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SERVIÇO PÚBLICO FEDERAL UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS FACULDADE DE BIOTECNOLOGIA ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS 1 Prof. Dr. Antônio S C Carvalho Aluno: Andre L. Freitas Produção de Polissacarídeos Introdução 2 • Os polissacáridos microbianos podem ser neutras (por exemplo, dextrano, escleroglucano) ou ácido (xantano, gelano). Polissacáridos ácidos que possuem grupos ionizados, tais como ácido carboxílico, são comercialmente mais importante. • Importância comercial: são utilizados na estabilização de alimentos, e a produção de vários compostos farmacêuticos. • Os microrganismos são capazes de produzir um grande número de polissacáridos. Estima-se que existem mais de 100 reações enzimáticas, quer direta ou indiretamente envolvidos na síntese de polissacarídeos. 3 O que vamos abordar? AGENTES DE VISCOSIDADE Goma Xantana POLISSACARÍDEOS GELEIFICANTES Goma Gelana Alginato Bacteriano POLISSACARÍDEOS COM APLICAÇÕES ESPECÍFICAS Dextrana PESQUISA E DESENVOLVIMENTO EM POLISSACARÍDEOS MICROBIANOS Agentes de Viscosidade 4 •A viscosidade depende: • Forma; • Relacionada com a força de estabelecimento das ligações glicosídicas que unem suas subunidade; • E com as cargas superficiais e reações de atração/ repulsão que podem surgir; • Tamanho; • Conformação. •Grupos neutros: aumento da viscosidade e estabilidade (Metila, etila, hidrometila) Goma XantanaPor exemplo: Usada em alimentos para controlar a viscosidade, textura, retenção de aromas e estabilização de emulsões. Goma Xantana • É um poli – β – (1- 4) – D – glucopiranase, assemelhando-se a celulose, mas com ramificações alternadas nas posições C – 3, constituídas por três açúcares. • A sua estrutura ramificada e seu alto peso molecular conferem a xantana uma alta viscosidade, mesmo em baixas concentrações • No Brasil, a adição de xantana em alimentos é permitida desde 1965, pelo Decreto Lei numero 55871, da Legislação Brasileira de Alimentos 56 6 Produção aeróbias a 28 ºC Fonte de carbono: Glicose ou Sacarose O polímero é sintetizado, principalmente ao cessar o crescimento microbiano. Concentração final 20 a 30g/L Rendimentos de 50 a 70% Produtividade de 0,5g/L/h. 48 a 96 horas, Polissacarídeos Geleificantes 7 Gelificantes são substâncias que dão textura aos gêneros alimentícios através da formação de um gel. A formação do gel ocorre somente dentro de um limite de hidrogenação e de acidez ótimo O aumento da concentração do polissacarídeo capaz de formar gel favorece o crescimento da estrutura em forma de rede “aprisionando” moléculas de água e diminuindo a distância entre as macromoléculas. Geleificantes: Goma Gelana 8 Pseudomonas elodea ATCC 31461 Gel Termorreversível Um Gel Firme (Baixo Grau De Acetilação Géis Elásticos (Forma Não Acetilada). Acetilação (ou na nomenclatura IUPAC, etanoilação) descreve uma reação que introduz um grupo funcional acetila em um composto orgânico 1,3 β-D-glucose, 1,4-β-D-ácido glucurônico, 1,4-β-D- glucose e 1,4-α-L-ramnose. 9 Geleificantes: Alginato Bacteriano O alginato é um copolímero linear constituído de unidades de ácidos α-L-gulurônicos e β-D-manurônicos e é extensamente utilizado devido as suas propriedades espessantes, estabilizantes e gelificantes. M= manurônico G= gulurônico Aplicações na indústria de alimentos, na indústria têxtil e de papel, em cosméticos e na área farmacêutica e médica 10 M= resíduo manurônico G= resíduo gulurônico Produção 11 a) Sequência de ácidos manurônicos b) Sequência de blocos alternados c) Sequência de blocos gulurônicos A- sequência M-M B- sequência G-G C- sequência M-G-M Enzima A e B: C-5 epimerases Produção... Polissacarídeos Com Aplicações Específicas 12 Alguns polissacarídeos de origem microbiana encontram aplicações comerciais dentro de faixas de mercado bem especificas. E o caso da dextrana, muito utilizada na indústria farmacêutica. Comercialmente, a dextrana farmacêutica é denominada Dextrana 40 e Dextrana 70. Alta resistência ao calor (resistência à esterilização) e armazenagem, além da propriedade química de se ligar a íons metálicos (propriedade relacionada com as ligações α-1,3, formando compostos de interesse medicinal tais como dextrana - sulfato (anticoagulante semelhante à heparina) e ferro- dextrana (utilizada no tratamento de anemia em animais e humanos) 13 Dextrana α – D – glucopiranosil, principalmente α (1-6), com ramificações encontradas em α (1-2), α (1-3), α (1-4). São polissacarídeos de elevado peso molecular, que consistem em unidades de α-D-glicose ligadas predominantemente por ligações glicosídicas 1-6. ...Outras aplicações Indústria Petroquímica – a dextrana de alta massa molar (superior a 25 milhões de daltons) pode ser aplicada na extração de petróleo com alta viscosidade, compondo assim a lama de perfuração Indústria de Alimentos - a dextrana de massa molar média (100.000 a 25.000.000 Daltons) - agente geleificante, espessantes e estabilizante de alimentos. 14 Produção Dextranasacarase (α – 1,6 – glucan 6 – α – D – glucosiltransferase, E. C. 2.4.1.5). Leuconostoc mesenteroides NRRL B – 512 (1,6 – α – D – glucopiranosil)n + sacarose - dextrana –sacarase -> (1,6 – α – D – glucopiranosil)n + 1 + frutose A dextranasacarase age transferindo o grupo glicosil do doador, a sacarose, para o aceptor, a cadeia de dextrana em formação. Pela enzima Bacteriano Obtido pela reação Pesquisa e Desenvolvimento em Polissacarídeos Microbianos 15 Novas pesquisas devem visar a produção de polissacarídeos com novas propriedades e novas tecnologia de produção. ... Assim, devem buscar Novas condições de cultivo e seleção de novos microrganismos produtores de polissacarídeos tradicionais. ...... Para isso Devemos usar técnica de DNA recombinante para obtenção de microrganismos com maior produtividade. 16 o Bibliografia Lima, U. A. et al. Biotecnologia industrial- processos fermentativos e enzimáticos – São Paulo, Blucher, 2001. Friedirich I. et al. Biopolissacarideos , Florianópolis, 12 de setembro de 2008 Rodrigues R. Dextrana: produção e aplicação industrial, Universidade Estadual Paulista, Instituto De Biociências, Rio Claro, 2009. Oliveira S. A. DEXTRANA: REVISÃO SOBRE USO E POSSÍVEIS APLICAÇÕES INDUSTRIAIS UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA, “JÚLIO DE MESQUITA FILHO”, INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS, Trabalho de Conclusão de Curso, Rio Claro -2013. VETTORI, M. H. P. B. Estudo e otimização da produção da dextranasacarase e caracterização da dextrana produzida por Leuconostoc mesenteroides FT045B UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS – RIO CLARO, Abril – 2011. Müller, J. M. et al. Produção de Alginato por Microrganismos, Departamento de Engenharia Química e Engenharia de Alimentos, Centro Tecnológico, Universidade Federal de Santa Catarina, Campus Universitário, Córrego Grande, Florianópolis 2011.
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