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ESTUDOS DE MICROBIOLOGIA 
MICROBIOLOGIA BÁSICA E MICROBIOLOGIA 
APLICADA 
Microbiologia aplicada; estuda-se como os 
microrganismos podem ser usados ou 
controlados para várias finalidades práticas. Os 
principais campos de aplicação da 
microbiologia incluem: medicina, alimentos e 
laticínios, agricultura, indústria e meio ambiente. 
MORFOLOGIA BACTERIANA 
REINO MONERA: Todos os indivíduos do reino 
monera são procariontes!! (não possuem membrana 
nuclear). É o único reino procarionte. 
 Indivíduos do reino monera: Bactérias, ciano 
bactérias e arqueas. 
 
 Qual a importância desses indivíduos? 
 
Decomposição, fermentação, biotecnologia 
(produção de insulina e vitaminas), ciclo do 
nitrogênio, fabricação de antibióticos, conservação 
de bebidas e alimentos. 
São unicelulares (possuem única célula) 
São anaeróbicos ou aeróbicos (não utilizam/utilizam 
oxigênio como fonte de energia) 
 Anaeróbicas estritas: morrem com oxigênio. 
 `` facultativas: vivem tanto com ou sem 
oxigênio. 
Podem ser auto/heterotróficos. 
 Autotróficos: não precisam comer para 
obtenção de energia; fazem fotossíntese ou 
quimiossíntese. 
 Heterotróficos: Precisam se alimentar de 
matéria orgânica. (saprófilas, 
parasitas,simbiontes,..) 
NUTRIÇÕES 
Fotossíntese: bactérias que utilizam a energia da luz 
solar para produção de glicose. 
Sulfobacterias: utilizam o sulfeto de hidrogênio (H2S) 
no lugar de H2O 
Ciano bactérias: Utilizam H2O 
Quimiossíntese: produzem glicose a partir de uma 
reação química. 
Usam amônia a sulfeto. 
Possuem membrana celular e PAREDE CELULAR. 
(FORMADA POR PEPTÍDEO GLICANO) É uma 
característica do reino monera. 
 FLAGELOS: Servem para locomoção. 
 MESOSSOMOS: São estruturas 
citoplasmáticas de bactérias utilizadas para 
respiração celular. Já que não possuem 
mitocôndria. Risossomos (síntese de proteína) 
 
Antibióticos atacam a parede celular ou o 
processo de síntese de proteínas. 
*RETIRADO DO CADERNO* 
ESTRUTURAS DAS BACTÉRIAS 
 As espécies de procariotos formam dois 
dos três domínios da vida: as bactérias e 
as arqueas. 
 Possuem fita dupla de DNA, sem um 
envoltório como nos eucariontes 
 Possuem plasmídeo: DNA 
extracromossomal responsável pela 
transmissão de genes e resistência a 
antibióticos. 
 Somente os ribossomos são encontrados 
no citoplasma da célula bacteriana 
 Algumas possuem capsula, que servem 
de proteção e dificultam a fagocitose 
 Flagelos para locomoção 
 Fimbrias pili ajudam na fixação e troca de 
material genético 
 Membrana celular procariota: constituída 
por lipídios e proteínas 
 Parede celular constituída por 
peptídeoglicanos. 
PRINCIPAIS DIFERANÇAS DE ARQUEAS PARA 
BACTÉRIAS: 
 Arqueas não são patogênicas 
 Arqueas ajudam na decomposição 
 Nos ruminantes degradam a celulose (nós 
não fazemos essa degradação). 
 Bactérias são procariontes e arqueas 
estão mais próximas de seres eucariontes. 
 bacterias não sobrevivem em ambientes 
salinos (por isso não se ploriferam em 
charques) 
 Membrana: glicerol éter, sem 
peptídeoglicano, sem flagelo. 
 Têm capacidade se sobreviverem em 
ambientes extremos, diferente das 
bactérias, 
ESTRUTURA DAS BACTÉRIAS 
FORMA E ARRANJO 
FORMA: Diz respeito ao formato individual da 
estrutura da célula bacteriana. 
Determinada geneticamente; Pode ser 
MONOMÓRFICA OU PLEOMÓRFICA (podem 
assumir várias formas por não possuir parede 
celular, são as que se coram bem na coloração 
de gram). 
As bactérias podem ser classificadas por várias 
características: 
Forma: bactérias esféricas (cocos), em forma de 
bastonete (bacilos) , em forma espiraladas 
(espirilos, espiroquetas e vibrião). 
Cocos podem ser nomeados por seus 
agrupamentos, sendo os principais: estafilococos 
(como cachos de uva); estreptococos (como 
contas de um colar); tétrades (como um 
quadrado) e sarcina (como um cubo) 
A divisão em um plano produz diplococos e 
estreptococos. 
A divisão em dois planos produz tétrades. 
A divisão em três planos produz sarcina. 
A divisão em múltiplos planos produz estafilicocos. 
 
