Toxicologia Clínica Imipramina

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO 
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE 
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA 
TRIAGEM TOXICOLÓGICA DE FÁRMACOS BÁSICOS EM URINA POR 
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA – CCD. 
Teste Qualitativo - Imipramina 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RECIFE - PE 
2018 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA 
TRIAGEM TOXICOLÓGICA DE FÁRMACOS BÁSICOS EM URINA POR 
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA – CCD. 
Teste Qualitativo - Imipramina 
 
 
 
 
Relatório elaborado durante a aula prática de teste 
qualitativo de triagem toxicológica de fármacos 
básicos por meio da cromatografia de camada 
delgada na urina de voluntário anônimo, no curso 
de farmácia da UFPE, com finalidade de obtenção 
parcial de nota na disciplina Toxicologia Clínica. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RECIFE - PE 
2018 
 
 
Resumo 
 
O fármaco imipramina é uma droga caráter básico. A cromatográfica de camada 
delgada (CCD) é uma técnica qualitativa de baixo custo, acessível e simples, por isso 
foi escolhida. A leitura das placas cromatográficas foi feita após revelação com reativo 
de Dragendorff iodado. Os resultados foram expressos como valores de Rf, onde foi 
confirmado a presença de Imipramina. A utilização da técnica de CCD pode facilitar e 
tornar mais rápido o reconhecimento de fármacos extraídos de fluídos biológicos. 
 
Palavras chaves: Imipramina, cromatografia em camada delgada 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
 
 
1. INTRODUÇÃO .................................................................................................................. 5 
2. OBJETIVOS ....................................................................................................................... 7 
2.1 Objetivo Geral ............................................................................................................. 7 
2.2. Objetivos Específicos .................................................................................................. 7 
3. MATERIAIS E MÉTODO ..................................................................................................... 8 
3.1 Materiais .................................................................................................................... 8 
3.2 Reagentes ................................................................................................................... 8 
3.3 Método ....................................................................................................................... 8 
4. RESULTADOS .................................................................................................................. 10 
5. DISCUSSÃO ..................................................................................................................... 12 
6. CONCLUSÃO ................................................................................................................... 13 
REFERÊNCIAS ....................................................................................................................... 14 
 
 
 
 
 
 
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1. INTRODUÇÃO 
 
Intoxicação medicamentosa pode ser definido como uma série de sinais e sintomas 
que são produzidos, quando um medicamento é administrado, entrando em contato 
com pele, olhos ou membranas mucosas em doses acima da terapêutica. As 
intoxicações medicamentosas podem ser classificadas como agudas ou crônicas, que 
varia de acordo com as propriedades farmacocinéticas de cada droga. Dentre os 
medicamentos que podem ocasionar toxicidade, têm-se os antidepressivos tricíclicos. 
Os antidepressivos tricíclicos (ADT) constituem uma classe de drogas de alta 
importância toxicológica, porque o uso abusivo dessa substância pode acarreta alguma 
sintomatologia desagradável ou mesmo risco de vida. Tais situações ocorrem pelo fácil 
acesso, baixo custo, da distribuição pelo sistema público de saúde e pela prescrição 
indiscriminada. 
Esse tipo de droga aparece frequentemente nas tentativas de suicídio, mesmo 
porque é muito utilizada por pacientes que apresentam tendência suicida. Sabe-se que 
90% das internações por intoxicações devem-se às tentativas de suicídio. Destas, 
cerca de 20% são por antidepressivos. Das internações ocorridas por ingestão de 
antidepressivos, há maior gasto hospitalar naquelas por ADT do que naquelas por 
inibidores seletivos da recaptação da serotonina (ISRS), chegando a ser 4 vezes 
maior10, por causa da maior toxicidade dos primeiros. Apesar da ampla gama de 
antidepressivos relacionados a intoxicação, pode-se citar a imipramina. 
Imipramina pertence à classe dos antidepressivos tricíclicos, sendo portanto 
usados para tratamento da depressão, distúrbios do humor, estados de pânico, dores 
crônicas e incontinência urinária noturna em crianças acima de 5 anos de idade são 
outras condições psicológicas que podem ser tratadas com imipramina. Este 
medicamento age aumentando a quantidade de mensageiros químicos (noradrenalina 
e serotonina) no cérebro, ou fazendo seus efeitos durarem mais tempo. A imipramina 
tem várias propriedades farmacológicas, incluindo-se as propriedades alfadrenolítica, 
anti-histamínica, anticolinérgica e bloqueadora do receptor serotoninérgico (5-HT). 
Contudo, acredita-se que a principal atividade terapêutica da imipramina seja a inibição 
da recaptação neuronal de noradrenalina (NA) e serotonina (5-HT). A imipramina é 
chamada de bloqueador "misto" da recaptação, isto é, ela inibe a recaptação da 
noradrenalina e da serotonina, aproximadamente na mesma proporção. 
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Apesar da existência de metodologias de análise modernas com alta especificidade 
e elevada sensibilidade, parte dos laboratórios de toxicologia analítica ainda utilizam 
métodos clássicos, como a cromatografia em camada delgada (CCD).A técnica de 
CCD é considerada como método de escolha para a triagem de substâncias 
desconhecidas devido a sua velocidade, confiabilidade, simplicidade, baixo custo e 
habilidade de gerar parâmetros como cor e fator de retenção (Rf), frequentemente 
expresso multiplicado por 100 (hRf), em um curto intervalo de tempo, sendo 
considerada uma técnica de triagem mais abrangente que os imunoensaios. Sendo 
assim, o objetivo do trabalho foi utilizar o método de cromatografia de camada delgada 
para separação de componentes de uma mistura na amostra de urina, visando a obter 
a identificação de substância causadora de toxicidade (fármaco). 
 
