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3ª.LISTA DE EXERCÍCIOS DE FUNDAMENTOS ENGENHARIA BIOQUÍMICA ESTERILIZAÇÃO(MEIOS, EQUIPAMENTOS E AR), AERAÇÃO, AGITAÇÃO E EXTRAPOLAÇÃO DE ESCALA 1. A determinação do coeficiente volumétrico de transferência de oxigênio (KLa) pelo método da desoxigenação química foi conduzida em laboratório, em biorreator contendo 10 litros de água destilada, utilizando agitador tipo pá, operando com velocidade de agitação igual a 804 rpm. A aeração promovida no sistema é do tipo superficial, obtida mediante a ocorrência de vórtice. Foram necessários 0,571 g de sulfito de sódio e 9,7 mL de catalisador (CuSO4 3% p/v), para a reação total com o oxigênio contido inicialmente na água. O experimento teve duração de 5 minutos, com temperatura média de 29oC, na qual a constante de saturação de oxigênio (CS) tem valor igual a 7,67 ppm. Com os resultados experimentais dados abaixo , pede calcular o valor do KLa para as condições operacionais do sistema em estudo. Tempo (min) 0,5 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 CL (ppm) 2,6 2,7 3,6 4,2 5,2 5,4 RESPOSTA: KLa = 0,1946 2. Em um biorreator, em escala de laboratório, contendo 2,8 litros de uma solução de sulfito de sódio (Na2SO3), agitado mecanicamente por um impelidor de geometria de três pás inclinadas, de 3,0 cm de diâmetro e aerado a uma vazão de 2 litros de ar por minuto, foi realizada a determinação do parâmetro KLa pelo método da oxidação do sulfito (ou método de Cooper). Os testes foram conduzidos a uma temperatura média de 28oC (CS = 7,81 ppm) e, a cada intervalo de tempo de 5 minutos eram retiradas amostras para o monitoramento do consumo do sulfito de sódio. Com os resultados experimentais dados abaixo , pede calcular o valor do KLa para as condições operacionais do sistema em estudo. Tempo (min) 5 10 15 20 25 30 ∆SO3= (g/L) 1,15 1,79 3,15 4,08 4,47 6,37 RESPOSTA: KLa = 0,0033 3. Calcular a vazão de ar nas seguintes situações: a. V = 80 m3; Q/V = 0,35 vvm b. V = 25 m3; Q/V = 0,80 vvm RESPOSTA: a) Q= 1680 m3/h , b) Q= 1200 m3/h 4. Calcular a espessura de camada filtrante que retém 90% de contaminantes em um filtro de camada fibrosa, a partir de : a. x50 = 5,2 cm b. x63 = 8,0 cm c. x29 = 2,7 cm RESPOSTA: a) X90 = 17,27 cm , b) X90 = 18,52 cm , c) X90 = 18,17 cm 5. Calcular a taxa de aeração em um processo em batelada, conduzido em biorreator de volume nominal igual a 10 m3, contendo mosto em volume correspondente a 80% de sua capacidade, aerado a uma vazão de 240 m3/hora. RESPOSTA: taxa de aeração = 0,5 m3 ar/m3 de meio. Min = 0,5 vvm 6. Calcular o grau de esterilidade (No/N) para a uma esterilização descontínua, com eficiência Ef = 99,9999999999% RESPOSTA: No/N = 109 células 7. Em fermentação contínua, com volume de 200 m3, aerada a uma taxa de 0,25 vvm e vazão de operação de 50 m3/hora, em que o nível de contaminantes do ar é de 2,5 x 103 células/m3, admite-se somente uma falha na esterilização de ar a cada 150 volumes de mosto processado. Calcular o grau de esterilidade e o tempo total de operação do sistema. RESPOSTA: No/N = 4,5 x 109 células , t = 600 horas 8. Em uma fermentação descontínua, com volume de meio igual a 80 m3, é aerada a uma taxa de 0,35 vvm, sendo o tempo de fermentação igual a 68 horas, e iguais tempos de preparo e descarga do biorreator (2 horas). O ar contém contaminantes em concentração média de 2190 células/m3. O grau de esterilidade é tal que não pode haver parada na produção em conseqüência de esterilização de ar ineficiente. Nesta situação, qual é o grau de