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1. Cite aplicações da microbiologia nos diferentes segmentos nutricionais, farmacêuticos, pesquisa e biotecnologia. R: Utilização Industrial - Fermentação da cana -de-açúcar para produção de álcool. Produção de alimentos reguladores intestinais: Lactobacilos; Produção de vinagre: Acetobacter sp. Odontologia: Estudo de microrganismos associa dos à placa dental, cárie dental e doenças periodontais. Estudos com abordagem preventiva. Medicina e Enfermagem: Doenças infecciosas e infecções hospitalares. Nutrição: Doenças transmitidas por alimentos, Controle de qualidade de alimentos, Produção de alimentos. Biologia: Aspectos básicos e biotecnológicos. Produção de antibióticos, hormônios (insulina, GH), enzimas (lipases, celulases), insumos (ácidos, álcool), Despoluição (Herbicidas - Pseudômonas, Petróleo). Biotecnologia e Engenharia genética - Expandir potencial de Bactérias para uti ligações nas indústrias. Linhagem de Bactérias ou vírus geneticamente alterados para utilização em lavouras contra pragas. Produção de medicamentos e vacinas –Detergentes. 2. Diferencie microrganismos patogênicos, oportunistas e benéficos. R: Patogênicos – São microrganismos causadores de doenças. Oportunistas – São microrganismos que aproveitam um estado imunológico baixo para se instalar no hospedeiro. Benéficos – São microrganismos que trazem algum benefício ao hospedeiro. 3. Descreva as teorias da Biogenese e Abiogenese, dando ênfase par os principais pesquisadores envolvidos nestas teorias. R: Abiogenese - Segundo a abiogênese, os seres vivos podiam surgir de variadas formas a partir de uma matéria sem vida. Os principais defensores da abiogênese foram: Aristóteles, Jean Baptitste Van Helmot, Willian Harvey, René Descartes, Isaac Newton e John Needhan. Biogenese - A teoria da biogênese admite que todos os seres vivos são originados de outros seres vivos preexistentes. Atualmente, é a teoria aceita para explicar a origem dos seres vivos. Louis Pasteur foi o responsável por derrubar definitivamente a teoria da abiogênese. Ele realizou um experimento demonstrando que a fervura de caldos nutritivos não destruía a "força vital" e os microrganismos surgiam sempre que o caldo entrava em contato com ar. Assim, os microrganismos presentes no ar eram os responsáveis por originar outros, provando que os seres vivos só se originam a partir de outros preexistentes. Os principais defensores da biogênese foram: Ernest Haeckel, Thomas Henry Hurley, Stanley Miller, Lázzaro Spallanzani, Francesco Redi e Louis Pasteur. 4. Descreva o princípio da teoria da geração espontânea através dos experimentos da pesquisa de Pasteur. R: Os experimentos de Pasteur foram realizados com quatro frascos de vidro, cujos gargalos foram esticados e curvados no fogo após todos terem sido enchidos com caldos nutritivos. Logo em seguida, Pasteur ferveu o caldo de cada um dos quatro frascos, até que saísse vapor dos gargalos longos e curvos e deixou-os esfriar. Depois de um tempo, Pasteur observou que, embora todos os frascos estivessem em contato direto com o ar, nenhum deles apresentou micro-organismos. Pasteur então quebrou os gargalos de alguns frascos e observou que, em poucos dias, seus caldos já estavam repletos de micro-organismos. A ausência de micro-organismos nos caldos que estavam nos frascos cujos gargalos eram curvos e longos com a presença desses seres nos frascos cujos gargalos foram quebrados mostraram que o ar contém micro-organismos e que eles, ao entrarem em contato com o caldo nutritivo, desenvolvem-se. Nos frascos que apresentavam gargalo curvo e longo, os micro-organismos não conseguiram chegar até o líquido porque ficaram retidos no “filtro” formado pelas gotículas de água que apareceram no pescoço do frasco durante o resfriamento. Nos frascos que tiveram seu pescoço quebrado, o “filtro” formado pelo vapor deixou de existir, deixando o líquido vulnerável aos micro-organismos, que, uma vez em contato com o líquido, encontraram condições adequadas para o seu desenvolvimento. A partir desse experimento, Pasteur mostrou que um líquido, ao ser fervido, não perde a “força vital”, como defendiam os adeptos da abiogênese, pois quando o pescoço do frasco é quebrado, após a fervura desse líquido, ainda aparecem seres vivos. Dessa forma, Pasteur sepultou de vez a teoria da abiogênese ou geração espontânea, que admitia que os seres vivos originavam-se a partir de matéria bruta. 