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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Profa. Responsável: Naila Francis Paulo de Oliveira Aluno:___________________________________________________Turma___ João Pessoa-PB 2011.2 CENTRO DE CIÊNCIAS EXATAS E DA NATUREZA Práticas de Biologia Celular Farmácia 2 ÍNDICE INTRODUÇÃO 03 ANATOMIA DO MICROSCÓPIO DE LUZ 04 CÉLULAS PROCARIÓTICAS E EUCARIÓTICAS 06 MEMBRANA PLASMÁTICA 07 NÚCLEO 08 Práticas de Biologia Celular Farmácia 3 INTRODUÇÃO A finalidade deste manual é o acompanhamento de aulas teóricas de Biologia Celular com demonstrações práticas ilustrativas da morfologia celular. Cada roteiro contém uma parte escrita, chamando a atenção para o que é importante realizar durante a observação da lâmina ou do experimento. O estudo da Biologia Celular está em grande parte calcado sobre a morfologia da célula e não pode, portanto, deixar de ser acompanhado a cada passo pelo exame, por parte dos estudantes, das estruturas descritas. Atualmente os métodos e instrumentos disponíveis para o exame das estruturas celulares apresentam um elevado grau de sofisticação, contudo as práticas possíveis ficam limitadas pelo tempo e instrumentos disponíveis para os alunos, no caso, microscópios de luz. Para complementar o estudo das células, é também apresentado material fotográfico obtido com a técnica de microscopia eletrônica para identificação e análise da ultra-estrutura dos componentes celulares. NORMAS E PRINCÍPIOS DO LABORATÓRIO DE BIOLOGIA Os laboratórios didáticos são utilizados por várias pessoas diferentes a cada semana. Se não houver ordem, respeito e cooperação, seu funcionamento se torna inviável. Além disso, todo laboratório envolve algum tipo de risco, pelo material e equipamentos que usa. Portanto, é fundamental que as normas gerais e de segurança pessoal sejam conhecidas. 1. Trate educadamente todas as pessoas que freqüentam o laboratório; 2. É expressamente proibido fumar no laboratório, tendo em vista a presença de substâncias inflamáveis em uso ou em estoque. 3. É obrigatório o uso do avental no laboratório, pois este protege sua pele e sua roupa contra ferimentos e manchas por substâncias que respinguem; 4. Deixe as bancadas de trabalho sempre limpas e livres de material estranho ao trabalho; ao final de cada trabalho, limpe o material, equipamento e lugar utilizados. 5. A vidraria deve ser usada com todo cuidado; 6. Cuide bem dos aparelhos e equipamentos, especialmente dos microscópios. São muito caros e sua manutenção e reparo, difíceis; 7. Nunca leve as mãos à boca ou aos olhos quando estiver manuseando produtos químicos; 8. É proibido comer dentro do laboratório, bem como a permanência de alimentos durante as aulas práticas. ORIENTAÇÕES PARA O USO DO MANUAL DE AULAS PRÁTICAS Cada prática a ser realizada consta de um roteiro de orientação e para melhor resolvê-la, o aluno deverá; 1. Ler com atenção o roteiro; 2. Observar a lâmina orientando-se pela descrição do roteiro ou dos esquemas, colocando legendas nas estruturas; 3. O esquema deve ser fiel ao observado na lâmina; 4. Deixar o manual na Faculdade para a correção das atividades pela professora. Práticas de Biologia Celular Farmácia 4 ANATOMIA DO MICROSCÓPIO DE LUZ revólver com objetivas ocular canhão platina condensador diafragma base lâmpada parafusos macrométrico micrométrico suporte charriot Práticas de Biologia Celular Farmácia 5 MICROSCÓPIO DE LUZ 1- Baseando-se na figura do ML da apostila e no ML no laboratório, dê as funções das diferentes partes que o constituem. Sistema mecânico: Base ou pé:____________________________________________________ Coluna ou braço:________________________________________________ Platina:________________________________________________________ Charriot:_______________________________________________________ Macrométrico:___________________________________________________ Micrométrico:___________________________________________________ Canhão:_______________________________________________________ Revólver:______________________________________________________ Sistema óptico de observação: Lente