 
COLONIAS: 
8 cocos: sarcina 
Colar de pérolas, streptococos 
Cachinho de uvas: stafilococos 
MICROSCOPIA 
O microscópio é um instrumento 
indispensávelpara os trabalhos laboratoriais, 
tornando possível a observação de estruturas 
invisíveis a olho nu. 
■ Os microscópios são classificados dependendo 
do princípio no qual a ampliação é baseada. Eles 
podem ser: 
■ Ópticos – empregam dois sistemas de lentes, 
ocular e objetiva, através das quais a imagem 
ampliada é obtida. 
■ Eletrônicos – empregam um feixe de elétrons 
para produzir a imagem ampliada. 
 
 
Pé – dá suporte ao microscópio, garantindo a 
estabilidade. 
■ Braço – haste vertical ou inclinável fixada à 
base. 
■ Platina – plataforma na qual se colocam as 
preparações a serem observadas. Apresenta no 
centro, uma abertura por onde passam os raios 
luminosos. 
■ Revólver – suporte das objetivas, fixado à 
extremidade inferior do tubo, serve para facilitar 
a substituição de uma objetiva por outra, 
colocando-as por rotação em posição de 
observação. 
■ Canhão – suporte cilíndrico da ocular. 
■ Parafuso macrométrico ou dos grandes 
deslocamentos 
permite movimentos de grande amplitude e 
rápidos, por deslocamento vertical da platina. É 
indispensável para fazer as focagens. 
■ Parafuso micrométrico ou de focagem lenta (3) 
– permite movimentos lentos do deslocamento 
da platina para focagens mais precisas. 
PATRICAS LABORATORIAIS 
 
