: na fase inicial observa-se colônia branca ou amarela e algodonosa. Após isso, coloração negra.
Aspergillus flavus: colônias com textura arenosa e coloração amarelo-esverdeada; reverso branca ou cinza.