5. Diferencia todos os aspectos relacionados a organismos procariontes e eucariontes. R: Procariontes - As seguintes estruturas e organelas podem ser encontradas em células procarióticas: Cápsula - Cobertura externa adicional que protege a célula, que impede a desidratação, favorece a adesão às superfícies e protege a célula; Parede celular - Cobertura externa que protege a célula bacteriana e dá a sua forma; Citoplasma - O citoplasma é uma substância semelhante a um gel. Seu papel é dar estrutura e manter a forma da célula; Plasmídeo - Moléculas duplas de DNA que armazenam material genético; Membrana Celular - A membrana celular envolve o citoplasma da célula e regula o fluxo de substâncias dentro e fora dela; Flagelo e cílio - Ajudam na locomoção da célula; Ribossomo - Os ribossomos são estruturas celulares responsáveis pela produção de proteínas; Nucleoide - Área do citoplasma que contém a molécula de DNA. Eucariontes – As seguintes estruturas e organelas podem ser encontradas em células eucarióticas: Núcleo: O núcleo é o maior e mais visível organelo em uma célula eucariótica. Ele contém o DNA da célula; Retículo Endoplasmático: Sua função é produzir e enviar proteínas e lipídios; Complexo de Golgi: O complexo de Golgi modifica as moléculas celulares e é responsável pelo envio de materiais para fora da célula. É também a única organela que pode gerar lisossomos; Lisossomos: Funcionam na digestão celular; Peroxissomas: Os peroxissomas possuem enzimas que transformam átomos de hidrogênio em oxigênio; Nucléolos: Localizam-se no interior do núcleo, onde acontece a síntese de ribossomos; Mitocôndrias: Responsáveis por liberar energia das moléculas de glicose e dos ácidos graxos; Vacúolos: Estruturas que armazenam substâncias relacionadas à digestão ou à nutrição celular; Plastos: Presentes apenas em células eucarióticas vegetais. Responsáveis pela fotossíntese e armazenamento de substâncias. São de três tipos: cloroplastos, cromoplastos e leucoplastos. 6. Diferencie os conceitos de Imunidade, Sistema Imunológico e resposta Imunológica. R: Imunidade - É chamada de imunidade a capacidade de se defender de determinadas enfermidades, normalmente infecciosas. Pode ser Inata ou Adaptativa. Sistema Imunológico - Todo organismo tem um conjunto de mecanismos de defesa contra as enfermidades. Esse conjunto se chama sistema imunológico. Resposta Imunológica – Conjunto de reações do sistema imunológico ocasionadas por algum agente infeccioso. Pode ser Humoral ou Celular. 7. Descreva as características e a importância das estruturas fundamentais e acessórias de uma célula Bacteriana. R: A célula bacteriana, por ser procariótica, não possui organelas membranares nem DNA organizado em verdadeiros cromossomas, como os das células eucariotas. Estruturas da célula procariota: Os pili são micro fibrilas proteicas que se estendem da parede celular em muitas espécies Gram-negativas. Têm funções de ancoramento da bactéria ao seu meio e são importantes na patogênese. Um tipo especial de pilus é o pilus sexual, estrutura oca que serve para ligar duas bactérias, demodo a trocarem plasmídeos. Os plasmídeos são pequenas moléculas de DNA circular que coexistem com o nucleóide. São comumente trocados na conjugação bacteriana. Os plasmídeos têm genes, incluindo frequentemente aqueles que protegem a célula contra os antibióticos. Os ribossomos procariotas são diferentes dos eucariotas e essas diferenças foram usadas para desenvolver antibióticos que só afetam os ribossomos bacterianos. O citoplasma é preenchido pelo hialoplasma, um líquido com consistência de gel, semelhante ao dos eucariotas, com sais, glicose e outros açúcares, RNA, proteínas funcionais e várias outras moléculas orgânicas. A membrana celular é uma dupla camada de fosfolípidos, com proteínas imersas. A parede celular bacteriana é uma estrutura rígida que recobre a membrana citoplasmática e confere forma às bactérias. É uma estrutura complexa composta por peptidoglicanos - polímeros de carboidratos ligados