esterilidade? RESPOSTA: No/N = 25 x 107 células 9. Estudando o efeito de algumas variáveis operacionais sobre o valor de KLa, Eckenfelder chegou à seguinte equação: KLa = β . h2/3 . Q/10.V.dB. (NSC)1/2 Com base nesta equação, calcular a vazão de ar para um biorreator de 512 m3, com nível de líquido igual a 8 metros, de forma a reproduzir o nível de aeração de um fermentador de 1 m3, nível de líquido igual a 1 metro, aerado a uma taxa de 0,8 vvm. RESPOSTA: Q2 = 102,40 m3/min 10. A partir das equações abaixo, que representam a variação da constante de velocidade de destruição térmica de microorganismos e nutrientes e das equações da variação logarítmica da população de contaminantes e de concentração inicial de substrato termosensível com o tempo de esterilização, demonstre que, em uma esterilização HTST, a destruição de nutrientes de um dado So para um valor S2, à temperatura T2 é inferior à destruição de um valor So para S1, à uma temperatura T1, sendo T2 > T1 e Em-o > ESUBSTRATO. Ln No/N = Km-o . θe Ln Km-o = Ln Am-o - Em-o / RT Ln So/S = KSUBSTRATO- . θe Ln KSUBSTRATO = Ln ASUBSTRATO - ESUBSTRATO / RT 11. Em um biorreator de 50 m3 de volume útil, um produto P é obtido a partir de um substrato S, pela ação de um microorganismo X, em processo contínuo operando em estado permanente. Meio estéril, com 130 g de substrato por litro é alimentado ao biorreator a uma vazão de 12.500 litros/hora. A esterilização é feita continuamente, em esterilizador tubular, de diâmetro interno igual a 0,80 m e volume de 2,51 m3 , a uma temperatura de 118oC. A equação abaixo mostra a variação da constante de destruição térmica (em min-1) com a temperatura absoluta (em K). K = 7,566 x 1038 exp (-68.700 / 1,98 . T) O fator de conversão de substrato em biomassa (YX/S) é 0,205 g de células/ g de substrato consumido, o fator de conversão de substrato em produto (YP/S) é 0,50 g de produto/ g de substrato consumido e a concentração de substrato no efluente é igual a 5 g/L. Com base nos dados acima, calcular: a. O tempo de esterilização θe b. O grau de esterilidade No/N c. O comprimento do esterilizador d. A taxa específica de consumo de substrato e. A taxa de crescimento f. A taxa específica de formação de produto RESPOSTA: a) θe = 12,08 min, b) No/N= 29,5 x 1010 células , c) L= 5 m , d) qs = 1,219 h-1 , e) µ = 0,25 h-1 , f) qp = 0,61 h-1 12- Oyama & Endooh * estudaram a influência do número de aeração (Na= Q/ND3) sobre a relação Pg/P em líquidos agitados e aerados. Dos resultados publicados para um agitador dotado de uma turbina “vaned disk” de 6 palhetas, pode-se concluir que, para números de aeração menores do que 0,04; a relação Pg/P pode ser expressa com boa aproximação, pela equação: Pg/P = (1 – 10 Na) Para sistema análogo, mas sem aeração, Rushton e cols ** , encontraram um valor para o Número de Potência constante e igual a 5,92. Baseando-se nestas informações e em outras obtidas no curso, resolver o problema abaixo: Em uma fermentação em batelada, aerada e agitada, o sistema de agitação consta de um jogo de turbinas tipo “vaned disk” de 6 palhetas, girando a 75 rpm, e o escoamento no interior do biorreator é caracterizado por um número de Reynolds igual a 187.500. A viscosidade do mosto é de 0,02 Kg/m.s e sua densidade é 1.172 Kg/m3. O biorreator é cilíndrico e dotado de chicanas, e opera com 40 m3 de mosto. Seu diâmetro é o dobro do diâmetro da turbina. A velocidade do ar através da seção reta do biorreator é de 85 m/h e, nesta situação, o valor medido para o coeficiente volumétrico de absorção de oxig6enio é Kv = 