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MÉTODOS DE CONTROLE MICROBIANO 2. MÉTODOS QUÍMICOS Desinfetantes Antissépticos Antibióticos 2. AGENTES QUÍMICOS são usados para controlar o crescimento de microrganismos em: Tecidos vivos (ANTISSÉPTICOS) e Objetos inanimados (DESINFETANTES). para o tratamento de infecções já instaladas ANTIBIÓTICOS Características ideais, (esperadas) para desinfetantes e antissépticos Toxicidade seletiva • Inócuo para o homem e animais • Alta toxicidade para os microrganismos Solúvel em água Estabilidade elevada Grande capacidade de penetração Não ser corrosivo e nem manchar Desodorante (sem odor) Detergente TIPOS DE DESINFETANTES/ANTISSÉTICOS Fenol e Compostos Fenólicos Biguanidas (clorexidina) Halogênios Álcoois Metais Pesados FENOL (ácido carbólico) e Compostos Fenólicos Fenol: Desinfetante, é cáustico, possui forte odor Compostos fenólicos: quimicamente alterados para reduzir qualidades irritantes e aumentar sua atividade antibacteriana em combinação com o sabão ou detergente (bifenol, hexaclorofeno). Uso preferencial: superfícies ambientais, instrumentos, pele e mucosas. Mecanismo de Ação: lesam a membrana plasmática, inativam as enzimas e desnaturam as proteínas. BIGUANIDAS o Clorexidina :frequentemente utilizada no controle microbiano das mucosas e da pele (antes de cirurgias, escovação). o Efetiva para a maioria das bactérias vegetativas e fungos, mas não é esporicida o Únicos vírus afetados: certos tipos envelopados. Efeito bactericida: está relacionado à lesão que este reagente causa a membrana plasmática. HALOGÊNIOS o Iodo: efetivo contra todos os tipos de bactérias, vários fungos e alguns vírus. Uso preferencial: antisséptico de pele. Mecanismo de ação do I2:inativação de proteínas Combina-se a Tirosina, inibindo a função protéica. Oxida os grupos sulfidrila (- SH) de certos aa, que são importantes para manter a estrutura das proteínas. HALOGÊNIOS o Cloro o Largamente usado para desinfecção de água o Utensílios para refeição (saneante) o Itens domésticos e vidrarias. É um forte oxidante que impede o funcionamento de boa parte do sistema enzimático celular. ÁLCOOIS o Matam efetivamente as bactérias e fungos, mas não os endosporos e os vírus não-envelopados. o Os mais utilizados: Etanol (70 %) e Isopropanol o Vantagem: agem e depois evaporam sem deixar resíduo. o Uso preferencial: Pele, termômetros e outros instrumentos Mecanismos de ação: Desnaturação das proteínas, Rompimento da membrana e Dissolução de muitos lipídios. METAIS PESADOS o Bastante utilizados como germicidas ou antissépticos. o Nitrato de Prata: prevenção de infecções oculares gonocócicas o Mercurocromo: antissepsia da pele o Sulfato de Cobre: Algicida Mecanismos de ação: Os íons de metal se combinam com os grupos sulfidrilas nas proteínas celulares ocorre a desnaturação. #AGENTES DE SUPERFÍCIE o Agentes de superfície (tensoativos ou surfactantes) podem reduzir a tensão superficial entre as moléculas de um líquido. o Sabão: pouco valor anti-séptico (mais importante na remoção mecânica através da esfregação). o Detergente: ânion da molécula reage com a membrana plasmática (atuam sobre um amplo espectro de micróbios e não são tóxicos) ANTIBIÓTICOS o Controle microbiano através da ingestão ou aplicação superficial de uma substância que possui atividade antimicrobiana. o Alguns antibióticos são utilizados para controle microbiológico de alimentos e outros para tratamento de infecções. Nisina: adicionada ao queijo para inibir o crescimento de certas bactérias formadoras de endosporos. Natamicina: antibiótico antifúngico aprovado para uso em alimentos, principalmente para queijo. Fleming Manuscritos de Fleming Antibióticos Antibióticos 1929: Fleming descobre a Penicilina Produto do metabolismo do fungo Penicillium notatum que, naturalmente conseguia inibir a multiplicação de bactérias Staphylococcus aureus. 