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Aula 1
Introdução a
Microbiologia
Prof. Fabrício Campos
Março 2016
Universidade de Brasília
Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária
Disciplina de Microbiologia Veterinária - Código: 161837
1
2
Fonte: http://www.google.com/imghp
Nós comemos e
respiramos
microrganismos
3
Fonte: http://www.google.com/imghp
4
Fonte: http://www.google.com/imghp
Fonte: Suttle, 2005
Biomassa Abundância
Procariotos
Protistas
Vírus
• Demonstrar a importância dos
microrganismos para vida
Diversidade
Efeitos benéficos
Como patógenos
Objetivo da aula
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• Definição
• Classificação dos seres vivos
• Histórico da microbiologia
• Tipos de microscópios
• Níveis de Biossegurança
Escopo da aula
6
Definição
7
• Microrganismos: formas de vida diminuta
individualmente muito pequenas para serem
vistas a olho nu
• Bactérias, fungos (leveduras e fungos
filamentosos), protozoários, algas
microscópicas e vírus
Definição
Bactérias Fungos
Algas Vírus
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Seres unicelulares com
capacidade de replicação,
exceto os vírus que são
parasitas intracelulares
obrigatórios e utilizam a
maquinaria celular para
replicação.
Conceitos
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• Microbioma: conjunto de microrganismo
presentes em determinado habitat
• Bacterioma: conjunto de bactérias
presentes em determinado habitat
• Viroma: conjunto de vírus presentes em
determinado organismo
• Não se utiliza mais: flora, micróbio, germe
Viroma
Fonte: Wylie et al., 2012
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• Definição
• Classificação dos seres vivos
• Histórico da microbiologia
• Tipos de microscópios
• Níveis de Biossegurança
Escopo da aula
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Classificação dos seres vivos
• Reino Animalia
• Reino Plantae
• Haeckel (1884)
Reino Protista
Reino Plantae
Reino Animalia
• Copeland (1956)
Reino Mychota (procariontes)
Reino Protista
Reino Plantae
Reino Animalia
• Wittaker (1969)
Reino Monera (procariontes)
Reino Protista
Reino Plantae
Reino Animalia
Reino Fungi
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Antes que a existência dos
micróbios fosse conhecida, todos
os organismos eram agrupados no
reino animal ou no reino vegetal.
Quando organismos microscópicos
com características de animais e
vegetais foram descobertos no final
do século XVII, um novo sistema de
classificação se tornou necessário
Fonte: http://simbiotica.org/reinos.htm
• Margulis (1988)
-Prokarya
Bacteria
-Eukaria
Proctotista (protozoários/algas)
Fungi
Plantae
Animalia
• Woese (1990)
Domínio Bacteria
Domínio Archea
Domínio Eukarya
• Mayr (1990)
Domínio Prokariota
Subdomínio Eubacteria
Subdomínio Archea
Domínio Eukarya
Reino Plantae
Reino Fungi
Reino Animalia
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Classificação dos seres vivos
Três domínios:
1. Bacteria (as paredes celulares contêm peptideoglicano)
2. Archaea (as paredes celulares não possuem peptideoglicano)
3. Eukarya:
• Protista (fungos gelatinosos, protozoários e algas)
• Fungi (leveduras, bolores multicelulares e cogumelos)
• Plantae (musgos, samambaias, coníferas e plantas)
• Animalia (esponjas, vermes, insetos e vertebrados)
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Classificação atual dos seres vivos
A árvore da vida
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• Onde estão vírus?
• Por que eles “não fazem” parte da árvore da
vida?
Fonte: Flint et al., 2015
Impacto dos microrganismos sobre
o ambiente
• Como agente de doenças
• Microrganismos e agricultura
• Microrganismos e indústria de
alimentos
• Microrganismos e produção de
energia
• Microrganismos e biotecnologia
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17
Fonte: Shutte, 2005
Vírus: catalisador do ciclo de carbono
Desmatamento Queima comb. fóssil
Processos biológicos
e químicos
Atmosfera
Combustível fóssil
Plâncton
Termoclima
Plâncton infectado
por vírus
Lise do plâncton
por vírus
Células não infectadas
e detritos
Oceano
1 Gt: 1 bilhão de tonelada
32 Gt/ano
Se não tivesse a lise das
células a eficiência da
fotossíntese seria menor,
pois teria menos CO2 dis-
ponível.
