Separação de pigmentos foliares por cromatografia em papel.

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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DO ESPIRITO SANTO IFES- Campus SANTA TERESA
Curso: Agronomia
Disciplina: Fisiologia Vegetal
Professor: Hediberto Nei Matiello
	
	
Relatório de Aula Prática:
RELATÓRIO 4: Separação de pigmentos foliares por cromatografia em papel.
Aluno: Vinicius Bonatto Roldi
Santa Teresa
2017
1 - Introdução
A cromatografia é utilizada para identificar e separar compostos com peso molecular e cores diferentes. O papel serve como a fase estacionária por onde os compostos cromatográficos migram por capilaridade. A afinidade química entre o papel e a fase móvel e as características dos compostos em análise contribuem para a nitidez da separação.
2 - Materiais e métodos
Materiais
- Folhas frescas de Croton sp e Ixora sp.
- Carbonato de cálcio.
- Areia fina lavada.
- Álcool 95%.
- Funil.
- Placa de Petri de 20 cm de diâmetro.
- Vidro do tipo maionese com tampa.
- Papel de filtro.
- Fita adesiva.
- Tesoura.
- Almofariz.
- Gotas.
Métodos
- Macerar as folhas adicionando uma pitada de areia e outra de carbonato de cálcio;
- Misturar o macerado com álcool etílico e filtrar;
- Antes da maceração, as folhas podem ser aquecidas em banho-maria para melhorar a retirada dos pigmentos foliares;
- Distribuir o filtrado até a altura de 1 cm dentro da placa de Petri de 20 cm de diâmetro;
- Colocar papel em forma de cilíndro com a base imersa no conteúdo da placa de Petri e esperar cerca de 3 minutos;
- Retirar e secar ao ar livre. Após a secagem, colocar o papel com a base mergulhada até 1 cm em uma placa de Petri de 20 cm de diâmetro e cheia de álcool metílico;
- Esperar até que os pigmentos atingem mais da metade do papel, retirar, secar e observar as bandas de pigmentos produzidas;
3 - Resultados e Discussão
A cromatografia consiste numa técnica de separação dos componentes de uma mistura homogénea com base nas suas diferentes afinidades para serem retidos por um material estacionário.
Com a maceração das folhas os pigmentos de clorofila e carotenoides ficaram livres no meio aquoso (tetracloreto de carbono), e ao filtrar no papel filtro ocorreu à separação dos pigmentos, já que possuem pesos moleculares diferentes. Com a técnica de cromatografia possibilitou-se a visualização das separação da cor verde ( clorofilas A e B) e amarelada (carotenóides).
4 - Conclusão
 Pelo método de cromatografia em papel é possível separar os carotenoides da clorofila e de outras substancias presentes nas folhas da planta do café.
5 - Respostas aos questionamentos:
Quais pigmentos foram observados?
Os pigmentos observados são foram os carotenóides (carotenos e xantofilas) com a cor amarelo e as clorofilas A e B com a cor verde.
Folha mais velha ou nova, cultivadas a sombra ou a pleno sol poderiam apresentar diferença? Por quê?
Sim, pois folhas mais velhas e cultivadas a pleno sol apresentariam mais carotenóides para sua proteção. A clorofila B e encontrada em maior quantidade em plantas de sombra, pois a técnica de absorver a luz em menor quantidade, mas com mais eficiência.
Qual a função de cada substância identificada?
Os carotenoides: Estes pigmentos de cor laranja funcionam como pigmentos antena e agentes fotoprotetores. 
As clorofilas pertencem a um grupo de pigmentos verdes absorventes de luz, ativos na fotossíntese.
6 - Referências 
EXPLICATORIUM, Cromatografia. Ultimo acesso em 05/10/2017, <http://www.explicatorium.com/CFQ7-Cromatografia.php>
TAIZ, L.; ZEIGER. E. Fisiologia vegetal. São Paulo: Artmed,4ªedição, p. 777 e 779, 2009.