MICROBIOLOGIA QUESTIONARIO

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1º BIMESTRE MICROBIOLOGIA
Descreva o postulado de Kock
Os postulados de Kock se referem basicamente à “um organismo, uma doença”.
Os postulados são: 
Um: O agente causador de uma doença deve ser encontrados em todos os casos desta mesma doença. 
Dois: o organismo causador da doença deve ser isolado em cultura pura
Três: O agente ao ser inoculado em hospedeiro susceptível deve ser capaz de produzir a doença;
Quatro: O agente deve ser recuperado do hospedeiro ao qual foi inoculado.
Quais são as características e estruturas gerais das bactérias? Cite suas funções.
São seres procariontes, unicelulares. Vivem isoladas, mas podem fazer associações. Possuem nucleóide, plasmídeo, ribossomos, cápsula, flagelo, fímbria/pili, membrana plasmática, parede celular
Nucleóide: conteúdo genético disperso no citoplasma (não possui carioteca), único circular, enovelado, organizado. Dna de fita duplas sem histonas. 
Plasmídeo: DNA extra-cromossomal, replicação autônoma. Confere resistência a antibióticos, produção de toxinas e resistência a metais pesados. 
Ribossomos: organela responsável pela produção de proteínas. IMPORTÂNCIA: SERVE COMO ALVO DE DESTRUIÇÃO DE ALGUNS ANTIBIÓTICOS. 
Cápsula: função de virulência (adesão). Composta por polissacarídeo. Confere ainda proteção à bactérias e serve como reserva de nutrientes (glicocálix). 
Flagelo: estrutura que confere movimentação. AgH: antígeno flagelar. 
Fímbria/pili: são pequenas estruturas externas que auxiliam na adesão e formam canais de prótons entre as bactérias. 
A Fímbria F: é uma estrutra especializada responsável pela troca de material genético entre bactérias (reprodução sexuada: conjugação - plasmídeo) 
Membrana plasmática: permeabilidade seletiva. Não possui esteróis. 
Parede celular: formada de peptídeoglicano ou mureína. É responsável pela formação de uma malha no interior das bactérias (externa à mp). Manutenção de forma, proteção osmótica, e ainda permite a identificação. 
Como as bactérias podem ser classificadas? 
São classificadas através do tamanho, forma, arranjo e estrutura. 
Quais são as formas e arranjos que as bactérias possuem? Cite exemplos. 
As bactérias podem ter a forma de cocos (esféricos), bacilos (bastonete), (intermediário entre coco e bacilo), espiroqueta. 
Sendo que cocos podem se arranjar em 2: diplococos, 4: tétrade, 8:sarcisa
Cocobacilos: intermediário de coco e bacilo
Em forma de colar: Estreptococos
Em forma de cacho de uva: estafilococos
Estreptobacilos
Flagelos são estruturas que conferem mobilidade. Quais são os tipos? 
Flagelos em um único lado da bactéria: monotrípio (sentido únicos)
Flagelos em ambos os lados: anfitriquio (zigue-zague)
Vários flagelos em um único poro: lofotríquio (sentido único)
Flagelos em todas as extremidades: peritríquio (movimento circular)
Defina AgH, AgO e AgK. 
AgH: antígeno H, encontrado nos flagelos
AgO: antígeno O, encontrado no LPS
AgK: antígeno K, encontrado na cápsula das bactérias
Como ocorre a reprodução das bactérias? Cite seus nomes e explique como ocorre.
Pode ser de forma assexuada por divisão binária, onde ocorrer uma duplicação do material genético e posterior divisão e formação de duas células filhas . Ou pode ser de forma sexuada: conjugação, através das fímbrias, onde há troca de material genético (plasmídeos) que confere vantagens às bactérias. 
O que são plasmídeos e qual sua função? 