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2. OBJETIVOS 
 
2.1. Objetivo Geral 
 
 Utilizar o método de cromatografia de camada delgada para separação de 
componentes de uma mistura líquido-líquido em amostra de urina, visando a 
identificação de substância causadora de toxicidade, como o fármaco 
imipramina. 
 
2.2. Objetivos Específicos 
 
 Desenvolver a habilidade da técnica se separação de fases de líquidos, com 
auxílio das vidrarias de laboratório, aplicando e teste qualitativo por meio da 
cromatografia de camada delgada. 
 Resgatar os conhecimentos do método físico-químico da cromatografia e 
aplicar na realização do teste de triagem toxicológico de fármaco básico 
utilizando como amostra a urina. 
 Interpretar o teste por meio da emissão de laudo/diagnóstico de intoxicação por 
agente farmacológico presente na urina do voluntário anônimo. 
 
 
8 
 
3. MATERIAIS E MÉTODO 
 
3.1. Materiais 
 
 Ampola de separação 
 Béquer e funil de vidro 
 Pipetas graduadas 
 Pêra 
 Fitas de pH 
 Materialpara CCD 
 Papel filtro 
 Placa de silicagel 
 
 
3.2. Reagentes 
 
 Éter-Clorofórmio (1:3) 
 Hidróxido de amônio 27-30% 
 Hidróxido de sódio 5% 
 Metanol 
 Sulfato de sódio anidro 
 Reativo de Dragendorff iodado 
 Solução padrão de cloridrato de imipramina 1mg/mL em metanol 
 
 
3.3. Método 
 
Procedimento 
 
Primeiramente foi coletada uma alíquota de 10 mL da amostra de urina que foi 
colocada num béquer e adicionado um volume de 9 gotas de hidróxido de sódio a 5%, 
para que pudesse realizar a medição do pH que foi de 9,0, em seguida foi colocada a 
solução (urina + NaOH) em uma ampola de separação, e adicionado 10 mL de éter 
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etílico com clorofórmio numa proporção de 1:3, foi colocada a tampa fechando a 
ampola de separação para agitação por 1 minuto, passado este tempo de agitação, o 
material foi deixado em repouso no suporte para que ocorresse separação das fases, 
e realizasse a extração da amostra para a análise, onde foi utilizado um béquer com 
funil de vidro contendo o papel filtro, onde no béquer ficou retida a fase orgânica 
utilizada para análise. Em seguida, o béquer contendo a fase orgânica foi exposto a 
temperatura elevada até que secasse, fazendo evaporar o conteúdo líquido da 
amostra, na sequência o béquer com o extraído foi deixado em repouso até resfriar, e 
realizado a ressuspensão do material por meio da adição de 300 µL de metanol, onde 
foi colocada uma amostra de 100 µL em uma placa de Silicagel Ativada, assim como 
também foi colocado em torno de 50 a 75 µL do padrão. Por fim, foi colocada a placa 
de silicagel ativada no sistema eluente contendo metanol, hidróxido de amônio na 
proporção de 98,5:1,5 para um volume final de 50 mL por um período de tempo 
necessário para que a carreira do material fosse satisfatória e não perdesse o 
experimento. Ao final dessa etapa, foi realizada a revelação por meio do revelador 
com Dragendorf iodado. 
 
