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M E L I S S A L I M O E I R O E S T R A D A G U T A R R A Fermentação Classificação Quais são os principais tipos de fermentação? São classificadas em relação ao tipos de fase Fase aquosa – fermentação submersa (em profundidade) ou fermentação em superfície (processo utilizado antigamente para produção de ácido cítrico) Fermentação submersa – grande maioria dos processos industriais – inclui os reatores mostrados anteriormente Fase não-aquosa - fermentação no estado sólido Fermentação submersa (FS) Características - meio de cultivo líquido contendo nutrientes solúveis – podem ser complexos ou de composição definida - equipamento: fermentadores fechados equipados com agitadores, aeradores e controladores (pH, T, O2, …) Resíduos agroindustriais inóculo: esporos ou células propagados em frascos agitados e pré-fermentadores A maioria dos micro-organismos podem ser cultivados por FS (algas, fungos filamentosos, leveduras, bactérias, arqueias e células animais) Biorreatores - Geralmente agitado - diferentes tipos de agitação - Aerados e não aerados (produção de etanol, ácido lático) Apresenta uma fase liquida contínua e uma fase gasosa acesso ao oxigênio se dá pela fase liquida Gargalo do escalonamento – solubilidade do oxigênio na fase liquida -Homogeneidade - Calor, nutrientes, produtos e O2 uniformemente distribuídos Permite maior medida e controle dos parâmetros – pH, temperatura . • Biorreatores convencionais – tanques agitados • Biorreatores não-convencionais – air-lift ou coluna de bolhas, biorreatores com células imobilizadas e de membranas Principais etapas da FS Aplicações - antibióticos - enzimas - levedura de panificação - cerveja - ácidos orgânicos - etanol Fermentação no estado sólido (FES) Fermentação no estado sólido (FES) é geralmente definida como o crescimento de microorganismos em materiais sólidos úmidos na ausência ou quase ausência de água livre, apresentando fase contínua de gás no espaço entre as partículas. Fase gasosa contínua Fase líquida Gotas de água Água e nutrientes absorvidos no material sólido Características: - Ausência ou quase ausência de água livre - Meio de cultivo : compostos de origem vegetal ou meio definidos ou semi-definidos - Matriz sólida: compostos vegetais ou matrizes inertes Emprego de rejeitos agroindustriais - compostos vegetais (amberlite, perlite, vermiculite, polipropileno, poliuretano) - Suportes inertes Que microrganismos crescem em FES? - Bactérias (enzimas, compostagem, alimento) Bacillus sp., Pseudomonas sp., Serratia sp., Streptococcus sp., Lactobacillus sp. - Leveduras (Alimento, etanol, ácido cítrico) Saccharomyces cerevisiae, Candida tropicallis, Yarrowia lipolytica - Fungos filamentosos (muitas aplicações) Aspergillus sp., Fusarium sp., Mucor sp., Rhizopus sp., Penicillium sp. Características dos microrganismos que crescem em FES - São quimiotróficos e heterotróficos -Geralmente mesofílicos - São geralmente aeróbios - Crescem em baixa atividade de água - São capazes de utilizar compostos complexos como fonte de carbono e energia - produzem enzimas extracelulares Por que os fungos filamentosos são os mais empregados em FES? • crescimento em superfície sólida – mais próximo ao seu habitat natural •Crescimento em baixa atividade de água •penetração do material sólido – maior acesso aos nutrientes • Crescimento de hifas aéreas – capitação de oxigênio • Produção de esporos – dispersão e resistência • Produção elevada gama de enzimas extracelulares Figura Rahrdjo 2006 Crescimento de fungos filamentosos Crescimento em FES - Fungo filamentoso – pode crescer na superfície e no interior dos grãos (depende da porosidade da partícula) - Bactérias e leveduras – crescimento na superfície FES FS Meio de cultivo sem fase líquida Meio de cultivo com fase líquida Substratos insolúveis em água Substrato solúveis em água A água em quantidade apenas suficiente para o crescimento Grande quantidade de água A absorção de nutrientes ocorre a partir do substrato sólido umedecido Ocorre a absorção de nutrientes dissolvidos no líquido Presença de gradientes de calor, nutrientes, produtos e O2 Calor, nutrientes, produtos e O2 uniformemente distribuídos Maiores concentrações de inóculo Menores concentrações de inóculo Aeração disponibiliza O2 e remove o calor metabólico e os produtos gasosos Aeração disponibiliza O2 e remove os produtos gasosos, mas o calor metabólico é removido por dispositivos específicos para troca de calor Agitação facultativa Agitação geralmente essencial Produtos mais concentrados Produtos menos concentrados O crescimento fúngico envolve penetração de hifas no substrato sólido Ocorre em forma de micélios individuais ou em aglomerados uniformemente distribuídos Bactérias e leveduras crescem aderidas ao substrato sólido Bactérias e leveduras crescem uniformemente distribuídas Vantagens da FES - Baixo custo - menor espaço requerido para os fermentadores em relação ao rendimento do produto - maior concentração do produto - menor probabilidade de contaminação por bactérias - apresenta condições de cultivo mais próximas às condições do habitat natural dos microrganismos - Maior produtividade - Enzimas com características melhores Desvantagens da FES - Sistema heterogêneo - Baixa transferência de calor e de massa - Dificuldade de monitoramento e controle de parâmetros -Dificuldades na ampliação de escala. -Avanços ainda recentes no desenvolvimento de biorreatores -Emprego de elevada concentração de inóculo 4) Microrganismos - principalmente fungos filamentosos 24h 48h Penicillium simplicissimum Principais etapas da FES Funções do biorreator - Deve suportar o leito e evitar liberação do microrganismo produtor e a entrada de contaminantes. - Permitir da melhor forma possível o controle das condições do ambiente, como temperatura e atividade de água, modificadas pelo crescimento do microrganismo. Aplicações da FES - Produtos: # produtos bioativos - alto valor agregado (micotoxinas, antibióticos, fatores de crescimento de plantas) # enzimas - redução de custos (proteases, celulases, lipases) # ácidos orgânicos (ácido cítrico, ácido lático) # biopesticidas - maior produtividade # aromas - maior produtividade - Processos: biorremediação e biodegradação de compostos; detoxificação de resíduos agro-industriais
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