A Biossegurança é o conjunto de procedimentos, 
ações, técnicas, metodologias, equipamentos e 
dispositivos capazes de eliminar ou minimizar 
riscos inerentes às atividades de pesquisa, 
produção, ensino, desenvolvimento tecnológico 
e prestação de serviços, que podem 
comprometer a saúde do homem, dos animais, 
do meio ambiente ou a qualidade dos 
trabalhadores envolvidos. 
Regulamentada a Lei nº 8.974, de 5 de janeiro de 
1995, sobre as normas de biossegurança, pela 
Comissão Técnica Nacional de Biossegurança – 
CNTBio, o Brasil mostrou uma preocupação 
voltada aos laboratórios e sua segurança, pois 
além da grande exposição a agente químicos 
que recebemos no dia a dia contido na água, no 
ar e nos alimentos que são tratados com 
inseticidas e herbicidas, o trabalhador 
laboratorial recebe uma carga maior de agentes 
devido a exposição diária numa jornada de 
trabalho de 6 a 8 horas diárias. 
METODOS DE SEGURANÇA LABORATORIAL 
Os métodos de segurança que são utilizados 
durante a manipulação de materiais infecciosos 
dentro de laboratório, é descrito como 
“contenção”, tendo como objetivo principal a 
redução ou minimização de exposição a riscos 
dos profissionais que atuam no ambiente quanto 
aos que trabalham próximos, seja na bancada 
ou com o que faz a limpeza do local. 
Os profissionais de saúde estão sujeitos aos riscos: 
 • Químicos 
 • Físicos 
 • Biológicos 
RISCOS QUIMICOS 
Substâncias: 
 • CORROSIVAS : causam destruição de 
tecidos humanos. 
 • TÓXICAS: causam danos biológicos após 
sua inalação, ingestão ou contato com a 
pele. 
 • CANCERÍGENAS: causam tumores 
malignos. 
 • EXPLOSIVAS: substâncias reativas e 
instáveis que sofrem alterações químicas 
violentas (ex. hidrazinas). 
Não comer e nem beber. 
• Não guardar alimentos na área de 
trabalho. 
• Não armazenar comida e materiais 
biológicos no mesmo refrigerador. 
5. Usar protetor para os olhos. 
• As lentes de contatogelatinosas 
absorvem solventes e vapores. 
Usar luvas. 
• Sempre que existir um potencial contato 
direto com materiais infecciosos. 
• São recomendadas luvas descartáveis de 
látex ou vinil. 
• Devem ser imediatamente descartadas 
em recipiente próprio designado para lixo 
após serem removidas. 
BACTERIAS GRAM POSITIVAS E GRAM 
NEGATIVAS 
Quando coloridas por um corante adequado e 
levadas ao microscópio, pode-se diferenciar dois 
tipos distintos de bactérias: as chamadas Gram-
positivas e as Gram-negativas. Elas são assim 
chamadas porque foi o médico dinamarquês 
Hans Christian Joachim Gram, em 1884, quem 
elaborou o processo de colorir e descolorir as 
bactérias. Bactérias Gram-positivas são aquelas 
cujas paredes celulares não perdem a cor azul-
arroxeada quando submetidas a um processo de 
descoloração depois de terem sido coloridas 
pela violeta de genciana. As que assumem um 
tom róseo-avermelhado quando submetidas ao 
mesmo processo são ditas Gram-negativas. 
A TÉCNICA DE GRAM 
A bacéria gram positiva tem uma grande parede 
de peptídeoclicano, e logo abaixo uma 
membrana plasmática rica em lipídio e proteína. 
Já a bacterina gram negativa, possui primeiro 
uma membrana plasmática, logo abaico uma 
parede celular mais fina de peptideoglicano, e 
outra membrana plasmática. 
A técnica de Gram consiste em submeter 
esfregaços de pus ou outras secreções orgânicas 
contendo bactérias a agentes químicos 
específicos, os quais permitem diferenciar 
bactérias com diferentes estruturas de parede 
celular a partir das colorações que estas 
adquirem. O método submete uma amostra 
bacteriana à violeta de genciana, fixando-a, em 
seguida, pelo lugol. Todas as bactérias absorvem 
e fixam o corante e adquirem uma coloração 
violácea. Segue-se então um processo de 
descoloração pelo etanol-acetona. O solvente 
descolore as membranas externas de algumas 
bactérias (as Gram-negativas), e não descolore 
outras (as Gram-positivas). A retenção ou não do 
corante é dependente das propriedades físicas e 
químicas das paredes celulares bacterianas tais 
como espessura, densidade, porosidade e 
integridade e isso determina a sensibilidade delas 
às medicações. As bactérias Gram-positivas têm 
paredes simples e as Gram-negativas têm 
estrutura mais complexa. 
Quais são as vantagens de estabelecer a 
diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-
negativas? 
A técnica de coloração das bactérias ajuda a 
reconhecer as características de cada caso 
de infecção e determinar os tratamentos mais 
convenientes. Cerca de 90 a 95% das bactérias 
Gram-negativas são patogênicas e muitas Gram-
positivas são não patogênicas e algumas, 
inclusive, são úteis. As paredes mais complexas 
das bactérias Gram-negativas as tornam mais 
resistentes e dificultam que os antibióticos e 
outros medicamentos adentrem em seu interior. 
Além disso, as bactérias Gram-negativas 
geralmente são mais ameaçadoras do que as 
Gram-positivas por terem uma maior virulência e 
serem ou se tornarem mais facilmente resistentes 
aos antibióticos. A técnica de Gram tem também 
uma grande importância clínica porque permite 
que as bactérias associadas a infecções sejam 
prontamente caracterizadas como Gram-
positivas ou Gram-negativas, o que permite 
monitorar a infecção e adotar certas opções de 
tratamento, mesmo antes que seja feita uma 
cultura. 
Como agem patogenicamente as bactérias 
Gram-positivas e Gram-negativas? 
As bactérias agem patogenicamente por meio 
de toxinas. As toxinas das bactérias patogênicas 
são substâncias que causam danos aos tecidos 
animais. Elas são de dois 
tipos: endotoxinas e exotoxinas. Ambas alteram 
o metabolismonormal das células ou dos tecidos 
do hospedeiro, danificando-os. 
As endotoxinas são secretadas exclusivamente 
pelas bactérias Gram-negativas, geralmente 
estão ligadas à membrana externa da parede 
da célula, só sendo liberadas após destruição 
das mesmas. Quando ocorre o rompimento 
da célula bacteriana e liberação da toxina, há 
uma resposta do sistema imune que pode 
causar febre, dores, choques e vasodilatação. 
Em grandes quantidades, a toxina pode levar 
à septicemia e à morte. Já as exotoxinas podem 
ser produzidas tanto por bactérias Gram positivas, 
quanto por bactérias Gram negativas. 
 
