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Lista de Exercícios Cromatografia em Camada Fina (CCF) ou (TLC) Cromatografia em papel (CP) Cromatografia em Camada Delgada (CCD) 1. Quais os tipos de cromatografia apropriadas para a análise e purificação de grandes moléculas como as proteínas? 2. Qual a propriedade físico-química que promove a afinidade das substâncias entre as fases móveis estacionárias durante a cromatografia por partição. 3. Explique de forma objetiva o mecanismo de separação cromatográfica por exclusão. 4. O que você entende por Rf e por tempo de retenção? Em que tipo de cromatografia estes parâmetros podem ser utilizados? 5. Sobre a técnica cromatografia em camada delgada, responda: (a) Quais os fundamentos básicos? (b) Cite os usos mais consagrados da técnica. (c) Enumere as vantagens e desvantagens da técnica. (e) Como o fator de retenção de um soluto pode ser alterado? (f) Que características deve ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento? (g) Quais artifícios podem ser utilizados quando suspeitamos que um componente da amostra a ser analisada pode não ser visível a olho nu? 6. Explique o fundamento das técnicas de cromatografia em camada delgada em escala analítica e em escala preparativa. 7. Uma solução diluída de b-naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas em placas cromatográficas de sílica gel. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-se 3 diferentes eluentes: cloreto de metileno puro, cloreto de metileno contendo 25% de acetato de etila e cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila. Que efeito é esperado sobre os valores de Rf dos dois compostos, considerando o aumento da proporção do acetato de etila nas fases móveis? Justifique sua resposta. 8. Qual é o princípio da cromatografia em papel? 9. Qual o efeito da temperatura na cromatografia em papel? 10. Qual é a fase estacionária na cromatografia em papel? 11. Uma mistura de dois componentes A e B é separada por CCD, cuja faze estacionária é a sílica gel (SiO2.xH2O). Quando o eluente é éter de petróleo o cromatograma apresenta duas manchas com Rf 0,10 e 0,95. Com o eluente diclorometano o cromatograma apresente duas manchas com Rf 0,35 e 0,80. Discuta esses resultados baseando-se nas interações entre os componentes A e B e a fase móvel e estacionária. O que você pode concluir a respeito da estrutura desses compostos? 12. Em uma análise cromatográfica em camada delgada de um extrato hexânico foi utilizado sílica gel como fase estacionária e a mistura acetato de etila/hexano (20:80%). A placa cromatográfica obtida após a eluição esta mostrada abaixo. Calcule os respectivos Rf para os compostos 1, 2 e 3. 13. Quais considerações tem pouca importância na técnica de TLC? A) Os compostos a serem separadas têm que ter cor. B) Os compostos devem ser aplicadas em uma mancha em baixa concentração C) O nível da fase móvel líquida não deve estar tão alta que a mancha da amostra fique submersa no líquido. D) O vapor da câmara em desenvolvimento deve estar em equilíbrio com a fase móvel. E) A habilidade eluente da fase móvel deve ser selecionada corretamente. Frente do solvente Placa cromatográfica 12 cm 3,5 cm 6,75 cm 10 cm 1 2 3 14. O esquema seguinte representa um cromatograma em CCDA de dois materiais. A e B são substâncias coloridas. a) Qual a função do eluente na cromatografia? b) Calcule o fator de retenção (Rf) dos diversos componentes identificados (meça as distâncias com o auxílio de uma régua). 15. Das seguintes misturas abaixo, prediga qual substância será a primeira a eluir na cromatografia de adsorção, considerando fase normal (sílica): 1 3 4 2 A B
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