 
 
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4. RESULTADOS 
 
Através da metodologia trabalhada na triagem toxicológica de fármaco básicos em 
urina utilizando a cromatografia de camada delgada, foi possível obter os resultados 
das atividades de substâncias na amostra teste (urina) para que pudéssemos elaborar 
o laudo toxicológico do paciente, e poder comprovar se o mesmo fez uso da 
imipramina. 
Para chegar ao resultado, foi necessário realizar o cálculo do fator de retenção ou 
RF, porém para obter o RF, será necessário conhecer o comportamento das 
substâncias imipramina, do padrão e do solvente utilizados na metodologia, como por 
exemplo: fase estacionária e fase móvel, informações estas, indispensáveis para 
atender o princípio da cromatografia visando a mobilidade do equilíbrio, conforme 
mostra a figura 01. 
O RF é um parâmetro físico da substância e pode ser utilizado para sua 
identificação caso se mantém constante as seguintes condições: solvente ou mistura 
de solventes, fase estacionária (silicagel), condições ambientais (temperatura dentre 
outras), espessura da camada e quantidade de amostra aplicada. 
 
Figura 01: Imagem própria. 
 
Para fins de cálculo, utiliza-se a seguinte fórmula: 
Rf = 
𝑨
𝑺
 ; Onde: 
Rf: refere-se fator de retenção; 
 A: refere-se a distância percorrida pela amostra; 
 S: refere-se a distância percorrida pelo solvente. 
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No procedimento realizado na aula prática foram obtidas as seguintes 
informações: 
 
Figura 02: Imagem obtida na aula prática. 
 
A = 1,5 cm 
S = 3,2 cm 
Rf1 = 
1,5
3,2
 ; 
 
Rf1: Refere-se ao fator de retenção da amostra teste. 
Rfp: Refere-se ao fator de retenção da solução padrão. 
 
Obs1: Rfp=? 
Obs2: Não possível realizar o cálculo do fator de retenção do padrão, pois o mesmo 
não migrou na placa, como ilustra acima a figura 02, o que impossibilitou observar 
seu deslocamento, sendo informação indispensável para a obtenção do resultado, e 
com isto poder realizar a comparação com a amostra teste. 
 
Rf1= 0,47 
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5. DISCUSSÃO 
 
Como interpretação dos resultados da triagem toxicológica por imipramina em 
urina, foi concluído que o laudo para o teste aplicado encontra-se como inconclusivo, 
devido a não migração (deslocamento) da solução padrão na placa de silicagel, onde 
o padrão permaneceu no ponto de aplicação ou possivelmente seu deslocamento foi 
mínimo, o que tornaria impossível de visualização a olho desarmado ou olho nú. 
Devido ao fato mencionado do comportamento da solução padrão, poderíamos 
deduzir que a mesma não atingiu uma diluição satisfatória para que contribuísse na 
sua migração pela placa, o que comprometeu o resultado do teste em questão. 
Como forma de abordagem científica, o conteúdo trabalhado nesta prática foi 
bastante satisfatória, no sentido de despertar o raciocínio lógico e a compreensão do 
conteúdo trabalhado na mesma, o que leva a tomada de decisões para solucionar 
problemas no sentido de obter resultado satisfatório e liberação de laudo seguro e 
fidedigno na abordagem toxicológica. 
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6. CONCLUSÃO 
 
A técnica de CCD facilita a triagem para a análise qualitativa de substâncias 
orgânicas, possibilitando a separação dos compostos tanto na fase estacionário como 
na fase móvel. 
Na prática realizada em aula, foi possível, de forma prática e simples, analisar 
qualitativamente a presença de Imipramina na urina analisada, através do valor de Rf. 
 
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REFERÊNCIAS 
 
FERNANDES, G.; PALVO, F.; PINTON, F. A.; Impacto das intoxicações por 
antidepressivos tricíclicos comparados aos depressores do “sistema nervoso central”. 
Arquivo de ciências da saúde, v. 13, n. 3, p. 61-65, 2006. 
 
MALAMAN, K. do R. et al. Perfil das intoxicações medicamentosas no 
brasil. Infarma, Cidade, v. 21, n. 7, p. 9-15, set. 2009.