Vírus contribuem para a diminuição
do aquecimento global
18
Fonte: www.greenclick.com.br
Humanos e animais dependem dos
microrganismos em seus intestinos
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Fonte: Tortora, 2012
• Definição
• Classificação dos seres vivos
• Histórico da microbiologia
• Tipos de microscópios
• Níveis de Biossegurança
Escopo da aula
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• SÉCULO 10 AC: VARÍOLA (CHINA)
• HOLANDÊS VOADOR: FEBRE AMARELA
• RAIVA: DESDE OS TEMPOS DOS FARAÓS
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Histórico da Microbiologia
Ramsés V - provavelmente morreu de varíola ou sarampo
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Histórico da Microbiologia
• 1546 - Girolamo Fracastoro:
Propôs que as doenças infecciosas
fossem causadas por minúsculas
partículas transferíveis, ou "esporos", que
poderiam transmitir as infecções por
contato direto ou indireto, ou mesmo sem
contatos, através de longas distâncias.
Em sua obra, os "esporos" das doenças
poderiam se referir a produtos químicos e
não a entidades vivas.
O nome da Sífilis foi tirado do poema
épico escrito em 1530 por Fracastoro:
“Syphilis sive morbus gallicus” ("Sífilis ou
a Doença Francesa").
Treponema pallidum Image
provided by Joyce Ayers.
Courtesy of the Centers for
Disease Control and Prevention
DOC KAISER'S WEB Page
23
• 1684 - Antoni van Leeuwenhoek:
Construção de lentes /
microscópios e descoberta dos
microrganismos.
24
Histórico da Microbiologia
• 1798 - Edward Jenner:
Vacina contra varíola - Cowpox
Fonte: web.educastur.princast.es Edward Jenner
The entire book of Cow Pox (1798) is
available Digitalized by Mary Parker.
25
Histórico da Microbiologia
Varíola humana: erradicada em 1980
26
27
28
“Em 14/05/1796, usando material com cowpox da
mão da ordenhadeira Sarah Nelmes, Edward
Jenner inoculou James Phipps, um menino de 8
anos de idade. O menino contraiu cowpox e
recuperou-se rapidamente. No dia 1o de Julho, o
menino foi inoculado com Varíola, e não
desenvolveu a doença.....”
29
Edward Jenner
30
Edward Jenner
Pai da
vacinação
(1798)
31
Cartoons sobre a vacinação
32
• 1847 - Semmelweiss:
Introduz técnicas de
higiene em hospital
de Viena
33
Histórico da Microbiologia
• 1857 - Louis Pasteur:
Microbiologia da
fermentação de ácidos
láticos (bact anaeróbicas)
• 1860 - Louis Pasteur:
Fermentação alcoólica das
leveduras
34
Histórico da Microbiologia
• 1864 - Louis Pasteur: Controvérsia da geração
espontânea
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Histórico da Microbiologia
Fonte: Tortora, 2012
Vírus da raiva
Luis Pasteur (1885):
desenvolve a vacina contra a raiva
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Histórico da Microbiologia
Louis Pasteur
A primeira vacina contra a raiva:
Suspensões de medulas de
coelhos (gradualmente menos
dessecadas a 37°C) inoculadas
após a exposição (mordedura)
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A primeira vacina contra o Bacillus
anthracis (carbúnculo)
Desmente a teoria da geração
espontânea
38
• 1867 - Robert Lister:
Assepsia em cirurgia
Operation using Lister's carbolic spray invented in 1869.