a proteínas. É alvo de muitos antibióticos, incluindo a penicilina e seus derivados, que inibem as enzimas transpeptidase e carboxipeptidase, responsáveis pela síntese dos peptidoglicanos. Contém em espécies infecciosas a endotoxina lipopolissacarídeo (LPS). Algumas espécies de bactérias têm uma camada de polissacarídeos que protege contra desidratação, fagocitose e ataque de bacteriófagos, chamada de cápsula. O nucleóide consiste em uma única grande molécula de DNA com proteínas associadas, sem delimitação por membrana - portanto, não é um verdadeiro núcleo. O seu tamanho varia de espécie para espécie. O flagelo é uma estrutura proteica que roda como uma hélice. Muitas espécies de bactérias movem-se com o auxílio de flagelos. Os flagelos bacterianos são completamente diferentes dos flagelos dos eucariotas. Vacúolos bacterianos: não são verdadeiros vacúolos, já que não são delimitados por dupla membrana lipídica como os das plantas. São antes grânulos de substâncias de reserva, como açúcares complexos. Algumas bactérias podem enquistar, formando um esporo, com um invólucro de polissacáridos mais espesso e ficando em estado de vida latente enquanto as condições ambientais forem desfavoráveis. 8. Qual a importância da parede celular bacteriana e sua relação com o diagnostico de bactérias gran + e gran - ? R: A parede celular bacteriana é uma estrutura rígida que recobre a membrana citoplasmática e confere forma às bactérias. É uma estrutura complexa composta por peptidoglicanos - polímeros de carboidratos ligados a proteínas. É alvo de muitos antibióticos, incluindo a penicilina e seus derivados, que inibem as enzimas transpeptidase e carboxipeptidase, responsáveis pela síntese dos peptidoglicanos. O diagnostico para definir uma bactéria em G+ ou G- é feito através da analise dessa parede celular, formada por Peptidogliano, que visualizando sua espessura dita-se G+ ( maior espessura ) e G- menos espessura e sua coloração Azul - G- e Vermelha – G+. 9. Defina esporos e suas funções. Dê exemplos de microrganismos capazes de fabricar esporos. R: Os esporos são estruturas pequenas produzidas em grande quantidade por bactérias, fungos e plantas, com capacidade de gerar um novo indivíduo. São extremamente desidratados e possuem múltiplas camadas, que o tornam resistentes ao calor, agentes químicos e físicos e radiação. Os esporos bacterianos ou endósporos atuam como estruturas de sobrevivência quando a bactéria encontra-se em condições ambientais desfavoráveis. Eles são produzidos pela própria bactéria e encontram-se livremente em seu interior. Inclusive, a posição do endósporo é usada como forma de identificação das espécies. A esporulação é o processo pelo qual as bactérias produzem esporos quando estão em um ambiente desfavorável à sua sobrevivência. Nesse período, há redução do metabolismo e não ocorre multiplicação e crescimento. Ex: Bacillus e Clostridium A reprodução sexuada e assexuada dos fungos é garantida pela produção de esporos. Os esporos assexuados formam-se por mitose e posterior divisão celular, sem fusão de núcleos. Quando os esporos germinam, tornam-se organismos geneticamente idênticos ao parental. Os esporos sexuados resultam da fusão de núcleos de duas linhagens opostas de cruzamento de uma mesma espécie de fungo. Esse tipo de esporo é menos frequente. Algumas plantas, como os musgos e as pteridófitas, também se reproduzem a partir de esporos. Nas plantas, os esporos são produzidos nos esporângios desenvolvidos no interior dos soros. Os soros caracterizam-se por um aglomerado de esporângios. Na época de reprodução, os soros amadurecem e os esporângios produzem esporos por meiose. Quando os esporângios se rompem, liberam os esporos no ar. Daí eles podem ser dispersados, permitindo que as plantas possam colonizar novas áreas. Quando os esporos encontram um substrato adequado, com umidade, acontece a germinação. 