Estudo dirigido 02 - Técnicas de Análises e Controle de Qualidade Aplicados ás Matérias-Primas, Bioprocessos e Bioprodutos

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ 
INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS 
FACULDADE DE BIOTECNOLOGIA 
Curso: Bacharelado em Biotecnologia 
 
 
FACULDADE DE BIOTECNOLOGIA, CIDADE UNIVERSITÁRIA PROF. JOSÉ DA SILVEIRA NETO, RUA 
AUGUSTO CORREA 01, PREDIO DO ICB, GUAMA, 66.075-110 – BELÉM-PA, FONE (91) 3201-7918 
Disciplina: Téc. De Anal. E Cont. de Qual. de Mat. Bior.e Bioprodutos Prof. Dr. Antonio S. C. Carvalho. 
 
 
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Nome:________________________________________________Mat:______________________ 
 
Estudo Dirigido 02 
 
01. Como as propriedades da luz podem ser explicadas a partir do (a) modelo ondulatório; 
(b) modelo de partícula 
02. Faça relação entre radiação eletromagnética e fótons. 
03. Calcule a frequência (em hertz), o número de onda (em cm-1) e a energia (em joules por 
fóton e joules por mol de fóton) da luz visível com um comprimento de onda de (a) 562 
nm; (b) 400 nm. 
04. Explique o que significa Estados energéticos das ligações químicas e absorção molecular. 
05. Explique e exemplifique a difença entre cor absorvida e cor transmitida. 
06. Faça as suas considerações explicando e exemplificando a formação do espectro de 
absorção. 
07. Defina os efeitos (a) Batocrômico (b) Ipsocrômico (d) Hipercrômico (e) Hipocrômico 
08. Explique a determinação da atividade enzimática da β- glicosidase utilizando o reagente 
p-nitrofenil-β-D-glicopiranosídeo através da medida da absorvância por 
espectrofotometria. 
09. Defina numericamente: (a) Transmitância (b) absorvância (c) Lei de Lambert-Beer 
10. Faça um resumo esquemático mostrando as principais partes e funções da instrumentação 
de um espectrofotômetro. 
11. Encontre a absorbância e a transmitância de uma solução 0,00240 mol L-1 de uma 
substância com coeficiente de absortividade molar de 313 L mol-1 cm–1 numa cubeta de 
2,00 cm de caminho óptico. 
12. Uma solução contendo 8,75 ppm de KMnO4 (158,8 g mol-1) apresenta uma transmitância 
de 0,743 em uma célula de 1,00 cm a 520 nm. Calcular a absortividade molar do KMnO4. 
13. Uma solução contendo 3,75 mg/100 mL do composto orgânico AB (M.M. = 220 g mol-
1) tem uma transmitância de 39,6% em uma cela de 1,50 cm à 480 nm. Calcule a 
absortividade molar de AB. 
14. Uma solução contendo Paládio (II) e Ouro (III) precisa ter suas concentrações definidas, 
foram separados 25 ml desta solução e adicionado metiomeprazina (C24H24N2S2) para 
complexar estas espécies, em seguida esta amostra foi diluída até obter um volume total 
de 50 ml. Sabe-se que o máximo de absorção para o Pd ocorre em 480 nm, já para o Au 
em 635 nm. A tabela abaixo mostra a absortividade dos complexos nesses comprimentos 
de onda. A amostra diluída apresenta absorbância de 0,533 a 480 nm e 0,590 a 635 nm 
quando medida em uma célula de 1,00 cm. Calcule concentração de cada espécie na 
solução. 
 
15. Um procedimento comum para determinacao de proteina e o ensaio de ligacao de corante 
de Bradforf. Neste metodo, o corante liga-se a proteina, e a sua cor muda de marrom para 
azul. A intensidade da cor azul medida pela absorbancia da luz a um comprimento de 
onda de 595 nm, e proporcional a quantidade de proteina presente. (a) Faca a curva de 
calibracao da proteína e calcule a inclinação e o intercepto pelo método dos mínimos 
quadrados. (b) Uma amostra desconhecida de proteina forneceu uma absorbancia de 
0,973. calcule quantos microgramas de proteina estao presentes na amostra. 
 
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FACULDADE DE BIOTECNOLOGIA 
Curso: Bacharelado em Biotecnologia 
 
 
FACULDADE DE BIOTECNOLOGIA, CIDADE UNIVERSITÁRIA PROF. JOSÉ DA SILVEIRA NETO, RUA 
AUGUSTO CORREA 01, PREDIO DO ICB, GUAMA, 66.075-110 – BELÉM-PA, FONE (91) 3201-7918 
Disciplina: Téc. De Anal. E Cont. de Qual. de Mat. Bior.e Bioprodutos Prof. Dr. Antonio S. C. Carvalho. 
 