 
Alguns exemplos de micro-organismos Gram-
positivos e Gram-negativos 
 Gram-positivos: Stafilococcus aureus, 
Lactobacillus spp, Streptococcus pyogenes, 
Streptococcus pneumoniae, Clostridium 
tetani e Enterococcus faecalis. 
 Gram-negativos: Pseudomonas aeruginosa, 
Haemophilus influenzae, Escherichia coli, 
Helicobacter pylori, Vibrio cholerae, 
Treponema pallidum, Salmonella, Shigella. 
COMO FAZER O PROCEDIMENTO? 
4) Preparo do esfregaço: 
a- Pegar uma lâmina limpa no recipiente, secar e 
flambar rapidamente na chama do 
bico de Bunsen; 
b- Identificar o lado da lâmina onde será feito o 
esfregaço; 
c- Flambar a alça bacteriológica deixá-la esfriar 
e colocar na lâmina uma gota 
de solução salina fisiológica; 
d- Flambar a agulha bacteriológica, deixar esfriar 
próximo a chama, abrir a placa com 
a cultura teste e tocar a colônia escolhida para 
retirada da amostra, 
e- Esfregar o material com movimentos de 
rotação da alça bacteriológica, para 
se obter um esfregaço de forma oval, bem fino e 
uniforme; 
f- Deixar secar nas proximidades da chama; 
g- Fixar o esfregaço passando a lâmina (lado 
oposto ao esfregaço) 5 vezes na chama 
do bico de Bunsen (rapidamente). 
5) MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM: 
1) Cobrir toda a lâmina com solução cristal 
violeta (corante roxo), aguardar um minuto; 
2) Lavar rapidamente em água destilada ou 
escorrer o corante; 
3) Cobrir a lâmina com solução de Iugol 
(mordente) por um minuto; 
4) Lavar em água destilada ou escorrer o lugol; 
5) Inclinar a lâmina e gotejar álcool-acetona ou 
álcool absoluto (cerca de 30 segundos). 
Lavar a lâmina rapidamente em água corrente 
ou escorrer o álcool; 
6) Cobrir com fucsina de gram e aguardar 30 
segundos; 
7) Lavar a lâmina em água destilada e secar 
(sem esfregar); 
8) Colocar uma gota de óleo de imersão sobre a 
lâmina e observar em objetiva de 
imersão (100X). 
RESULTADO: bactérias Gram-positivas: roxo
Bactérias Gram-negativas: rosa/vermelho. 
 
REPRODUÇÃO BACTERIANA 
 Assexuada 
a) Cissiparidade ou bipartição ou divisão 
binária. 
A reprodução mais comum nas bactérias é 
assexuada por bipartição ou cissiparidade. 
Ocorre a duplicação do DNA bacteriano e uma 
posterior divisão em duas células. As bactérias 
multiplicam-se por este processo muito 
rapidamente quando dispõem de condições 
favoráveis (duplica em 20 minutos). 
A separação dos cromossomos irmãos conta 
com a participação dos mesossomos, pregas 
internas da membrana plasmática nas quais 
existem também as enzimas participantes da 
maior parte da respiração celular. 
 
Ex.: Escherichia coli 
 
b) ESPORULAÇÃO: (Resistência 
assexuada) dormência. 
 