10. Cite as principais morfologias dos microrganismos juntamente com seus exemplos. R: As bactérias possuem 3 tipos de morfologias macros: cocos, bacilos e espiralados. Formas de cocos (esféricas) – é o grupo de bactérias mais homogêneo em relação ao tamanho. Os cocos tomam denominações diferentes de acordo com o seu arranjo: Micrococos – cocos. ( Methanococcus ) Diplococos – cocos agrupados aos pares. ( Neisseria sp (gonococo) ) Tétrades – agrupamentos de quatro cocos. ( Deinococcus sp ) Sarcina – agrupamentos de oito cocos em forma cúbica. ( Methanosarcina sp ) Estreptococos – cocos agrupados em cadeias. ( Streptococcus sp ) Estafilococos – cocos agrupados em grupos irregulares, lembrando cachos de uva. ( Staphylococcus sp) Forma de bastonete – são células cilíndricas em forma de bastonete. Apresentam grande variação na forma e no tamanho entre gêneros e espécies. Exemplos de bastonetes: Halobacterium e Salmonella, causadora de aguda infecção intestinal em humanos. Formas espiraladas – caracterizadas por células em espiral; dividem-se em: • Espirilos – possuem corpo rígido e movem-se à custa de flagelos externos. Ex.: Gênero Aquaspirillium (Figura 3.3). • Espiroquetas – são flexíveis e locomovem-se geralmente por contrações do citoplasma, podendo dar várias voltas completas em torno do próprio eixo. Ex.: Gênero Treponema Os fungos são classificados em bolores e leveduras. As leveduras podem ser ovais (Hansenula), redondas (Saccharomyces), cilíndricas (Kloeckera), triangulares (Trigonopsis), apiculares (Kloeckera) e ogivas (Bretanomyces). Os Bolores são classificados em Hifas ( Células alongadas e ramificadas ) 11. Diferencie organismos unicelulares e multicelulares. R: Os organismos multicelulares, também chamados de pluricelulares, apresentam uma grande quantidade de células. As células no corpo desses organismos são mais complexas e atuam de maneira conjunta para garantir a sobrevivência de um ser. Os organismos unicelulares são aqueles que possuem corpo formado por apenas uma célula. São autossuficientes e conseguem manter todas as suas atividades, como locomoção e alimentação, sem precisar de outra célula. Nas duas formas possuem reprodução sexuada e assexuada. 12. O que diferencia o vírus dos demais microrganismos. R: Os vírus são partículas infecciosas. Acelulados, os vírus se reproduzem a partir das células de outros organismos. A sua estrutura é composta por ácido nucleico de DNA, RNA ou ambos, envolvido por uma membrana de proteína chamada de capsídeo. 13. Diferencie os principais meios de cultura. Conceitos: Meio quimicamente definido: a composição química exata é conhecida. Meio complexo: tem componente proteico como fornecedorprimário de carbono, nitrogênio, enxofre e energia. Quando administrado em forma líquida, é chamado caldo nutriente. Como as proteínas são maiores do que a maioria dos microrganismos pode aproveitar adequadamente, peptonas (pequenas cadeias de aminoácido, provenientes da digestão proteica) podem ser fornecidas às bactérias. Meio redutor: contém reagentes que se ligam ao oxigênio dissolvido e o eliminam do meio de cultura. É usado para microorganismos anaeróbios. Meio seletivo: favorece o crescimento de determinada bactéria e inibe o de outra. Meio diferencial: permite a identificação da bactéria de interesse quando há mais de um tipo na placa. Meio de enriquecimento: sua adição favorece o crescimento de uma bactéria em relação às demais, que estão em maior quantidade. É considerado um meio seletivo. Tipos: Ágar nutriente (AN) - Meio relativamente simples, de fácil preparo e barato, muito usado nos procedimentos do laboratório de microbiologia. Finalidade: análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras submetidas à exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras, conservação e manutenção de culturas em temperatura ambiente, como método opcional para os laboratórios que não dispõem do método da criopreservação (congelamento das cepas em freezer à - 70ºC) e observação da esporulação de espécies de bacilos Gram-positivos. Ágar Sal Manitol - Esse meio de cultura é utilizado para isolamento de estafilococos, diferenciando as espécies coagulase-negativas de Staphylococcus aureus. O cloreto de sódio em alta concentração inibe parcial ou completamente outros micro-organismos bacterianos. A degradação do manitol pela produção de ácido muda a cor do meio para amarelo. Ágar Sangue - O meio, usando uma base rica, oferece ótimas condições de crescimento a maioria dos microrganismos. As conservações dos eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos, úteis