ocular:__________________________________________________ Lente objetiva:_________________________________________________ Sistema óptico de iluminação: Fonte luminosa:_________________________________________________ Diafragma:_____________________________________________________ Condensador:__________________________________________________ Filtros:________________________________________________________ 2- O aumento final da imagem ao microscópio é obtido multiplicando-se o valor do aumento da OBJETIVA pelo valor de aumento da OCULAR. Ex: uma objetiva de 40´e uma ocular de 10´, teremos um aumento final de 400x. Calcule os aumentos finais quando são utilizados: a) ocular de 10´/ objetiva de 100´:________________________________ b) ocular de 16´/ objetiva de 40´:_________________________________ Práticas de Biologia Celular Farmácia 6 CÉLULAS PROCARIÓTICAS E EUCARIÓTICAS Célula Procariótica 1. Coloque um pouco de iogurte sobre uma lâmina com o auxílio de um palito de dente ou fósforo limpo. Pingue uma gota de azul de metileno, cubra com lamínula, observe, desenhe e identifique parede celular e citoplasma. Aumento:_________ Célula Eucariótica Animal 2- Com um palito de fósforo, raspe a parte interna da bochecha e, depois esfregue o palito sobre a lâmina limpa. Coloque uma gota de corante (azul de metileno 0,5%) sobre o material, cubra com lamínula e observe. Desenhe, identificando membrana plasmática, núcleo e citoplasma. Aumento:_________ Célula Eucariótica Vegetal 3- Com a gilete ou com o estilete retire um pequeno pedaço da epiderme inferior de uma folha de Tradescantia pallida. Distenda a epiderme, com a ajuda do pincel, em cima de uma lâmina de vidro.Pingue uma gota de água sobre a epiderme e cubra-a com uma lamínula. Focalize ao ML com a objetiva de menor aumento e depois com a objetiva de 400x. Desenhe e identifique parede celular, citoplasma e núcleo. Aumento:_________ Práticas de Biologia Celular Farmácia 7 MEMBRANA PLASMÁTICA 1- Efeito de Solvente Orgânico: Numere 2 tubos de ensaio e coloque num deles 5 mL de solução de: água destilada e no outro, 5 mL de acetona pura. Adicione a cada tubo um pequeno pedaço de beterraba com cerca de 1 cm3. Espere cerca de 1 hora e observe o que ocorreu em cada tubo. Como foi a atuação da água destilada e da acetona sobre a membrana plasmática? 2- Efeito da Diferença de Concentração em Células Vegetais: Aplicar uma gota de água destilada sobre uma lâmina histológica. Retirar uma película bem delgada da epiderme dorsal de Tradescantia discolor e colocar sobre a gota de água e cobrir com lamínula. Observar ao microscópio com a objetiva de 40x a forma das células e a distribuição da pigmentação interna (pigmento antocianina) dos vacúolos. Esquematizar o observado. Levantar cuidadosamente a lamínula, retirar, com o auxílio de papel de filtro, o excesso de água do material. Aplicar uma gota de solução saturada de glicose sobre o material e colocar a lamínula. Observar as células (objetiva 40x) e esquematizar o observado. Levantar cuidadosamente a lamínula, retirar a solução saturada de glicose e colocar água sobre o material. Observar as células (objetiva 40x) e esquematizar o observado. c/ água c/ solução hipertônica c/ solução hipotônica Aumento:________ Práticas de Biologia Celular Farmácia 8 NÚCLEO 1- Desinfete a polpa do dedo médio/ indicador com álcool. Perfure o dedo com uma lanceta estéril. Coloque uma gota de sangue a aproximadamente 1 cm da extremidade da lâmina. Fazer o esfregaço com a outra lâmina. Esperar secar. Colocar a lâmina no suporte, cobri-la com o corante e aguardar 10 minutos. Acrescentar 10 gotas de água destilada e esperar mais 5 minutos. Escorrer e lavar a lâmina com um fio de água corrente. Secá-la ao ar para observação ao microscópio no aumento de imersão (com os devidos cuidados). Desenhe os diferentes tipos celulares, observando com atenção a forma do núcleo, e identificando a membrana plasmática, citoplasma e núcleo. GLÓBULOS VERMELHOS HEMÁCEAS (ERITRÓCITOS) GLÓBULOS BRANCOS (LEUCÓCITOS) NEUTRÓFILO EOSINÓFILO BASÓFILO LINFÓCITO MONÓCITO PLAQUETAS Aumento:_____________
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