resumo biocel- citoesqueleto, constituintes e etapas de preparação de lâminas

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Etapas da produção de lâminas
Coleta do material: deve ser coletado enquanto o ser está vivo, para que as características se assemelham de quando ainda fazia parte do tecido. Portanto, é inviável a utilização de material humano.
Fixação: coloca-se o material em solução afim de paralisar/retardar as reações químicas, evitando a degeneração. O método químico consiste na imersão do órgão no líquido de bouin, no qual, o volume do recipiente é 3 vezes maior que o volume do material. Corta o órgão para que a difusão não seja tão lenta. O método de perfusão utiliza o sistema circulatório, onde a canula retira o sangue da veia, enquanto é introduzido uma solução salina pela artéria e lava-se o órgão, logo após é aplicada a solução fixadora. O método físico é congelamento.
Desidratação: Banha-se 6 vezes com diferentes concentrações de alcool, com intuito de que a água se misture, e logo após é retirada a mistura. O álcool é mais volátil.
Diafanização ou clarificação: é feita com xilol(material oleoso solúvel em parafina) para que todo o alcool saia do material a ser analisado.
Infiltração: aplica parafina que consegue misturar ao xilol que restou no interior da mostra. Para melhor resultado, utiliza-se o metacrilato, no entanto, é mais caro e perigoso.
Inclusão: após preenchimento com parafina, coloca o órgão em formas e reveste com parafina(como cubos de gelo) para solidificar.
Microtomia: micrótomo é responsável pelo corte do bloco de parafina, logo após, vai para a panela elétrica onde é submetido ao banho maria para esticar. Se fixa na lâmina após secar na borda da panela.
Fixação
Coloração: retira-se a parafina com xilol, o xilol com alcool para hidratação, escolhe a técnica para corar(é soluvel em água, por isso hidratar).
- Eosina-Hematoxilina é a mais utilizada. A hematoxilina é roxa, possui pH básico e afinidade por estruturas ácidas(basófilas). Enquanto a eosina é vermelho/alaranjado, com pH ácido e tem afinidade por estruturas básicas(acidófilas).
- Azul de tolouidina: técnica rápida, que consiste em pingar o corante e logo após lavar. Menos detalhamento e usada para identificar mastócitos.
- Alcian Blue: identifica grânulo de secreção(muco) em células caliciformes, que armazenam mucopolissacarídeos ácidos.
- Ácidos Periódico de Shiff(PAS): identifica células que armazenam qualquer tipo de carboidratos.
- Verhoeff: exclusiva para identificar fibras elásticas
-Tricômico de Gômori e Tricômico de Mallory: evidencia o tecido conjuntivo, separando-o de qualquer outro.
Membrana Plasmática
* É composta por glicoproteinas/lipoproteinas
*Possui como funções: individualização celular, compartimentalização celular(delimita as organelas), comunicação e sinalização celular, mediação de transposte, fixação e deslocamento celular(pseudópode), identificação e reconhecimento celular.
*Estrutura: modelo do mosaico fluido = dupla camada de lipídeos, com proteínas associadas.(os lipídeos permanecem em movimento)
*Componentes: bicamada lipídica, proteínas integrais, proteínas periférias e carboidratos do glicocálice
Obs: Mais colesterol, menor fluidez
Fluidez da membrana: mudança de camada do lipídeo é esporádica (movimento flip-flop)
Proteínas da Membrana
Proteínas transmembranas: se fundem formando um canal que atravessa a membrana, facilitando a difusão. Possui carga negativa ou positiva, transportando moléculas de carga contrária.
Proteína periférica: unidas à cabeça dos lipídeos, se concentram na face interna da membrana.
Modelo de Ancoragem: proteínas transmembranas ligadas ao citoesqueleto se projetam para fora das células e se ligam a outras proteínas.
Proteínas Adesivas - cálcio dependentes
Caderinas: adere célula-célula. Menor a quantidade de caderinas, maior o risco de metástase. Histidina, valina e alanina estão sempre presentes nas extremidades da caderinas para a adesão. Citoesqueleto de actina(microfilamentos). São dímeros homofílicos(se ligam em duplas)
Selectinas: adere célula-célula. A glicoproteína(selectina) reconhece oligossacarídeos da proteína alvo. Importantes da maginação e diapedese de leucócitos, além do endereçamento dos linfócitos. A vasodilatação e expressão da selectina permitem a maginação e diapedese (maior volume, menor velocidade, menor pressão). Os linfócitos são produzidos na medula óssea e enviados aos órgãos para que sejam armazenados. As paredes nas vênulas expressam selectinas, portanto, se ligam às selectinas dos linfócitos. Fora dos órgãos linfóides secundários, não é necessário expressão constante das selectinas.
