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15/12/2014 1 Universidade Federal de Sergipe Centro de Ciências Biológicas e da Saúde Departamento de Morfologia Disciplina: Microbiologia Geral Prof. Bruno Mello de Matos Genética Microbiana Estrutura e função do material genético DNA - nucleotídeos - bases nitrogenadas (A, T, C, G) - desoxirribose (pentose) - fosfato - adenina = timina - citosina = guanina - filamento duplo (complementares) 15/12/2014 2 DNA RNA - nucleotídeos - bases nitrogenadas (A, U, C, G) - ribose (pentose) - fosfato - citosina = guanina (vice-versa) - timina = adenina - adenina = uracila - filamento simples Estrutura e função do material genético 15/12/2014 3 RNA Genética - ciência da hereditariedade - estudos dos genes - como eles transportam a informação - como são replicados - transmitidos entre organismos - expressão em características particulares 15/12/2014 4 Genótipo e Fenótipo Genótipo - composição genética de um organismo - informação que codifica as características de um organismo - propriedades potenciais - coleção de genes Fenótipo - propriedades reais expressas - manifestação do genótipo - capacidade de realizar uma reação química em particular - conjunto de proteínas (enzimática ou estrutural) Genótipo e Fenótipo 15/12/2014 5 DNA e cromossomos Bactérias - cromossomo único circular (DNA) - superenovelado - ligado a membrana plasmática O fluxo da informação genética - replicação DNA: fluxo da informação genética para geração seguinte - DNA se replica antes da divisão celular - cada célula recebe um cromossomo idêntico ao original - metabolismo - DNA transcreve RNAm - RNAm traduz proteína 15/12/2014 6 O fluxo da informação genética Replicação do DNA - DNA parental origina 2 moléculas DNA filhas - chave da replicação: fitas complementares - enzimas específicas em cada etapa - DNA polimerase - replicação semiconservativa 15/12/2014 7 - nucleotídeos no citoplasma Replicação do DNA Replicação do DNA Nucleosídeo trifosfato 15/12/2014 8 Replicação do DNA Replicação do DNA 15/12/2014 9 - replicação bidirecional ao redor do cromossomo - duas forquilhas de replicação movendo-se em direções opostas - forquilhas se encontram = replicação completa - cópia se liga a membrana do lado oposto Replicação do DNA - erros de incorporação de bases (1 em 1010) - capacidade de correção da DNA polimerase - remoção da base incorreta - inserção da base correta - replicação precisa Replicação do DNA 15/12/2014 10 RNA e síntese proteica - transcrição - transcrição da informação do DNA - síntese fita RNA a partir de um molde de DNA - RNA polimerase - geração do RNAm RNA e síntese proteica - local promotor (início) - região de terminação (fim) - RNAm carrega informação para síntese de proteínas - tradução 15/12/2014 11 RNA e síntese proteica Transcrição RNAm 15/12/2014 12 RNA e síntese proteica - tradução - linguagem do ácido nucleico para a linguagem das proteínas - linguagem do RNAm = códons - códon = sequência de 3 nucleotídeos - cada códon codifica um aminoácido Códons e aminoácidos 15/12/2014 13 RNA e síntese proteica - 64 códons - 20 aminoácidos - degeneração - permite alterações e mutações no DNA sem afetar a proteína produzida - códon de iniciação - códons de terminação RNA e síntese proteica - ribossomo: local de tradução - RNAt - reconhece o códon e transporta o aminoácido requerido - anticódon (RNAt) - sequência de 3 bases complementar ao códon 15/12/2014 14 RNA e síntese proteica - ribossomo - dirigir ordenadamente a ligação do RNAt ao códon e montar os aminoácidos em uma cadeia, produzindo a proteína 15/12/2014 15 15/12/2014 16 15/12/2014 17 Mutação - alteração na sequência de bases do DNA - erros durante a replicação do DNA - alteração no produto codificado pelo gene - gene que codifica enzima – mutação - enzima inativa - enzima menos ativa - alteração na sequência de aminoácidos 15/12/2014 18 Mutação - alteração desvantajosa, letal - célula pode perder característica fenotípica importante - alteração benéfica - enzima com atividade nova - enzima com atividade intensificada Mutação - mutações simples/silenciosas/neutras - substituição de bases (mutação de ponto) - mutações de fase de leitura 15/12/2014 19 Mutação - mutação espontânea - ausência de agente causador - agentes mutagênicos - ação direta ou indireta - reação química ou física com DNA - substâncias químicas - raios X - luz UV Mutação - resistência a antibióticos - patogenicidade alterada - membrana externa - cápsulas 15/12/2014 20 Transferência genética e recombinação Recombinação - troca de genes entre duas moléculas de DNA - eucariotos - parte do ciclo sexual do organismo (vertical) - procariotos - diversas formas (vertical/horizontal) Transferência genética e recombinação - contribui para a diversidade genética - fonte para a evolução - mais benéfica que mutação - menos chance de destruir a função do gene - pode permitir realizar nova função importante 15/12/2014 21 Transformação em bactérias - gene transferido de uma bactéria para outra como DNA “nu” em solução - experimento de Griffith (1928) - Streptococcus pneumoniae - bactéria morta/lisada libera seu DNA - bactéria competente capta o DNA - integração ao cromossomo bacteriano 15/12/2014 22 Transformação em bactérias Conjugação em bactérias - mediada por plasmídeo - fragmento de DNA que se replica de modo independente do cromossomo bacteriano - plasmídeos são transferidos na conjugação - requer contato direto célula-célula - células de tipos opostos 15/12/2014 23 Conjugação em bactérias - célula doadora: possui plasmídeo - célula receptora: não possui plasmídeo - pili ou contato - pode haver transferência de fragmentos do DNA cromossomal Conjugação em bactérias 15/12/2014 24 Transdução em bactérias - transferência DNA bacteriano de célula doadora para célula receptora por meio de um bacteriófago (vírus) - DNA viral e proteína são sintetizados - DNA bacteriano, DNA plasmidial, DNA viral podem ser empacotados no capsídeo - após liberação do fago, ele infecta outra bactéria e transfere o DNA 15/12/2014 25 Plasmídeos e Transposons - fornecem mecanismos adicionais para modificação genética - procariotos e eucariotos Plasmídeos - fragmentos DNA autorreplicantes - circulares - principalmente em bactérias - micro-organimos eucarióticos - Saccharomyces cerevisiae 15/12/2014 26 Plasmídeos - em geral são dispensáveis - em algumas situações podem ser cruciais - catabolismo de substâncias incomuns - sobrevivência em ambientes desafiadores - plasmídeos que aumentam patogenicidade - toxinas, bacteriocinas Plasmídeos - fator R (fator de resistência) - resistência a antibióticos - metais pesados - toxinas celulares 15/12/2014 27 - fator R de Bacterioides fragilis Transposons - pequenos fragmentos de DNA que podem se mover/transpor de uma região da molécula de DNA para outra - mecanismo natural - ocorrem em todos os organismos - se movem dentro do mesmo cromossomo ou não - se movem de cromossomo para plasmídeo 15/12/2014 28 Genes e Evolução - atividade dos genes controladas por mecanismos internosda célula - alterações nos genes - mutação, transposição, recombinação - diversidade aos descendentes das células - diversidade - material para evolução - seleção natural Genes e Evolução - seleção natural - sobrevivência dos indivíduos mais adaptados a um ambiente específico - micro-organismos atuais - resultado da evolução - modificação genética contínua - adaptação a diferentes ambientes
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