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01/09/2021 BCM 2 Victória Zuppo INIBIDORES DA SÍNTESE PROTÉICA ✓ Puromicina o Inibidor da síntese de proteínas. o Problema: Causa dano glomerular através da redução do número de podócitos, resultando em proteinúria e consequente glomeruloesclerose. ✓ Estreptozotocina o Problema: A alcalinização do DNA celular e subsequente ativação de determinadas enzimas causam redução no nível de ATP e posterior inibição da síntese e secreção da insulina ✓ Tetraciclina o Interage em porções específicas dos procariotos, age somente sobre os procariotos, na porção 30S. PROTEÍNAS ✓ Transporte: Hemoglobina ✓ Estrutural: Queratina, colágeno ✓ Defesa: Imunoglobulinas ✓ Nutriente: ovoalbumina ✓ Enzimas: Pepsina CÓDIGO GENÉTICO ✓ A relação entre a sequência de bases do DNA e a sequência correspondente de aminoácidos, na proteína, é chamada de código genético. ✓ 3 nucleotídeos são para codificar um aminoácido ✓ Cada aminoácido pode ter mais de 1 código genético ✓ Dos 64 códons, 61 determinam aminoácidos. ✓ Os 3 restantes são códons de parada. ✓ 1 dos códons também é chamado de códon de iniciação. ✓ Peculiaridades: Os 2 primeiros nucleotídeos são iguais nos códigos genéticos. Variando apenas a última base. ✓ O último nucleotídeo é chamado de “base oscilante” PROCESSO DE SÍNTESE DE PROTEÍNAS ✓ RNAm contém o código do gene ✓ RNAt é o adaptador que liga o mundo do ácido nucléico ao mundo das proteínas ✓ RNAr faz parte do ribossomo e contém a enzima que catalisa a ligação entre aminoácidos adjacentes. ✓ A enzima aminoacil t-RNA sintetase catalisa a esterificação de um aminoácido específico em um dos possíveis RNAt. ✓ O aminoacil t-RNA sintetase (uma para cada aminoácido) reconhece o RNA transportador que precisa se ligar, para realizar essa ligação precisa de energia ✓ A energia para essa reação é fornecida pela clivagem da ligação altamente energética do ATP, com liberação de pirofosfato. Essa etapa é conhecida como ativação do aminoácido. ✓ Aminoácido ativado reage com o RNAt, liberando uma molécula de AMP. Tradução de Proteínas 01/09/2021 BCM 2 Victória Zuppo ✓ Ligação do aminoácido com o RNAt se dá entre o grupo carboxila do aminoácido e carbono 3’ da ribose do último ribonucleotídeo da extremidade 3’ do RNAt, o qual contém sempre a base adenina. CONDUÇÃO AMINOÁCIDO PELO t-RNA ✓ Um RNA é sempre escrito no sentido 5’ - 3’. ✓ Os códons do RNAm e os anticódons dos RNAt estão escritos no mesmo sentido, contrário, portanto, a seu emparelhamento, o qual é anti- paralelo. ✓ Isso quer dizer que a primeira base na sequência do anticódon emparelha-se com a terceira base do códon. Exemplo: CGU é o anticódon correspondente ao códon ACG, pois ambos estão escritos no mesmo sentido, de 5’ para 3’, mas eles se emparelham em sentidos opostos: anticódon 3’UGC 5’ códon 5’ACG 3’ ✓ Um mesmo RNAt pode reconhecer, com frequência, mais do que um códon, pois a base na primeira posição do anticódon pode se emparelhar com mais de um tipo de base na terceira posição do códon. ✓ Apenas quando as duas subunidades estiverem juntas é que ocorrerá a tradução SÍTIOS DO RNA ✓ E (Exit): Quando o tRNA passar por este sítio, a interação será desfeita, ocupado transitoriamente pelo RNAt livre de aminoácido que acabou de sair do sítio P e que está, portanto, deixando o ribossomo. ✓ P: Onde a interação do tRNA e do rRNA está ligado a proteína, sítio de ligação do peptidil-RNAt, é onde se associa a molécula de RNAt ligada à extremidade carboxílica do polipeptídeo em crescimento. ✓ A: Local da chegada do tRNA, onde se associa o RNAt recém-chegado ao ribossomo e que traz o aminoácido a ser incorporado na cadeia polipeptídica em crescimento. INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO PROCARIOTO ✓ Sequência Shine-Delgarno: sequência de nucleotídeos antes do códon de iniciação. 1. O ribossomo se liga ao mRNA dependendo da posição da sequência. 2. Serve para posicionar o códonde iniciação no local correto. 3. IF-3 se dissocie do complexo. 4. Essa é a razão do fator IF-3 ser chamado de fator anti-associação das subunidades ribossomais. 5. IF-3 e a subunidade 50S nunca ficam associados simultaneamente à subunidade ribossomal menor. ✓ O tamanho dos ribossomos são diferentes. INICIAÇÃO NOS EUCARIOTOS 01/09/2021 BCM 2 Victória Zuppo 1. Sai do núcleo e vai para o citoplasma (sai empacotato) 2. Fatores de iniciação localizam a sequência cap 5’ e alinham o RNA 3. Permitem q a unidade menor ribossomal chegue ali e se acople ao RNA 4. Bolinha cinza impede que a subunidade maior ribossomal se ligue 5. Quando a subunidade menor se liga, o RNA + metionina se acopla a subunidade maior Localiza o primeiro códon do RNA mensageiro 6. Anticódon RNA transportador interage com o códon do RNA mensageiro ELONGAÇÃO ✓ A chegada do aminoacil-RNAt ao sítio A do ribossomo só ocorre se ele estiver associado ao fator de alongamento EF-Tu carregado com uma molécula de GTP (EF-TuGTP). ✓ O GTP é necessário para ligação do aminoacil- RNAt ao sítio A e é clivado na formação da ligação peptídica, atuando como fornecedor de energia. ✓ Após a clivagem do GTP em GDP e Pi, o complexo EF-TuGDP é liberado do ribossomo e, para tomar parte em novos ciclos de elongação, deve ser recarregado a EF-TuGTP. ✓ A formação da ligação peptídica entre o grupo amino do aminoacil RNAt e o carboxila do peptídeo em crescimento é catalisada numa região do ribossomo chamado de centro peptidil-transferase. ✓ A formação da ligação peptídica é uma atividade enzimática desempenhada pela subunidade maior do ribossomo. TERMINAÇÃO ✓ Fator de terminação liga-se ao stop códon (UAA, UGA e UAG) ✓ Proteína é liberada ✓ Complexo é desfeito MODIFICAÇÕES PÓS TRADUCIONAIS Após a tradução, algumas proteínas, antes de assumirem a sua conformação nativa, têm a sua estrutura primária alterada por modificações pós- translacionais. ✓ Formação de ligações dissulfeto/dobramento ✓ Clivagem da cadeia ✓ Fosforilação e glicosilação ✓ Metilação/Acetilação ✓ Adição de âncoras lipídicas
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