Plasmídeos são moléculas de DNA circular adicional, DNA extracromossomal, capaz de conferir vantagens às bactérias. Como resistência a antibióticos, produção de toxinas, e resistência a metais pesado.
Do que é composta a parede celular?
Peptídeoglicano ou mureína.
 
O que diferencia bactérias GRAM - das bactérias GRAM +? Cite sua composição, e características. 
São classificadas em GRAM POSISTIVAS, onde possuem uma malha espessa de peptídeglicanos, não possui lipídeos em sua composição e é mais resistente ao choque osmótico. Possuem ainda regulação de autolisina (é a PC que decide a morte da bactéria), ligação as células do hospedeiro, geralmente mais sensível a antibióticos. 
As GRAM NEGATIVAS, são aquelas que possuem a malha de peptideoglicanos mais fina, possui lipídeo na sua composição. Possui membrana externa, espaço periplasmático (espaço entre pc e mp) e membrana plasmática. 
	Sua membrana externa é uma dupla camada lipídica que impede a saída de proteínas periplasmáticas. É mais maleável e é composta por LIPOPOLISSACARÍDEO (LPS), que é uma endotoxina. Nela pode ser feita a identificação da bactéria através do AgO e é reponsável pela produção de lipídeo A: toxina. 
 É menos resistente ao choque osmótico. Possui proteínas(porinas) e fosfolipídeos. 
O que significa dizer que uma bactéria cresceu?
Significa que elas cresceram em número, houve multiplicação. 
Quais são as fases de crescimento bacteriano?
Fase lag, fase log, fase estacionária e fase de morte/declínio.
A fase lag consiste na adaptação da bactéria em seu novo meio/condição. Não existe crescimento (multiplicação), porém estão metabolicamente ativas, produzindo enzimas e energia necessárias para sua sobrevivência. 
A fase log é caracterizada pelo crescimento (multiplicação) exponencial ou logarítmica (dobro). O tempo de geração depende da espécie bacteriana. O crescimento é limitado pelo meio quando em laboratório e é necessário fazer repique (48: bactérias velhas). 
Fase estacionária: momento em que o crescimento e morte bacteriana se equivalem, devido a limitação de nutrientes e condições alteradas do meio (resíduos tóxicos, pouco suprimento de O2, alteração de ph, etc). 
Fase de morte/declínio: existe mais morte do que crescimento bacteriano (diminuição exponencial). Isso se deve ao meio hostil. As bactérias tomam formas não convencionais devido a sua senilidade, algumas formam esporos. A coloração de gram torna-se não confiável. 
Quais os fatores que podem influenciar no crescimento? 
PH, nutrição, fornecimento de O2, temperatura, tipo metabólico da bactéria.
Quais são os nutrientes básicos para um meio de cultura?
Água, íons, fonte de energia, condição atmosférica adequada (aeróbio, anaeróbio ou facultativos), carbono, nitrogênio, íons, compostos orgânicos ou inorgânicos. 
Deve-se considerar os componentes da estrutura bacteriana: DNA e RNA, lipídeos (mp), glicopeptídeos (pc), polissacarídeos. 
O que são organismos fastidiosos?
São organismos difíceis de cultivar em laboratório, pois são muito exigentes no quesito nutrição. 
Diferencie metabolismo, anabolismo e catabolismo.
Metabolismo: todos os processos bioquímicos. 
Anabolismo: reações que consomem energia. – é necessário para crescimento, reprodução e reparo da bactéria.
Catabolismo: reações que liberam energia. – fornece energia para processos vitais: movimento, transporte e síntese de moléculas.
Quais são as formas de produção de energia? 
A produção de energia pode ser feita através de ciclo de Krebs, fermentação (ocorre na ausência de O2, conversão de ácido pirúvico a álcoois e outros compostos) ou glicólise (quebra da glicose para transformar em ácido pirúvico, pode ocorrer na ausência ou presença de O2).
Quais as concentrações utilizadas de ágar? 