1940: Florey e Chain conseguem a produção industrial da Penicilina Uso para evitar infecções durante a 2ª Guerra Mundial. Fleming o Microrganismos produtores de Antibióticos: • 70%: Streptomyces • 20%: Penicillium e Cephalosporium • 10%: Outras bactérias e fungos Atualmente Propriedades ideais dos Antibióticos TOXICIDADE SELETIVA Permanecer ativo na presença de plasma, sangue, e outros fluidos corpóreos; Atingir rapidamente a concentração inibitória mantendo- se ativo por período prolongado; Não ser alergênico ou produzir efeitos colaterais; Não propiciar o surgimento de linhagens resistentes; Ter AMPLO ESPECTRO de ação. Espectro de ação de anticrobianos Mecanismos de Ação dos Antibióticos 1. INIBIÇÃO DA SÍNTESE DE PAREDE CELULAR 2. ALTERAÇÕES FUNCIONAIS DA MEMBRANA CELULAR Bactericidas 3. INIBIÇÃO DA SÍNTESE PROTEÍCA 4. INIBIÇÃO DA SÍNTESE DE ÁCIDOS NUCLÉICOS 5. ALTERAÇÕES NO METABOLISMO BACTERICANO Bacteriostáticos Mecanismos de Ação dos Antibióticos (BACTERICIDAS) 1. INIBIÇÃO DA SÍNTESE DE PAREDE CELULAR -Lactâmicos: Penicilinas e Cefalosporinas 2. ALTERAÇÕES FUNCIONAIS DA M. CELULAR Polimixinas : Colistina Polienos: Anfotericina B, Nistatina Mecanismos de Ação dos Antibióticos (BACTERIOSTÁTICOS) 3. INIBIÇÃO DA SÍNTESE PROTEÍCA Aminoglicosideos, Tetraciclina, Cloranfenicol,etc. 4. INIBIÇÃO DA SÍNTESE DE ÁCIDOS NUCLÉICOS Síntese de DNA: Quinolônicos Síntese de RNA: Rifampicina 5. ALTERAÇÕES NO METABOLISMO BACTERICANO Sulfas: Sufonamida, Trimetoprim, Isoniazida Efeitos colaterais Toxicidade à microbiota normal Destruição da microbiota normal Proliferação de microrganismos oportunistas Alergia Choque anafilático Candida sp Resistência dos microrganismos aos ATB Bactérias Sensíveis Intermediárias Resistentes Resistência dos microrganismos aos ATB Frase popular “Os antibióticos induzem ao aparecimento de bactérias resistentes”. Não é correta, pois os antibióticos selecionam as linhagens de bactérias resistentes, eliminando apenas as sensíveis. Resistência Bacteriana a Drogas Principais Causas 1. Mutação do SITIO ALVO DE AÇÃO DO ANTIBIÓTICO; 2. Aquisição de Plasmídeo (Conjugação Bacteriana); 3. Bomba de efluxo do antibiótico; Antibiograma Método de Kirby e Bauer Difusão do disco de ATB Antibiograma Prova realizada para avaliar o perfil de resistência (R) ou sensibilidade (S) de um microrganismo frente a ação de vários antibióticos (ATB). Bactérias resistentes: crescerão mesmo na presença do ATB Bactérias sensíveis: Não crescerão na presença do ATB. ATB é efetivo! Antibiograma Método de Kirby-Bauer ou de difusão do disco A bactéria de interesse é previamente semeada em toda extensão de uma placa de Petri contendo ágar Muller-Hinton. Discos de papel de filtro contendo ATB são aplicados,cuidadosamente, na superfície desta placa e logo em seguida coloca-se em estufa(370C) Os ATB, em contato com o ágar irão se difundir radialmente para o meio. Enquanto asbactérias que foram semeadas estarão crescendo, ou não na presença desses ATB. Antibiograma Halo de Inibição do crescimento bacteriano Corresponde às áreas mais claras, próximas aos discos contendo ATB, onde não se observa o crescimento bacteriano. Observa-se que, na periferia da placa, longe da ação dos ATB, há crescimento em “tapete” das bactérias, representado pela área mais opaca. Antibiograma ATB: A ATB: B Qual é o ATB mais eficiente? A ou B? Atividades de Fixação 1. Qual a diferença entre anti-séptico/ desinfetante/ antibiótico? 2. Qual a diferença de um antibiótico bacteriostático e um antibiótico bactericida. Comente, brevemente, como atuam. 3. Cite quatro qualidades essenciais de um bom antibiótico. 4. Comente, brevemente, sobre: Como um gene que confere resistência a um determinado antibiótico pode ser transferido de uma bactéria para outra e quais são as implicações deste fato. Atividades de Fixação 5. Qual é a finalidade de um antibiograma? Como identificamos bactérias sensíveis ou resistentes a ação de ATB ao observar o antibiograma?Explique. 6. Mencione três métodos físicos e três agentes químicos diferentes que permitem o controle microbiano. Descreva os princípios de ação e as aplicações destes agentes.
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