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Biotecnologia geral TER 00101 Prof. Natalia Ribeiro Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes • Microrganismos – organização celular simples (unicelulares e multicelulares)(unicelulares e multicelulares) • Papel importante na reciclagem de nutrientes no ambiente � processos biológicos de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes - Procariotos = região nuclear não é envolvida por membrana e consiste de DNA na forma depor membrana e consiste de DNA na forma de uma molécula circular (cromossomo). Muitos podem conter em seu interior moléculas menores de DNA, na forma circular, denominadas de plasmídeos. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes - Eucariotos = núcleo envolto por uma membrana. As moléculas de DNA se agregam com proteínas formando cromossomos.com proteínas formando cromossomos. Contém outras estruturas (organelas) envolvidas por membranas como as mitocôndrias e cloroplastos (fotossintetizantes). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes - Microrganismos atualmente classificados em três domínios: Bacteria (bactérias – células procarióticas), Archaea (anaeróbios, muitosprocarióticas), Archaea (anaeróbios, muitos deles extremófilos - células procarióticas) e Eukarya (microalgas, fungos e protozoários – células eucarióticas). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bactérias - Christian Gram: bactérias gram positivas (parede celular simples, constituída de(parede celular simples, constituída de camada de peptideoglicano), e bactérias gram negativas (parede com estrutura mais complexa constituída de camada de peptideoglicano e uma membrana externa, que contém polissacarídeos) Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Arqueas - Microrganismos extremófilos (halófilos extremos, hipertermófilos), bem como metanogênicos (fundamentais para tratamento que segue a via hipertermófilos), bem como metanogênicos (fundamentais para tratamento que segue a via anaeróbia). Parede celular constituída de polissacarídeos, glicoproteínas, proteínas, pseudopeptideoglicanos. A síntese proteica é mais semelhante à dos eucariotos. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Arqueas - Microrganismos extremófilos (halófilos extremos, hipertermófilos)extremos, hipertermófilos) Parque Nacional de Yellowstone - USA Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Algas (Eucariotos) - Eucariotos fototróficos, que formam colônias ou arranjos lineares (filamentosos). Algumas produzem toxinas. Lançamento excessivo deproduzem toxinas. Lançamento excessivo de nutrientes e poluentes provoca o desequilíbrio dos ecossistemas e o crescimento preferencial de certos tipos de algas (“marés vermelhas”, “bloom de algas”). Nos sistemas de tratamento naturais (lagoas aeróbias, estabilização) as algas fornecem oxigênio para as bactérias degradadoras. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Fungos (Eucariotos) - Apresentam com morfologia distinta. Fungos filamentosos crescem formando miscélios (hifas) e tem notável participação nos processos dee tem notável participação nos processos de reciclagem de nutrientes e na biodegradação de compostos orgânicos em ambientes naturais, especialmente nos solos. Leveduras se apresentam como células individuais, não formando filamentos ou micélios. Papel pequeno nos processos biológicos de tratamento de efluentes (mais importante para indústria). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Fungos (Eucariotos) - Apresentam com morfologia distinta. Fungos filamentosos crescem formando miscélios (hifas) e tem notável participação nos processos dee tem notável participação nos processos de reciclagem de nutrientes e na biodegradação de compostos orgânicos em ambientes naturais, especialmente nos solos. Leveduras se apresentam como células individuais, não formando filamentos ou micélios. Papel pequeno nos processos biológicos de tratamento de efluentes (mais importante para indústria). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Protozoários (Eucariotos) - Organismos unicelulares que não possuem parede celular, e nutrem-se de outros organismos e de material orgânico particulado. Presentes emmaterial orgânico particulado. Presentes em comunidades microbianas típicas de processos aeróbios de tratamento de efluentes (amebas, flagelados e ciliados). Nos processos de tratamento biológico de efluentes como de lodos ativados, os protozoários predadores de bactérias, têm importante papel para o desempenho do processo. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Rotíferos (Eucariotos) - Nos processos de tratamento biológico de efluentes atuam na remoção de bactérias livres em suspensão (não floculadas). Contribuem para formação dos flocos microbianos.microbianos. Nematódeos e anelídeos (Eucariotos) - Aparecem com alguma frequência em sistemas biológicos de tratamento de efluentes, mas não desempenham papel relevante no processo de tratamento de efluentes. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Principais interações nas comunidades microbianas - Diversidade microbiana – fator de sucesso no tratamento biológico de efluentes. -Os poluentes contém inúmeras substâncias em-Os poluentes contém inúmeras substâncias em variados níveis de concentração - Os organismos estabelecem relações entre grupos de modo a assegurar a sua sobrevivência em ambientes abertos e de grande competição Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Principais interações nas comunidades microbianas - Simbiose: relação entre duas espécies que pode ser benéfica para ambas (mutualismo – lagoas facultativas) ou benéficas para uma e sem efeito para outraou benéficas para uma e sem efeito para outra (comensalismo – Nitrosomonas e Nitrobacter). - Parasitismo: um organismo vive no interior ou em conjunto com outro, denominado hospedeiro, havendo benefício apenas para uma das espécies. - Neutralismo: ocorre quando a presença de uma espécie não afeta a outra. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Principais interações nas comunidades microbianas - Predação: é uma forma muito comum nos sistemas de tratamento aeróbio, e neste caso uma espécie se nutre da outra. Protozoários e metazoários desempenhamda outra. Protozoários e metazoários desempenham esse papel. - Sintrofia: duas ou mais espécies cooperam para operar uma transformação que nenhuma delas isoladamente poderia realizar. Presentes nos sistemas de tratamento anaeróbios. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Morfologia e características dos aglomerados microbianos Nos sistemas abertos e relativamente pobres em nutrientes, muitas linhagens bacterianas produzemnutrientes, muitas linhagens bacterianas produzem cápsulas de material polissacarídeo na superfície externa das células. A excreção dessas substâncias parece ser uma estratégia de sobrevivência em ambientes adversos, pois confere a esses organismos a capacidade de adesão e aglomeração (EPS – substâncias poliméricas extracelulares) Microrganismos de importância para os sistemas detratamento de efluentes Morfologia e características dos aglomerados microbianos Sistemas aeróbios: flocos e biofilmes -Esses sistemas se caracterizam por bactérias que-Esses sistemas se caracterizam por bactérias que excretam grande quantidade de substâncias de alta massa molar, que formam matrizes hidratadas. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Morfologia e características dos aglomerados microbianos Sistemas anaeróbios: flocos, biofilme e grânulos - Como as velocidades de crescimento os- Como as velocidades de crescimento os microrganismos anaeróbios são, em geral, menores do que os sistemas aeróbios, o processo de formação dessas estruturas é mais lento. Assim, os flocos não adquirem mesmas dimensões, e sua separação da fase líquida é dificultada (produção de gás). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Morfologia e características dos aglomerados microbianos Sistemas anaeróbios: flocos, biofilme e grânulos - Uma possível causa da granulação é o estresse- Uma possível causa da granulação é o estresse hidrodinâmico imposto à comunidade microbiana em ambiente anaeróbio. Presença de microrganismos filamentosos, constituindo uma entretela (alta capacidade de retenção de microrganismos e outras partículas)para enovelamento. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Principais interações nas comunidades microbianas - Diversidade microbiana – fator de sucesso no tratamento biológico de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos - Os poluentes são primeiramente adsorvidos nas superfícies dos aglomerados microbianos. Essasuperfícies dos aglomerados microbianos. Essa remoção é de natureza físico-química. A seguir dependendo das características da molécula poluente, ela poderá sofrer hidrólise ou outras transformações catalisadas por enzimas excretadas pelos microrganismos e que se encontram na matriz constituinte dos aglomerados microbianos Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos - Somente quando as moléculas sofreram as transformações pertinentes é que elas podem, játransformações pertinentes é que elas podem, já modificadas, ser absorvidas pelas células. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Absorção dos poluentes nos flocos e ou biofilmes Transformação de poluentes catalisadas por enzimas extracelulares Transporte de substratos (transporte para o interior das células) Absorção dos substratos (transporte para o interior da célula) Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos - Somente quando as moléculas sofreram as transformações pertinentes é que elas podem, játransformações pertinentes é que elas podem, já modificadas, ser absorvidas pelas células. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos - Degradação aeróbia = respiração aeróbia, no qual moléculas de substrato (poluentes biodegradáveismoléculas de substrato (poluentes biodegradáveis absorvidos pelas células) são oxidados a CO2, utilizando no sistema de transporte de elétrons, o oxigênio como receptor ou aceptor final. Neste tipo de metabolismo as moléculas do substrato podem ser oxidadas completamente a CO2 e um maior rendimento em ATP pode ser obtido, o que permite disponibilizar energia para a multiplicação celular. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos - Degradação anaeróbia = mais complexa, pois no processo de biodegradação estão envolvidos diferentes gruposde biodegradação estão envolvidos diferentes grupos microbianos. As substâncias orgânicas são transformadas por via fermentativa, gerando produtos ácidos, que são posteriormente transformados em substâncias orgânicas com um ou dois átomos de carbono com geração de hidrogênio. A mais significativa etapa de biodegradação é quando esses compostos são transformados em metano e CO2 (etapa metanogênica). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Processo de remoção e degradação de poluentes orgânicos -Degradação anaeróbia = A etapa metanogênica é conduzida por um grupo específico de microrganismos, asconduzida por um grupo específico de microrganismos, as arqueas hidrogenotróficas e acetotróficas, que utilizam o CO2 como aceptor de elétrons e realizam a respiração anaeróbia. Por conta da menor diferença potencial disponível nas reações metabólicas, a energia disponível para o crescimento microbiano é significativamente menor do que aquela do metabolismo aeróbio. Por isso a taxe de crescimento microbiano é menor (disposição final). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo Rotas empregadas pelos microrganismos para obtenção de energia e para transformar substratos absorvidos. Os processos de tratamento de efluentes (participaçãoprocessos de tratamento de efluentes (participação preponderante de procariotos) diferem dos bioprocessos conduzidos por culturas puras. Os organismos que empregam substâncias químicas orgânicas como doadoras de elétrons no metabolismo energético são denominadas de quimiorganotróficos e os dois mecanismos para conservação de energia são a fermentação e a respiração. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes � Fontes de Energia: De acordo com a forma pela qual os microrganismos assimilam energia, eles podem ser classificados em: -Fototróficos: possuem pigmentos fotossintéticos que permitem a utilização da luz como fonte de energia. Ex.: algas e bactériasa utilização da luz como fonte de energia. Ex.: algas e bactérias fotossintetisantes. - Quimiolitotróficos: obtêm energia a partir da oxidação de um substrato inorgânico, geralmente específico para o microrganismo em particular, como hidrogênio, enxofre, amônia, nitritos e sais ferrosos. Ex.: bactérias dos gêneros Thiobacillus, Nitrosomonas, Nitrobacter, Hydrogenomonas e Desulphovibrio. � Fontes de Energia: - Quimiorganotróficos: obtêm energia a partir do catabolismo de substratos orgânicos, açúcares em particular. A este grupo pertence a grande maioria dos microrganismos utilizados industrialmente (Madigan et al., 2000). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes industrialmente (Madigan et al., 2000). Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Respiração aeróbia = as moléculas de substrato são oxidadas a CO2, tendo-se o oxigênio molecular como aceptor final de elétrons (ATP para crescimento). Noaceptor final de elétrons (ATP para crescimento). No caso dos sistemas de tratamento de efluentes por processos aeróbios a transformação do carbono (poluentes) em CO2 e novas células é realizada por bactérias, que são organismos majoritariamente presentes nas comunidades microbianas destes sistemas. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Respiração aeróbia = cianetos, monóxido de carbono, sulfeto de hidrogênio e azida de sódio (efluentes industriais) são inibidores pois bloqueiam o fluxo deindustriais) são inibidores pois bloqueiam o fluxo de elétronse consequentemente a síntese de ATP. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Fermentação = processo de oxirredução na ausência qualquer aceptor final de elétrons suprido ao meio. O substrato orgânico atua como doador e o produto dasubstrato orgânico atua como doador e o produto da fermentação é o receptor final. Nas comunidades microbianas dos sistemas de tratamento há um expressivo número de bactérias fermentativas . Tem papel importante nos processos anaeróbios. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Respiração anaeróbia = modo alternativo de obtenção de energia que emprega outros receptores de elétrons que não o oxigênio. Os receptores podem ser nitrato, íonnão o oxigênio. Os receptores podem ser nitrato, íon férrico, sulfato, carbonato, e até compostos orgânicos, entretanto, menor quantidade de energia é disponibilizada para as células. Nos consórcios anaeróbios as arqueas metanogênicas utilizam o CO2 como aceptor de elétrons. Ocorre também no processo de desnitrificação (bactérias heterotróficas aeróbias facultativas) Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Quimiolitotrofia = uso de substâncias químicas (sulfeto de hidrogênio, hidrogênio gasoso, amônia) inorgânicas para obtenção de energia. Envolveinorgânicas para obtenção de energia. Envolve respiração aeróbia, porém empregando fonte inorgânica. A nitrificação, de grande relevância para o tratamento de efluentes é conduzido por bactérias autotróficas que obtêm energia da amônia e empregam fonte inorgânica de carbono para síntese celular. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Energia e metabolismo - Metabolismo fototrófico = utilizam a luz como fonte de energia, que geram força próton motiva para síntese de ATP. Importante para sistemas de tratamento dede ATP. Importante para sistemas de tratamento de efluentes como lagoas aeróbias, as cianobactérias e as microalgas exibem essa forma de metabolismo. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico - As enzimas são proteínas globulares que catalizam as reações bioquímicas. A maioria das reações bioquímicas ocorrem através da atuação de enzimasbioquímicas ocorrem através da atuação de enzimas que agem especificamente sobre determinados substratos � catalisadores dos processos biológicos (velocidade de reação). - Fatores que afetam: temperatura, pH, cofatores, inibidores. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico - Classificação (tipo): a) Endoenzimas = atuam no interior das células degradando compostos orgânicos solúveis e gerando energia.compostos orgânicos solúveis e gerando energia. b) Exoenzimas = atuam fora da célula transformando a matéria particulada complexa em solúveis, através da hidrólise, permitindo a assimilação. Endoenzima Exoenzima Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico Exoenzimas Proteínas AminoácidosProteínas Carboidratos Lipídeos Aminoácidos Açúcares solúveis Ácidos graxos Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico - Classificação (atuação): a) Hidrolases = reações de hidrólise. b) Oxiredutases = reações de oxi-redução Principais na decomposição da matéria orgânica b) Oxiredutases = reações de oxi-redução c) Transferases = transferência de grupamentos funcionais com grupo amina d) Liases = remoção de moléculas de água, CO2, e amônia e) Isomerases = isomeração – ligações cis e trans f) Ligases = síntese de novos produtos produzindo energia Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico - Hidrólise enzimática = reação bioquímica catalisada por enzimas que consiste na quebra da molécula pela água. Durante o início do processo de tratamento biológico de águaso início do processo de tratamento biológico de águas residuárias, a fase de aclimatação consiste na elaboração pelas microrganismos das enzimas que atuam especificamente sobre determinados substratos. Microrganismos de importância para os sistemas de tratamento de efluentes Bioquímica do tratamento biológico Mecanismo “chave-fechadura” Obrigada!
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