A consistência/solidez do meio depende da concentração de ágar adicionada:
Meio líquido: sem adição de ágar
Meio semi-sólido: pouco ágar, 0,3% a 0,5%
Meio sólido: 1,5% a 2%
É necessário que haja atividade de água (água livre) para crescimento da bactéria. 
Quais são os tipos e composição dos meios de cultura? Fale também sobre a procedência. 
A composição química do meio influencia muito no crescimento bacteriano, sendo necessário que a escolha seja feita de acordo com as necessidades do organismo que se quer cultivar. Os meio são:
- Sintético: conheço a quantidade de componentes
- Seletivo: meio que inibe crescimento de algumas bactérias (através da adição de antibióticos). 
- Complexo: não conheço quantidade exata dos componentes contidos (exemplo: meios naturais,tipo batata).
- Simples: só tem o necessário para crescimento mínimo da bactéria.
- Enriquecido: meios com nutrição suplementada (ex: fatores de crescimento)
- Diferenciais: indicadores de pH. Produz mudança visível após reação bioquímica (ex: manitol muda sua coloração de vermelho para amarelo). 
A procedência do meio pode ser:
- Natural: não sofre alterações para crescimento da bactéria (ex. batata in natura). 
-Artificiais: preparado com substâncias que irão permitir o crescimento da bactéria.
Para que serve e como é feito a diluição em série?
A diluição é utilizada como forma de diminuir a quantidade de bactérias, para permitir a contagem na placa. A diluição sempre será feita de 1:10.
A contagem é feita por unidade formadora de colônia. 
Fale sobre o método de Pour Plate. Cite também suas desvantagens. 
O método de Pour Plate consiste na diluição de 1 ml de bactéria diluída com 9 ml de meio (1:10), a solução deve ser homogeneizada e emplacada. Haverá crescimento bacteriano por toda a placa (superfície, meio e fundo), no entanto o crescimento será desproporcional (as colônias do fundo e do meio serão menores). 
Vantagem: é ideal quando não sei se a bactéria é anaeróbia ou aeróbia.
Desvantagem: morte pelo calor e diferença de crescimento.
Fale sobre o método de espalhamento. Cite desvantagens. 
Com o meio já solidificado, espalho 1 ml de solução (bactéria diluída) com alça de vidro, formando um tapete. Levar para a estufa. É utilizado para crescimento de bactérias aeróbias.
Vantagem: não há morte por calor.
Desvantagem: caso a bactéria seja anaeróbia, não haverá crescimento. 
Fale sobre a contagem microscópica direta. Cite desvantagens
Um volume conhecido de bactérias é adicionado a uma lâmina de vidro, utilizando uma grade de contagem chamada Petroff-Hauser. Deve-se ter uma contagem com precisão razoável de bactérias/ml. 
Desvantagem: contagem de bactérias vivas e mortas. 
Fale sobre o número mais provável. Cite desvantagens
Também chamada de técnica dos tubos múltiplos. A técnica é feita através de diluição das bactérias, e a contagem é por turbidez e presença de bolhas de gás nos tubos (tubos positivos e negativos). 
Quanto mais diluído os positivos, maior a concentração de bactérias no tubo orginal.
Usando normalmente em análise de água e alimentos.
Fale sobre a filtração. Cite desvantagens
Utilizado para análise de água ou ar. A amostra é passada por um filtro, onde os micro-organismos ficam retidos (exceto vírus). O líquido sai estéril. Filtro vai para a estufa. O resultado é dado em litros.
É feito para pequenas populações bacterianas. 
Fale sobre turbidez. Cite desvantagens
Se houver crescimento bacteriano, haverá turbidez no líquido. A contagem é feita por espectrofotômetro. 
Vantagem: útil para contagem sem interrupção da cultura. 
Iniciar fatores de virulência 
O que são e para que serve os fatores de virulência?