Cálcio independentes
Integrinas: Célula-matriz. Formam hetero-dímeros. Importantes nas migrações celulares, para penetração da célula após diapedese. Alvos para integrina: fibronectina(liga aos componentes fibrinos-matriz de tec. conjuntivo) e laminina(lâmina basal).
Ig-CAMs(moléculas de adesão celular pertencentes à superfamília das imunoglobulinas): célula-célula. Frequentes nas terminações nervosas e sinapses químicas. Na sinapse, um impulsivo será unidirecional, que é falicitado pela ig-cams.
Especializações de Membrana
*Especializações Comunicantes(Gap e sinapses químicas)
*Especializações Adesivas
*Microvilosidades
*Cílios(transporte e proteção)
*Estereocílios
*Invaginações basais associadas à mitocôndrias
1)Microvilosidades: função de absorção. Evaginação digitiforme da memebrana, sustentada por microfilamentos de actina. Capacidade restrita de movimentação(rotação em torno do eixo, devido às ligações proteicas entre os microfilamentos)
Obs: glicocálice não é especialização, é um carboidrato. Recepção de moléculas, transporte celular, identificação celular, reconhecimento celular, adesão celular, locomoção celular, inibição por contato e atração iônica.
2)Cílios: transporte de muco, célula polarizada(por ser excretora, desloca o núcleo e organelas para a base, e deixa o ápice para armazenar muco). Sustentado por microtúbulos(corpúsculo basal: estrutura eletron densa abaixo da membrana que produz o microtúbulo do cílio). Dineinas se associam às tubulinas dos microtúbulos e são responsáveis pela movimentação de cílios e flagelos.
3)Estereocílios: são evaginações filiformes sustentadas por microfilamentos(actina). Fazem absorção e secreção simultaneamente(troca de fluido). 
4)Invaginações basais associadas às mitocôndrias: transporte ativo de íons, célula de ductos das glândulas salivares, sudoríparas. Coloca as moticôndrias nas invaginações.
Junções Adesivas
Oclusivas: zônula de oclusão
Adesivas: célula à célula(zônula de adesão e desmossomas). Célula à matriz(contato focal e hemi-desmossoma)
Comunicantes: Gap, sinapses químicas.
1)Zônula de oclusão: proteínas integrais de membrana que formam a zônula são diferentes das formadas em desmossomas e zônulas de adesão. Ausência de espaço intercelular. Reforçada internamente por microfilamentos de actina. Isola meio interno do meio externo e forma um canal(adenômero) que secreta substâncias das células que o cinrcunda. é contínua em torno do perímetro. Há trama terminal.
2)Zônula de adesão: Há espaço intracelular, permitindo passagem de líquido instersticial. Há eletron denso, assim como nos desmossomas, no entanto, é menos espessa. Microfilamentos de actina.
3)Desmossomas: Formado por proteínas caderinas. Não é contínuo em todo o perímetro, portanto, há espaço intracelular. Reforçado por filamentos intermediários. Qualquer tipo celular pode encontrar desmossomas. Não forma trama terminal.
obs: complexo juncional é a zona formada por essas 3 junções em ordem.
4) Hemidesmossoma: fixação das células à matriz. Tonofilamentos(filamentos de citoqueratina nos epitélios). Metade de um desmossoma, pois liga matriz à célula. Proteína integrina.
Citoesqueleto
*Constituintes: microtúbulos, microfilamentos e filamentos intermediários.
1)Microfilamentos: Formados por dois filamentos de actina enrolados em hélice, apresentam cerca de 5 a 7 nm de diâmentro. São instáveis. Participam da formação das zônulas de adesão e oclusão, além dos processos de fagocitose e pinocitose.Sustenta as microvilosidades e os estereocílios. Promovem a citocinese, movimentos de contração, da fixação e locomoção celular.
Drogas estabilizadoras(fixam a actina ao microfilamento, evitando crescimento ou diminuição do tamanho): citocalasinas e faloidinas
2)Filamentos intermediários: Apresentam cerca de 8 a 10 nm de diâmentro. São estáveis e formados por diferentes tipos de proteína. Contribuem para a formação de desmossomas e hemidesmossomas. Realizam o transporte intracelular de vesículas e de organelas, com o auxílio de proteínas motores. São encontrados tanto no citoesqueleto, quanto no núcleo.
Exemplos de proteínas formadoras de filamentos:
*Citoqueratina: tonofilamentos das células epidérmicas(célula sofre agressões contínuas queratinizando o local - aparelho no dentes)
*Laminas A,B e C: núcleos de qualquer tipo celular
*Vimentina: células conjuntivas
*Desmina: células musculares
3)Microtúbulos: Possuem 24 nm de diâmetro, são constituídos por 13 protofilamentos de tubulinas. São instáveis, podendo ser estabilizados pelas MAPs. Sustentam cílios e flagelos. Formam centríolos e corpúsculos basais, além do fuso mitótico. Participam dos processos de fagocitose e pinocitose.