Ex.: Clostridium Botulinum 
 SEXUADA 
Para as bactérias, considera-se reprodução 
sexuada qualquer processo de transferência de 
fragmentos de DNA de uma célula para outra. 
Depois de transferido, o DNA da bactéria 
doadora se recombina com o da receptora, 
produzindo cromossomos com novas misturas de 
genes. Esses cromossomos recombinados serão 
transmitidos às células-filhas quando a bactéria se 
dividir. 
A transferência de DNA de uma bactéria para 
outra pode ocorrer de três maneiras: por 
 transformação, transdução e por conjugação.
TransformaçãoNa transformação, a bactéria absorve moléculas 
de DNA dispersas no meio e são incorporados à 
cromatina. Esse DNA pode ser proveniente, por 
exemplo, de bactérias mortas. Esse processo 
ocorre espontaneamente na natureza. Acabo 
me transformando em outra bactéria. 
 
Transdução 
Na transdução, moléculas de DNA são 
transferidas de uma bactéria a outra usando vírus 
como vetores (bactériófagos). Estes, ao se 
montar dentro das bactérias, podem 
eventualmente incluir pedaços de DNA da 
bactéria que lhes serviu de hospedeira. Ao 
infectar outra bactéria, o vírus que leva o DNA 
bacteriano o transfere junto com o seu. Se a 
bactéria sobreviver à infecção viral, pode passar 
a incluir os genes de outra bactéria em seu 
genoma. 
 
Conjugação 
Na conjugação bacteriana, pedaços de DNA 
passam diretamente de uma bactéria doadora, 
o "macho", para uma receptora, a "fêmea". Isso 
acontece através de microscópicos tubos 
protéicos, chamados pili, que as bactérias 
"macho" possuem em sua superfície. 
O fragmento de DNA transferido se recombina 
com o cromossomo da bactéria "fêmea", 
produzindo novas misturas genéticas, que serão 
transmitidas às células-filhas na próxima divisão 
celular. 
 
MEIOS DE CULTURA 
A IMPORTÂNCIA DOS MEIOS DE CULTURA - O QUE 
É E PRA QUE SERVE? 
Os meios de cultura são um preparado químico 
formulado com os nutrientes fundamentais para 
que microrganismos se multipliquem. Dessa 
forma, é possível identificar, analisar e pesquisar o 
resultado dessa mutiplicação celular. 
O meio de cultura é composto principalmente 
por fontes de carbono e energia (açúcares), 
fósforo, sais minerais, nitrogênio. 
Para testes de organismos específicos, muitos 
outros componentes são utilizados para fabricar 
um meio de cultura, este é o chamado meio 
seletivo, onde conseguimos nutrir o crescimento 
dos micro-organismos que serão objetos de 
investigação. 
O crescimento dos microrganismos nos diferentes 
tipos de meios de cultura, fornece as primeiras 
informações para a sua identificação. É 
importante conhecer o potencial de crescimento 
de cada meio de cultura e adequar ao perfil 
bacteriano esperado para cada material. 
ÁGAR NUTRIENTE 
Simples, de fácil preparo e barato, é utilizado na 
análise de água, alimentos e leite como meio 
para cultivo de amostras submetidas a exames 
bacteriológicos e isolamento de organismos para 
culturas puras. 
 
ÁGAR MACCONKEY 
Destinado para o crescimento de bactérias Gram 
negativas e indica a fermentação de lactose. 
Colônias de bactérias que fermentam lactose 
tornam o meio rosa choque e as bactérias que 
não são fermentadoras de lactose tornam o meio 
amarelo claro. 
 
ÁGAR SANGUE 
De coloração vermelha escura e opaca, oferece 
excelentes condições de crescimento para a 
maioria dos microrganismos. 
 
ÁGAR SALMONELLA-SHIGELLA 
Possui componentes que inibem microrganismos 
gram positivos. Permite selecionar e isolar 
espécies de Salmonella e Shigella em amostras 
de fezes, alimentos e água. 
 
ÁGAR CHOCOLATE 
Utilizado para o cultivo de microrganismos 
exigentes, embora cresçam neste meio quase 
todos os tipos de microrganismos. À base do 
meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro 
ou coelho em temperatura alta, o que faz com 
que as hemácias lisem, liberando hemina e 
hematina, compostos fundamentais para o 
crescimento dos microrganismos exigentes.