 
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16. O método das adições de padrão foi empregado para determinar o nitrito em uma amostra 
de solo. Uma alíquota de 1,00 mL da amostra foi misturada com 24,00 mL de um reagente 
colorimétrico e o nitrito foi convertido para um produto colorido com uma absorbância 
corrigida pelo branco de 0,300. Para 50,00 mL da amostra original, 1,00 mL da solução 
padrão de 1,00 x 10-3 mol L-1 de nitrito foi adicionado. O mesmo procedimento de 
formação do composto colorido foi seguido e a nova absorbância foi de 0,530. Qual a 
concentração de nitrito na amostra original? 
17. O que é cromatografia? Comente sobre apliação na sociedade e as finalidade dos métodos 
cromatográficos. 
18. Detalhe os 5 tipos comuns de princípios físico-químicos básicos de separação pelo 
método cromatográfico. 
19. Faça as considerações sobre separação por CLAE e diferencie: (a) fase normal de reversa 
(b) cromatografia analítica da preparativa. 
20. Defina: (a) tempo de Retenção (b) Tempo de retenção ajustado (c) Fator de retenção (d) 
Seletividade (e) Número indicativo da performace da coluna ou número de pratos (f) 
coeficiente de partição (g) Resolução cromatográfica ( 
21. Faça as devidas considerações sobre as técnicas para melhorar a resolução (a) aumentar 
a distancia entre os picos (b) diminuir a largura das bandas. 
22. Transcreva a tabela que mostra o comparativo das técnicas de HPLC e CG dos fatores 
amostra e sensibilidade. 
23. Defina e xemplifique detectores do tipo (a) Universal (b) seletivo e (c) específico. 
24. As substâncias A e B apresentam tempo de retenção de 16,40 e 17,63 min, 
respectivamente, em uma coluna de 30,0 cm. Uma espécie não retida passa através da 
coluna em 1,30 min. As larguras da base dos picos A e B são 1,11 e 1,21 min, 
respectivamente. Calcule: a) a resolução da coluna; b) o número médio de pratos na 
coluna; c) a altura de prato; 
25. O composto (A) é eluído na co luna (1), que tem 17 m, com 1 mL/min de fluxo de 
gás d e arraste. Se u tempo de retençã o é d e 20 min (1200 s). O mesmo composto, 
na mesma concentração , é eluído na coluna (2), com outra fase estacioná ria, que 
tem 30 m, com 0,5 mL/min de fluxo e seu tempo de retenção (tR) é 25 min 
(1500 s). A s d uas co lunas têm d iâmetro interno de 0,25 mm e o tempo do co mposto 
não retido é de 4 min (240 s) n a coluna (1) e 12,5 min (750 s) na coluna (2). a) Em qual 
das dua s colunas o composto (A) tem maior interação com a fa se estacionária? b) Qual 
o volume interno de cada coluna? c) Qual o volume morto e o volume de retenção em 
cada coluna? 
26. Com base nos dados abaixo, calcule a resolução obtida entre os componentes A e B. 
Sabendo-se que os dados desta separação cromatográfica foram obtidos em uma coluna 
de 3 m, calcule o comprimento de coluna mínimo para que a resolução assuma o valor de 
1,5. 
 
 
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27. O método das adições de padrão foi empregado para determinar o nitrito em uma amostra 
de solo. Uma alíquota de 1,00 mL da amostra foi misturada com 24,00 mL de um reagente 
colorimétrico e o nitrito foi convertido para um produto colorido com uma absorbância 
corrigida pelo branco de 0,300. Para 50,00 mL da amostra original, 1,00 mL da solução 
padrão de 1,00 x 10-3 mol L-1 de nitrito foi adicionado. O mesmo procedimento de 
formação do composto colorido foi seguido e a nova absorbância foi de 0,530. Qual a 
concentração
de nitrito na amostra original? O método das adições de padrão foi 
empregado para determinar o nitrito em uma amostra de solo. Uma alíquota de 1,00 mL 
da amostra foi misturada com 24,00 mL de um reagente colorimétrico e o nitrito foi 
convertido para um produto colorido com uma absorbância corrigida pelo branco de 
0,300. Para 50,00 mL da amostra original, 1,00 mL da solução padrão de 1,00 x 10-3 mol 
L-1 de nitrito foi adicionado. O mesmo procedimento de formação do composto colorido 
foi seguido e a nova absorbância foi de 0,530. Qual a concentração de nitrito na amostra 
original? O método das adições de padrão foi empregado para determinar o nitrito em 
uma amostra de solo. Uma alíquota de 1,00 mL da amostra foi misturada com 24,00 mL 
de um reagente colorimétrico e o nitrito foi convertido para um produto colorido com uma 
absorbância corrigida pelo branco de 0,300. Para 50,00 mL da amostra original, 1,00 mL 
da solução padrão de 1,00 x 10-3 mol L-1 de nitrito foi adicionado. O mesmo 
procedimento de formação do composto colorido foi seguido e a nova absorbância foi de 
0,530. Qual a concentração de nitrito na amostra original?