para a diferenciação de Streptococcus spp e Staphylococcus spp. Finalidade: isolamento de microrganismos não fastidiosos, verificação de hemólise dos ptococcus spp e Staphylococcus spp e usado na prova de satelitismo. Ágar Chocolate ( CHOC ) - Amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os tipos de microrganismos. À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos exigentes. Ex: Haemophilus spp. Ágar MacConkey (MC) - O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram- positivos especialmente enterococos e estafilococos. A concentração de sais de bile é relativamente baixa em comparação com outros meios, por isso não é tão seletivo para Gram-negativos como, por exemplo, o ágar SS. Ágar Salmonella-Shigella (SS) - Possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sódio) que inibem microrganismos Gram-positivos. A incorporação de lactose ao meio permite diferenciar se o microrganismo é lactose positiva (bactérias que fermentam a lactose produzem ácido que na presença do indicador vermelho neutro resultando na formação de colônias de cor rosa), e bactérias que não fermentam a lactose formam colônias transparentes. Tissulfato de sódio e o citrato férrico permitem a detecção de H²S evidenciado por formação de colônias de cor negra no centro. Verifica a presença de Salmonela. Ágar Hektoen enteric (HE) - Os sais biliares e os corantes azul de bromotimol e fucsina ácida inibem o crescimento da maioria dos microrganismos Gram-positivos. Lactose, sacarose e salicina fornecem carboidratos fermentáveis para incentivar o crescimento e diferenciação de enterobactérias. Finalidade : isolamento e diferenciação dos membros da espécie Salmonella e Shigella. Ágar Cystine Lactose Electrolyte Deficient (CLED) - Usado para isolamento e quantificação de microrganismos presentes em amostras urina. A deficiência de eletrólitos inibe o véu de cepas de Proteus. Ágar Thayer-Martin Chocolate (TM) - É um meio rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o isolamento de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis, pois contém em sua fórmula antibióticos que inibem o crescimento de Neisserias saprófitas e outras bactérias, quando em amostras colhidas de sítios contaminados. Ágar Löwenstein-Jensen (LJ) - A base do meio é constituída por ovos integrais, o que permite amplo crescimento das micobactérias e o crescimento é satisfatório para o teste de niacina (que é positivo para Mycobacterium tuberculosis). Ágar Saboraud (AS) - Meio com nutrientes que favorece o crescimento de diversos fungos leveduriformes e filamentosos. Sua finalidade é cultivo e crescimento de Candida spp. e fungos filamentosos, particularmente associados a infecções superficiais e caracterização macroscópica do fungo filamentoso (colônia gigante). Ágar Regan-Lowe (RL) - Consiste em uma base de carvão vegetal acrescida de sangue (carneiro ou cavalo) e cefalexina. O carvão e o amido atuam como absorventes, removendo qualquer substância inibitória, o sangue tem função desintoxicante e enriquecedor e a cefalexina inibe a maioria dos contaminantes da microbiota do trato respiratório. Sua finalidade é isolamento de Bordetella spp. em amostras clínicas que são geralmente contaminadas com a microbiota do trato respiratório. Ágar verde brilhante (BG) - O extrato de levedura e duas peptonas fornecem os nutrientes; a lactose e a sacarose, juntamente com o vermelho de fenol, fornecem um sistema de diferenciação que exclui os fermentadores da lactose e/ou sacarose (ex: E coli ), enquanto que as salmonelas não produzem ácido a partir destes açúcares. Sua finalidade é isolamento de outras salmonelas que não sejam as S. Typhi existentes nas fezes e em outros materiais. Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB) - Elaborado por Holt-Harris e Teague e posteriormente modificado por Levine, o meio de cultura EMB possui uma combinação de eosina e azul de metileno como indicadores, promovendo uma diferenciação entre colônias de lactose positivas e negativas. O meio é inibidor parcial de micro-organismos Gram-positivos. Sua finalidade é isolamento de bacilos Gram-negativos (enterobactérias e não fermentadores) e verificação da fermentação ou não da lactose e sacarose. Caldo de Infusão Cérebro-Coração (BHI) - Meio de cultura líquido rico em nutrientes: infusão de cérebro-coração e peptona (fontes de nitrogênio, carbono, enxofre e vitaminas) e dextrose (carboidrato utilizado para fermentação). Sua finalidade é cultivo de micro- organismos (fastidiosos ou não), preparação de inóculos para testes de suscetibilidade aos antimicrobianos, testes de coagulase e motilidade em lâmina. Ágar Mueller-Hinton (MH) - Meio padronizado por Kirby e Bauer e pelo CLSI que oferece condições de crescimento das principais bactérias. Sua finalidade é realização do teste de avaliação da resistência aos antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test para enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus e Enterococcus sp. 14. Defina os tipos de bactérias em relação a temperatura, PH, oxigênio, pressão osmótica. R: Afinidade por oxigênio molecular: Aeróbios: estritos (obrigatórios). Dependem do oxigênio molecular. São capazes de produzir mais energia a partir dos nutrientes que os anaeróbios. Pseudomonas, Acinetobacter. Anaeróbios facultativos: Não dependem do oxigênio molecular, mas são capazes de aproveitá-lo, quando disponível.Estão presentes na água e no trato intestinal humano. Enterobactérias, estreptococos, estafilococos, E. coli e muitas leveduras. Anaeróbios obrigatórios: Incapazes de aproveitar o oxigênio molecular. Para muitos deles, este é prejudicial. Nos humanos, esses microorganismos causam abscessos mais profundos e infecções de odor característico (butírico, rançoso). Clostridium tetani e Clostridium botulinum. Anaeróbios aerotolerantes: toleram a presença de oxigênio molecular, pois conseguem atenuar a toxicidade proveniente do contato com ele. Podem viver em superfícies. Microaerófilos: têm crescimento aeróbio, mas só sobrevivem em baixas concentrações de oxigênio molecular. Campylobacter, Clostridium gengivalis, Clostridium perfringens. Definidas pela temperatura: Psicrófilos: Crescimento entre 0 e 20 °C. Temperatura ótima: 15°C. Psicrotróficos: Temperatura mínima é de 0°C. Temperatura ótima entre 20 e 30°C. Mesófilos: Os mais comuns. Têm crescimento entre 25 e 40°C. Os que habitam outros organismos normalmente têm temperatura ótima próxima à corporal de seu hospedeiro. Entre os mesófilos, estão a maioria dos microorganismos patogênicos e que degradam alimentos. Termófilos: Temperatura ótima entre 50 e 60°C. Muitos crescem em temperaturas menores que 45°C. Termófilos extremos ou hipertermófilos: são alguns dos membros do grupo archaea. Sua temperatura ótima é superior a 80°C. Definidas pelo PH: Acidófilas: crescem em pH < 5. Alcalófilas: crescem em pH > 5 Definidas pela salinidade: Halofílicas extremas ou obrigatórias: dependem de altas concentrações de sal para crescerem. Halofílicas facultativas: são mais comuns e independem de altas concentrações de sal. Crescem em concentrações de até 2% de sal (o que inibe o crescimento da maioria das outras bactérias). Poucas suportam concentração superior a 15%. Não Halofilicas: A salinidade é toxica, causando lise celular. Halotolerante: é aquele que tolera certa dose de salinidade (Concentração de 1 a 6% de Cloreto de Sódio). 15. Defina as fases de crescimento das bactérias. R: Fase Lag : Durante um certo período de tempo, o número de células sofre pequenas variações, as bactérias não se reproduzem imediatamente quando são colocadas em um novo meio de cultura. Este período em que ocorre pouca. Este período em que ocorre pouca ou ausência de divisão celular é chamado Fase Lag. Fase Log : A partir de um determinado momento as células iniciam seu processo de divisão entrando no período de crescimento ou aumento logaritmo, denominado de Fase Log ou fase de Crescimento Exponencial. Durante este período a reprodução celular encontra-se extremamente ativa onde o tempo de geração atinge um valor constante. Fase Estacionária: Em determinado momento a velocidade de crescimento diminui, o número de morte celular é equivalente ao número de células novas e a população se torna estável. A atividade metabólica de cada célula também decresce neste estágio. Este período de equilíbrio é denominado Fase Estacionário. Fase de Morte Celular: Em determinado momento a população microbiana entra na fase de morte celular ou fase de declínio o número de células mortas excede o número de células novas. 