São características genéticas que conferem vantagem à bactéria, potencializando sua capacidade adesão, invasão e patogenicidade. 
Quais são os tipos de adesão?
A adesão pode ser do tipo específico, através de receptores, e não específica, podendo ser reversível e não reversível.
Diferencie lesão direta de produção de toxinas.
A lesão direta ocorre através da própria bactéria (adesão e invasão) e a produção de toxina é a lesão causada pelo produto metabólico da bactéria. 
O que a cápsula confere à bactéria?
Confere maior virulência, uma vez que permite as bactérias fugirem da fagocitose (AgK).
Quais são os fatores de virulências que as bactérias podem apresentar?
-Adesinas: são estruturas que permitem a adesão da bactéria a um substrato ou tecido. Pode ser mais de uma. Os fatores ambientais influem na expressão das adesinas. 
-Biofilme: forma específica de adesão. Associação de bactérias (células ou substrato) que faz uma adesão do tipo irreversível, onde se ligam umas às outras e soltam uma camada extracelular protetora (carboidrato, exoaminas, proteínas, etc). Confere proteção contra substâncias que deveriam causar sua morte. É necessário retirada mecânica. 
-Invasinas: substâncias que auxiliam na invasão (intracelular ou extracelular). Ex: ácido hialurônico, colagenase, etc. 
-Toxigenicidade: são substâncias produzidas por bactérias capazes de causar lesão.
Podem ser do tipo ENDOTOXINA: substâncias que fazem parte da estrutura da bactéria e que só são liberadas no caso de rompimento de sua membrana (ex: lipídeo A: LPS, das bactériaS GRAM - ); ou do tipo EXOTOXINA: metabólitos secretados pelas bactérias. 
As exotoxinas são altamente específicas. Podem ser proteínas, pequenos peptídeos. Ex: botulismo causa bloqueio da contração muscular. Porém é termolábil, ou seja, pode ser inativada pela alteração de temperatura e é toxóide, permitindo a fabricação de vacinas. 
As endotoxinas causam sintomas generalizados, possuem baixa toxicidade, não forma toxóide, é termoestável e gera inflamação. Em grandes concentrações gera sepse. 
O que são super-antígenos?
São antígenos que são capazes de produzir uma ativação e reação exacerbada por LyT, com grande produção de interleucinas. Pode gerar doenças auto-imunes. Ex: síndrome do choque tóxico. 
Esterilização e desinfecção
Diferencie esterilização e desinfecção. 
Esterelização é a completa eliminação de micro-organismos.
Desinfecção: é uma redução da carga micro-biológica de objetos, para que não seja um risco.
O que é um anti-séptico e um desinfetante?
Anti-séptico é utilizado na pele, trata-se de um processo de desinfecção.
O desinfetante é a mesma coisa, porém usada em objetos e superfícies. 
Diferencie ação antibactericida e ação bacteriostática.
Ação antibactericida: causa a morte dos MO (esterilização)
Ação bacteriostática: controla a carga de MO (desinfecção)
Fale sobre a ação antimicrobiana dos agentes químicos.
Influência do tempo, pH, temperatura e concentração do agente químico. A taxa da morte duplica quanto mais duplicamos o tempo do agente que esta em contato com o MO. Pode ser ácido ou básico, depende do MO. 
Perfeito: ter ação rápida, não danificar superfícies, tem amplo espectro de ação, não ter odor, baixo custo, fácil preparação, etc.
 
Fale sobre ação antimicrobiana dos agentes físicos. 
Pode ser feita por calor ou frio.
O calor penetra rapidamente em materiais densos. 
Calor seco (pasteur, flambagem): oxidação de moléculas.
Calor úmido: desnaturação proteica.
Pasteurização: desinfecção por alteração brusca de temperatura. 
Fale sobre a esterilização por:
Radiação
Utilizado na esterilização de ambientes, não tem cpacidade de penetrar em nada, circula pelo ar, dispersando. Desvantagem micro-ondas: precisa de água, não pode em metais.