Fonte: web.ukonline.co.uk
39
Histórico da Microbiologia
• 1881 - Robert Koch:
Estudo de bactérias em cultura pura
• 1882 - Robert Koch:Descoberta da tuberculose
• 1884 - Robert Koch:
Postulados de Koch e descoberta da
causa da cólera (Vibrio cholerea)
• 1884 - Christian Gram:
Métodos de coloração de Gram
• 1889 - Martinus Beijerinck:
Conceito de vírus
Bacteriologist Robert Koch
Fonte: general-anaesthesia.com
In the late 1800's, Danish
bacteriologist, Christian Gram,
Fonte: sites.google.com 40
Histórico da Microbiologia
• 1892 - Dimitri Ivanowsky:
Vírus do mosaico do tabaco
• 1905 – Calmette & Guerin
Vacina BCG
• 1918 - Alice C. Evans
“Bacillus abortus” causando
Brucelose em animais e humanos -
pasteurização do leite
• 1929 - Alexander Fleming
Descoberta da Penicilina
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Histórico da Microbiologia
• 1944 - Selman Waskman:
Estreptomicina
• 1946 - Mary (Polly) Bunting:
Genética em Serratia marcescens
• 1949 - Brown, R. & Házen, E.:
Nistatina (antifúngico)
• 1950 - Rosalind Franklin –
Difração de Raios X para o
estudo do DNA - primeira imagem
do próprio.
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Histórico da Microbiologia
This portrait of Franklin was taken during
her second visit to the United States.
(Fonte: National Library of Medicine NIH)
• Em 1947 começou a trabalhar como poliovírus, descobrindo 3 tipos distintos
• Vacina deveria incluir os 3 tipos para ser eficaz
• Problema 1: produzir vírus suficiente para preparar a vacina
• Em 1948: Enders, J.F.; Weller, T.H., Robbins, F.C. multiplicaram o vírus em
pedaços de tecidos
• Problema 2: bactérias contaminavam os tecidos (usaram a penicilina)
Jonas Salk e a vacina contra a poliomielite (1952)
Fonte: http://www.pbs.org/wgbh/aso/databank/entries/dm52sa.html
• A partir daí vírus como o do sarampo e
da polio puderam ser multiplicados em
grandes quantidades
• Esta equipe ganhou o Prêmio Nobel de
1954 de fisiologia/medicina
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Poliomielite: a ser declarada erradicada pela OMS
• 1953 - Watson e Crick:
Estrutura do DNA
• 1959 - Rodney Porter:
Imunoglobulina
• 1977 - Frederick Sanger:
Sequenciamento
• 1983 - Luc Montagnier
Descoberta do HIV (AIDS)
• 1997 – Tsien et al.
NGS
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Histórico da Microbiologia
“Next generation sequencing”
ou NGS
• Sequenciamento em altíssima escala
• Gera milhões de sequências em uma única
corrida
• Utiliza técnicas como biologia molecular,
genômica e bioinformática
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Fragmentação do genoma
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Custo por megabase
Fonte: http://www.genome.gov/images/content/costpermegabase_apr2015.jpg
48
Paleomicrobiologia
Vilnus: Armada de Napoleão morreu de
Tifo: Rickettsia prowazekii
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Conceito: estuda fósseis antigos visando detectar vestígios da infecção por
microrganismos
Fonte: Ribas Turon et al., 2013.