16. Diferencie os métodos diretos e indiretos usados na determinação dos microorganismos. R: Métodos diretos: Contagem em placa Filtração: usada na coleta de bactérias que estejam em pequena quantidade no meio líquido. O filtro tem poros pequenos o suficiente para impedir a passagem das bactérias. Após a passagem de 100 ml de líquido pelo filtro, este é transferido para a placa de Petri para a contagem. Número mais provável: usado para organismos incapazes de crescer em meio sólido. Parte do princípio de que, quanto mais diluições forem necessária para para eliminar o crescimento em tubos com o meio de cultura, maior a quantidade de bactérias na amostra. Contagem direta ao microscópio: o inóculo é espalhado pela lâmina. Corantes permitem que as bactérias sejam contadas e a quantidade de bactérias na amostra original é estimada. Métodos indiretos: Turbidimetria: o espectofotômetro calcula a turbidez da amostra. Quanto mais turva a amostra, maior a quantidade de bactérias presentes. Para que a turbidimetria seja usada, o número de bactérias não pode ser inferior a 10 milhões por ml. Quantificação de um metabólito: quanto maior a quantidade do metabólito, maior a de bactérias. Peso seco: o melhor método para quantificar fungos. Estes são filtrados, desidratados, dessecados e pesados. Pode ser usado em bactérias, que podem ser obtidas do meio por centrifugação. 17. Diferencie os conceitos de esterilização, desinfecção, sanitização, antissepsia, efeito bacteriostático e bactericida. R: Esterilização É o processo que remove ou destrói todas as formas de microorganismos presentes, como vírus, bactérias, fungos, protozoários e inclusive esporos, que são altamente resistentes. Desinfecção É o método capaz de eliminar muitos ou todos os microorganismos patogênicos, porém não são capazes de eliminar esporos. Usada em superfícies. Sanitização Conjunto de medidas adotadas na indústria alimentícia para fabricação de produtos dentro das condições higiênicas indispensáveis Assepsia Conjunto de técnicas aplicadas para prevenir a contaminação por microrganismos. Ela permite manter um ser vivo ou um meio inerte, isento de bactérias. Anti-sepsia É o método no qual se previne a proliferação de microrganismos em tecidos vivos com o uso de substância químicas, os anti-sépticos. Efeito bacteriostático O crescimento é inibido, mas não ocorre morte celular. Os agentes bacteriostáticos são frequentemente inibidores de síntese proteica e actuam por ligação aos ribossomas; Efeito bactericida Ocorre morte das células mas não há lise celular; Efeito bacteriolítico Há indução da morte celular por lise, levando à diminuição da turbidez da cultura e do número de células viáveis. Exemplos de agentes bacteriolíticos são os antibióticos que inibem a síntese da parede celular em bactérias, como é o caso da penicilina. 18. Cite os principais agentes físicos e químicos aplicados no controle microrganismos. R: Métodos físicos: Temperatura, filtração (filtro de água), radiação, vibração ultrassônica, remoção de oxigênio, dessecação. Métodos químicos: Desinfetantes e antissépticos. 19. Defina Vírus, Viroides e Príons. VIRÓIDES: Moléculas de RNA fita simples e circulares que infectam células de plantas. Não produzem proteínas. VIRUSÓIDES: Praticamente iguais aos viróides, exceto pelo fato de que só se multiplicam se a célula estiver sendo infectada simultaneamente por determinados tipos de vírus. PRÍONS: Proteinaceous Infectious Particles – Partículas protéicas infecciosas. Proteína outrora normal que sofreu uma mutação e tornou-se um príon, capaz de transformar outras proteínas, as correspondentes normais dela, em príons. O problema com os príons é que estas proteínas não sofrem digestão no aparelho digestório, e penetram intactos na circulação sangüínea. A partir daí começam a se acumular nos neurônios, transformando proteínas normais em príons e causando a morte destas células. Os príons são os responsáveis pelas doenças chamadas encefalopatias espongiformes, dentre as quais, a mais comum é a doença da vaca louca. Portanto, não coma vacas loucas.
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