Ondas sônicas/ultrassônicas 
Promove lise celular (sonicação) ou forma cavidades (cavitação)
Filtração
Filtro retém micro-organismos, depende do tamanho do poro.
Temperatura fria
Controle de crescimento de micro-organismos. Diminui metabolismo ao reduzir a atividade de água livre. Congelamento / secagem / liofilização (falo pó)
Agentes microbianos
O que é um antimicrobiano?
São substâncias, agentes, que são capazes de promover a morte do patógenos, sem lesar o hospedeiro.
O que é toxicidade seletiva?
Deve matar somente o MO, sem matar a célula do hospedeiro. Quanto mais diferente a estrutura e metabolismo, maior é a seletividade. 
Qual o motivo da maior resistência dos vírus?
São mais difíceis de combater, pois são intracelulares. 
Quais são os sítio de ação dos antibacterianos? 
Os sítios alvos são:
- Síntese de Parede Celular
- Síntese de Proteínas
- Síntese de ácidos nucleicos
- Função da membrana celular.
Atuação na PC – B-lactânicos: agem inibindo a finalização do peptídeoglicano, impedindo a formação da PC. Gera lise. Potente para GRAM +.
Atuação na síntese de proteínas: Agem nos ribossomos, inibindo produção. São mais seletivos e menos tóxicos ao hospedeiro, devido a diferença dessa organela. 
Atuação no DNA: intercala-se nodna e quebra a molécula.
Atuaçao na MP: polimixinas- atuam com “detergente catiônico”, provoca desorganização da mp, causa saída de componentes, levando a morte. 
Quais são as causas de resistência das bactérias?
Mutação celulat, mutação do sítio de ação, mutação dos genes de plasmídeos e mutação de transpossons (segmento móveis de dna).
MO selvagem: nunca sofreu mutação.
MO mutante: sofreu mutação.
 
Fale sobre os mecanismos de resistência. 
Alteração do sítio alvo gera menor afinidade ao antimicrobiano.
Alteação no acesso: aumento de impermeabilidade, mecanismo de efluxo.
Produção de enzimas que desativam o antibiótico. 
Comente o teste de susceptibilidade e o teste de diluição.
Teste de susceptibilidade (antibiograma). Espessura de ágar: 5mm. Trata-se de um teste de difusão de disco embebido em antibiótico para verifica a sensibilidade do MO. Auxilia na ID de cepas, perfil de resistência e rastreamento de infecção hospitalar.
Teste de diluição (MIC): verifica qual a dosagem mínica capaz de inivir (ação bacteriostática) o crescimento da bactéria.
Microscopia e Coloração
Fale da coloração de Gram
Gram +: cora em violeta
GRAM - : não retém corante.
GRAM não reativo: não se coram ou se coram fracamente
Gram-lábeis: se coram de maneira desigual ou presente em culturas velhas.
Fale sobre a coloração Zieh-Neelsen
Coloração utilizada para MO que possuem na sua parede ácidos graxos que conferem impermeabilidade. Usa-se calor para desestabilizar a parede e permitir entrada do corante. Qdo esfriar a parede estabiliza novamente. 
Microbiota
Diferencie: flora residente, flora transitória, estado carreador.
Flora residente: MO que são encontrados normalmente e sempre.
Flora transitória: MO que eventualmente se instala, mas que logo será expulso pela microbiota ou pelo sistema imune. Pode ser virulento ou patogênico, ou não. 
Estado carreador: pessoa que possui MO patogênico, não desenvolve a doença, porém é disseminador dela. 
Quais os benefícios que a microbiota fornece?
Proteção contra MO mais virulentos e patogênicos (antogonismo), simbiose, sistema imune mais eficas, níveis de vitaminas maior, células epiteliais mais saudáveis e resistentes, melhor peristaltismo.