Aula Sintese Protéica

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Transcrição do
gene 1 produz um RNAm com uma sequencia de nucleotidio
complementar a uma das fitas de DNA.
Produz uma proteína com sequência aminoácida determinada pela sequência nucleotídica do RNAm.
(a) TRANSCRIÇÃO
(b) TRADUÇÃO
RNA
mensageiro
gene 1
gene 3
gene 2
DNA
(núcleo)
(citoplasma)
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Em Procariotos, a transcrição e tradução ocorrem ao mesmo tempo, ou seja, um RNA mensageiro está sendo transcrito, o ribossomo se liga ao RNAm e a tradução começa.
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RNAt 
Ribossomos
Aminoácidos
RNAm
Fatores de Iniciação
Fatores de Elongação
Fatores de terminação
Enzimas Aminoacil RNAt sintetase
fonte de energia
 
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RNA Transportador 
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Estrutura do RNAt
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RNAt
-Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo
-Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição
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Processamento do precursor do tRNA
Processamento
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Bases modificadas nos RNAt
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As bases oscilantes do RNAt
Um RNAt pode reconhecer freqüentemente vários códons por causa da ocorrência de pontes de H não padrão entre os nucleotídeos.
Este efeito é chamado Hipótese da Base Oscilante
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CÓDIGO GENÉTICO 
PROPRIEDADES:
Universalidade 
Redundância
Degeneração 
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Ribossomos
Ribossomos são compostos de RNA e proteínas
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RNA Ribossômico (RNAr)
2/3 RNA & 1/3 proteina
2 sub unidades
Coordena a síntese protéica
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Sítios do RNAr
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Tradução
Fases
Pré-Iniciação
Iniciação
Alongamento
Terminação 
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Sítio de Síntese 
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A síntese vai do N-terminal até o C-terminal da proteína. 
Os ribossomos lêem o RNAm na direção 5' para 3'.
 
A tradução ativa ocorre nos polissomos. Ou seja, mais de um ribossomo pode se ligar e traduzir certo RNAm a qualquer tempo. 
O alongamento da cadeia ocorre por adição seqüencial de aminoácidos ao ponta C-terminal do ribossomo.
Seqüência de eventos da Síntese Protéica:
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Pré-iniciação Ativação dos aminoácidos
Enzima responsável: RNAt sintetase 
Uma para cada aminoácido;
AA liga-se ao 3´do seu RNAt 
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Estrutura dos Aminoacidos
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Iniciação 
Aminoacil RNAt se liga no sítio P do ribossomo;
Códon de iniciação (Pro e Euc) AUG tRNAMeti (Euc)
Bactérias: grupo formil ligado a Metionina RNAtfMet
Grupo formil retirado depois 
Seqüências de Shine Delgarno- precede o códon AUG; onde RNAr 16S da subunidade menor se liga.
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Iniciação da tradução
N-formilmetionina é o primeiro aminoácido incorporado nas bactéria (eucariotos usam metionina).
Existe um RNAt iniciador especial que se liga ao primeiro aminoácido no complexo ribossômico (tRNAfMet em bactéria, tRNAiMet em eucariotos)
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Iniciação (cont.) 
Fatores de Iniciação em bactérias : IF1, IF2 e IF3.
IF1 e 2: só atua com RNAt iniciador no sítio P;
IF3: 30S dissociada de 50S;
Complexo de Iniciação:30S+RNAm+RNAt i
Fatores de iniciação se dissociam antes da fase de alongamento 
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Fatores de Iniciação
RNAt iniciador
Fatores protéicos de iniciação para formar o complexo ribossomo-RNAt-RNAm
3 Fatores de iniciação em Procariotos: IF1, IF2 e IF3
Ao menos 8 fatores de iniciação em Eucariotos
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Alongamento
AA são adicionados a cadeia em crescimento;
Fatores de alongamento: EF-Tu
 EF-G
Sitio A do ribossomo ocupado pelo aa2
Ligação peptidica: Peptidil transferase 
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Alongamento
No final da formação do complexo de iniciação, a formilmetionina tRNAfMet ocupa o sitio P do ribossomo
EF-Tu se liga no próximo tRNA no sitio A do ribossomo
Figure 22.15 &22.21
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Terminação da Tradução
Quando o ribossomo alcança o códon de parada no sitio A, um dos 3 fatores de liberação inicia a hidrólise da cadeia polipeptídica e libera o RNAt no sitio P 
RF-1	reconhece UAA e UAG
RF-2	 reconhece UAA e UGA
RF-3 se liga a GTP e aumenta os efeitos de RF-1 e RF-2
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Término
Entrada de um códon de parada (UAA, UAG ou UGA) no sitio A;
Fator de liberação entra no sitio A e dispara a hidrólise do peptídeo, liberando a proteína
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Eventos Pós-Traducionais
Geralmente, proteínas estão inativas após transcrição;
Dobramento por chaperonas 
Modificação de cadeias laterais de aminoácidos;
Eucariotos tem seqüências curtas (15 a 20 aa) para direcionar destino das proteínas;
Seqüências de Sinal
SLN (seqüência de localização nuclear) 
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MODIFICAÇÃO DAS PROTEINAS 1
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MODIFICAÇÃO DAS PROTEINAS 2
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MODIFICAÇÃO POS TRADUÇÃO DAS PROTEINAS
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Ex: PROCESSAMENTO DA INSULINA
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The side chains are responsible for the various properties of the amino acids. They can be:
Polar, hydrophillic
Non-polar and hydrophobic
Some are considered special cases: glycine (smallest), cyclic ring structure (proline), and sulfur containing (cysteine)
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In eukaryotic systems, the process is significantly different. Recognition of the translation start site by the small ribosomal subunit requires different types of factors than in prokaryotes. Most eukaryotic mRNAs have a single start site near the 5’ capped end of the mRNA. The small ribosomal subunit interacts with the methylated 5’ cap and eIF proteins. To assemble a eukaryotic pre-initiation complex, an active ternary complex of eIF2-GTP and Met-tRNA associates with a small 40S ribosomal subunit complexed with 2 other factors, eIF3 and eIF1A. Cells can regulate protein synthesis by phosphorylating a serine residue on the eIF2B.
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