Postulados de Koch
1. O microrganismo deve estar presente em animais
doentes e ausentes nos saudáveis
2. O microrganismo deve ser cultivado em cultura
pura originada do corpo do animal
3. Essa cultura quando inoculada em animais
susceptíveis deve reproduzir a doença
4. O microrganismo deve ser re-isolado desses
inoculados e novamente cultivados
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• Definição
• Classificação dos seres vivos
• Histórico da microbiologia
• Tipos de microscópios
• Níveis de Biossegurança
Escopo da aula
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52
Tipos de Microscópio
• Possuia somente uma lente
• Silimar a uma lupa
• Melhor polidor de lentes no mundo em sua época
• Suas lentes eram polidas com tal precisão que podia
ampliar em até 300 vezes
Leeuwenhoek, ~1600
Tipos de Microscópio
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Fonte: http://lensonleeuwenhoek.net/content/galileos-microscope
Microscópio de
Galileu 1624:
3 lentes biconvexas
com aumento final de
30X
Examinava insetos
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Tipos de Microscópio
55
Tipos de Microscópio
Adenovírus em células 293A
Fonte: Knak et al., in prep
Efeito citopático (ECP)
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Resultado positivo
Resultado negativo
IPX
57
58
Tipos de Microscópio
Imunofluorescência direta
Fonte: http://www.utmb.edu/virusimages/
Cérebro de raposa positivo para o vírus da raiva (CDC, 1958)
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Epi-fluorescência
Fonte: http://www.sebbm.es/web/images/images_tinymce/figura_doloresmorales.jpg
60
61
Tipos de Microscópio
Microscopia
confocal
Fonte: http://revistapesquisa.fapesp.br/wp-content/uploads/2013/12/Xilela_63x-9_black-final.jpg e http://i875.photobucket.com/albums/ab318/Juanfra1957/IMAGENES%20ARTICULO%20FILTRACION/tres_zps42aba3e0.jpg
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Contraste de
fase
Microscópio eletrônico
de varredura
Microscópio eletrônico
de transmissão
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Tipos de Microscópio
• Aumento útil de até 1 milhão de vezes da amostra
• Possível a visualização de moléculas orgânicas como o
DNA, RNA e algumas proteínas
Microscopia eletrônica
Vírus da poliometilte (30 nm)
Fonte: http://deolhomicro.blogspot.com.br/2012/10/omicroscopio-eletronico-de-transmissao.html
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• Definição
• Classificação dos seres vivos
• Histórico da microbiologia
• Tipos de microscópios
• Níveis de Biossegurança
Escopo da aula
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Laboratórios e Níveis de Segurança
66
NB1
67 Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB1.jpg/104545763/616x412/NB1.jpg
68
Laboratórios e Níveis de Segurança
NB2
69 Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB2.jpg/104546259/495x330/NB2.jpg
70
Laboratórios e Níveis de Segurança
NB3
71 Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB3.jpg/104546409/NB3.jpg
72
NB4
Vírus Ebola
73
Fonte: WHO
In this Oct. 2007 photo provided by the Hamburg University hospital
(UKE) on March 17, 2009 a quarantine unit at the hospital is shown
during a disaster control exercise
74
Laboratórios e Níveis de Segurança
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Laboratórios e Níveis de Segurança
Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
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Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
78
Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
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Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
80
Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
81
Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+
Mensagens principais
• Microrganismos são seres unicelulares com
capacidade de replicação, exceto os vírus
• A maioria dos microrganismos são benéficos
• Microrganismos patogênicos: causam danos a
animais e humanos
• Quais são os 3 domínios na classificação dos
seres vivos:
– Eukarya, Bacteria, Archaea
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Mensagens principais
• Cite uma contribuição de Pauster a
Microbiologia
• Quem foi Edward Jenner?
• Quais são os postulados de Koch?
• Que revolução causou a invenção do
microscópio?
• Qual a importância da biossegurança nos
laboratórios
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Sugestões de leitura
84
Fonte: http://www.google.com/imghp
85
• Livros:
– FLINT, J., RACANIELLO, V.R., RALL, G.F., SKALKA, A.M., ENQUIST, L.W. Principles of
Virology, 4th Edition (2 Volume Set) ASM Press, 2015, 1.060 p.
– MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J.M.; PARKER, J. 2004. Microbiologia de Brook, 10a ed. São
Paulo, Brasil: Prentice Hall, 608p.
– TORTORA, G.J. FUNKE, B.R., CASE.C.L. Microbiologia, 10ºed. 2012.
• Artigos:
– SUTTLE, C.A. 2005. Viruses in the sea. Nature 437:356-361.
– RIBAS TURON C., CHIMENOS KÜSTNER E., ADSERIAS GARRIGA M.J., HOSPITAL
RIBAS A. 2013. Paleomicrobiología: Revisión Bibliográfica. Actas del XI Congreso Nacional de
Paleopatología, ISBN: 978-84-940187-5-6. p 635-650.
– WYLIE, K.M.; WEINSTOCK, G.M.; STORCH, G.A. 2012.Emerging view of the human
virome. Translational Research, 160:283–290.
• Sites:
– Virology blog (http://www.virology.ws/).
– WHO - World Health Organization (http://www.who.int/ en/).
– Wikipédia (https://pt.wikipedia.org/)
Sugestões de leitura
camposvet@unb.br
Grato pela atenção!!!
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