Biologia Molecular aula2

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P R O F ª . M S C . A N A N D A G A L V Ã O
A U L A 2 – R E P L I C A Ç Ã O D O D N A
C I Ê N C I A S B I O L Ó G I C A S
U N I C R U Z – 2 0 1 0 / 2
Biologia Molecular e 
Biotecnologia
Replicação
 Duplicação do material genético para a divisão celular
 Replicação é semiconservativa
 Uma fita parental e uma nova fita sintetizada
 Forquilha de replicação
 Helicases - Separação das duplas fitas
 Proteínas protegem DNA de fita simples e evitam reaproximação
 Primase – síntese de iniciador
 Topoisomerase
 Desenrolam supertorção
 Ligases – união dos fragmentos de Okasaki
 DNA polimerases
 α - associação com primase para formação do iniciador
 δ - polimerização das fitas líder e lenta
 γ - polimerização DNA mitocondrial
 β, ε, κ, ε, δ, ι - polimerases de reparo
Para que serve a Replicação???
 Sendo suporte de informação genética, o
DNA necessita de se auto-reproduzir,
fazendo cópias dessa informação de modo a
transmiti-la de geração em geração.
Como ocorre a Replicação???
 Haviam a princípio, 3 teorias possíveis sobre a 
maneira como ocorria a replicação:
 Hipótese conservativa
 Hipótese semiconservativa
 Hipótese dispersiva
Como ocorre a Replicação???
Experiência de Meselson e Stahl
Experiência de Meselson e Stahl
Início
Experiência de Meselson e Stahl
Experimento
Experiência de Meselson e Stahl
Resultados
Experiência de Meselson e Stahl
 Os resultados da experiência de Meselson e
Stahl apoiaram o modelo da replicação
semiconservativa, que se processa segundo a
regra da complementaridade de bases.
Replicação Semiconservativa
 Cada uma das cadeias formadas é uma réplica de 
uma das cadeias originais. Assim, as novas moléculas 
de DNA são idênticas às moléculas originais, sendo 
cada uma portadora de uma cadeia antiga e de uma 
cadeia recém-formada.
Replicação
 Processo complexo e rápido
 Envolve:
 Desenrolamento da cadeia do DNA por separação das 
histonas;
 Rompimento, por ação enzimática (Helicases), das pontes de 
hidrogênio entre as bases complementares;
 Início da replicação
Estágios da Replicação
 Iniciação
 Alongamento
 Terminação
Iniciação
 Efetuada por um iniciador (RNA iniciador – RNA 
Primer) que no final é removido
Alongamento
 Formação simultânea de duas novas cadeias 
complementares das cadeias originais, sendo cada 
uma delas antiparalela em relação à que lhe deu 
origem;
Alongamento
 A adição de nucleotidos é efectuada com o auxílio 
de uma enzima – DNA Polimerase
Terminação
 Procariontes – o DNA é circular, a replicação
termina quando as duas zonas de crescimento se
encontram
Terminação
 Eucariontes – o DNA possui sequências
específicas de nucleótidos indicadores de
iniciação e finalização da replicação
Replicação
Replicação
Duplicação do Material Genético
Replicação
http://www.youtube.com/watch?v=NMObWWt_yrc
Replicação 
do 
DNA 
Resumo 
Resumo dos Fatores necessários à Replicação
Elimina o primer de RNA, preenchendo com DNA
PROTEÍNA FUNÇÃO
DNA girase Desespiraliza o DNA
SSB Ligação e estabilização da fita simples do DNA
DnaA Fator de iniciação
HU Ligação e estabilização do DNA (semelhante a histonas)
PriA Montagem do primosso, 3'5' helicase
PriB Montagem do primossomo
PriC Montagem do primossomo
DnaB 3'5' helicase (desespiraliza o DNA)
DnaC Chaperona DnaB
DnaT Auxilia o DnaC na liberação do DnaB
Primase (iniciase)
DNA polimerase III Elongação (síntese propriamente dita do DNA)
DNA polimerase I
Liga covalentemente os fragmentos de Okazaki
Ter Término
Síntese do primer de RNA
DNA ligase
Conclusões
 Na replicação semiconservativa da molécula de DNA forma-se uma 
cópia integral de cada uma das cadeias constituintes da molécula 
original, através da polimerização ordenada de nucleotídeos, 
segundo a regra da complementaridade de bases.
 Cada uma das moléculas formadas é idêntica à molécula original, 
tendo uma cadeia da molécula original e uma cadeia nova.
 A hipótese de replicação semiconservativa foi apoiada pela 
experiência de Meselson e Stahl.
 O modelo de replicação semiconservativa permite explicar a 
transmissão do programa genético e a relativa constância da 
composição do DNA no decurso das divisões celulares.