4,70 Kgmol/h m3 atm. Pede-se responder os itens abaixo: 1. Potência necessária para agitar o mosto; 2. Capacidade do compressor de ar; 3. Espessura da camada de lã de vidro necessária à filtração do ar de processo, levando em conta o grau de esterilidade exigido No/N = 7 x1012, e que 50% dos contaminantes do ar são retidos nos primeiros 35 mm do filtro. Referências (*) Chem. Eng. Japan, 19, 2, 1955. (**) Chem. Eng. Progress, 46, 467, 1950 RESPOSTA: 1) Pg= 122 HP, 2) Q = 680 m3/h, 3) xF= 1,5 m 13- Na produção de tetraciclina em fermentação piloto com 20 litros de mosto foi utilizada a seguinte tabela para otimização do sistema de aeração, sendo vs a velocidade do ar através do biorreator e P a concentração de tetraciclina. vs (dm/min) P (g/l) 2,2 1,4 3,1 2,0 4,8 3,1 6,2 4,0 7,8 5,0 9,3 6,0 10,8 6,0 12,0 6,0 Para a melhor situação encontrada, mediu-se no reator piloto um coeficiente volumétrico de absorção de O2 (Kv) igual a 3,84 Kgmol/h m3atm. O biorreator piloto é cilíndrico e apresenta uma relação entre altura de mosto e diâmetro de 4,0 e é agitado por uma turbina do tipo “vaned disk” . Deseja-se fazer uma extrapolação de escala para a fase de produção industrial, de modo a se obter 960 Kg de antibiótico ao fim da cada batelada. O ar é filtrado na escala industrial através da lã de rocha compactada a uma densidade média de 334,5 Kg/m3, sendo a área da seção reta do filtro 100 vezes maior que a área da seção reta do biorreator piloto. Na esterilização do ar, exige-se um grau de esterilidade (No/N) igual a 1010. A tabela abaixo mostra a variação de X90 (espessura da camada filtrante que retém 90% dos contaminantes do ar) com velocidade linear do ar através do filtro (vsf). vsf. (m/min) X90 (cm) 1,15 18,0 1,50 28,0 3,00 34,0 7,00 27,0 20,00 11,0 40,00 4,4 80,00 1,5 Pede-se calcular: 1- Capacidade do compressor de ar em m3/h 2- Potência efetivamente aplicada na agitação em HP 3- Espessura da camada filtrante e a massa de lã de rocha a ser empregada no filtro RESPOSTAS: 1) Q2 = 32,57 m3/min, 2) Pg = 432 HP, 3) xF = 2,24 m e Massa lã = 2250 Kg 14- Trata-se de dimensionar uma esterilização descontínua de 200 m3 de mosto a 120 °C, efetuada no próprio biorreator, em que o processo fermentativo passar-se-á a 25,5 °C. A constante de velocidade de destruição dos esporos do contaminante pelo calor é dada pela equação descrita abaixo, onde R= 1,98 cal/g mol °K (constante dos gases perfeitos) e T é a temperatura absoluta em °K . K = 7,94 x 1038 exp (-68,7 x 103/RT) (min-1) A temperatura mínima letal do contaminante (forma esporulada) é 100 °C, e as tabelas de aquecimento e resfriamento do mosto do fermentador são as seguintes: AQUECIMENTO RESFRIAMENTO Tempo (min) Temperatura (°C) Tempo (min) Temperatura (°C) 80 100 0 120 81 102 1 118 82 103 2 116 83 105 3 114 84 106 4 112 85 108 5 109 86 109 6 106 87 111 7 104 88 112 8 102 89 113 9 101 90 115 10 100 91 116 20 77 92 118 45 40 92,5 120 60 25,5 Considerando que o mosto inicial apresenta nível de contaminação de 2 x 105 esporos /ml e que somente se admite uma possibilidade de falha no processo de esterilização em cada 20 dornas esterilizadas, informe: 1- Qual o tempo de manutenção do mosto a temperatura de esterilização propriamente dita (120 °C). 2- Se a esterilização fosse processada em esterilizador contínuo a 125°C e com as mesmas exigências de esterilidade, qual seria o comprimento da seção de espera (Diâmetro= 10 in), para assegurar uma vazão de 50 m3/h de mosto esterilizado? (Suponha não haver condensação de vapores no ejetor) 3- Suponha que na esterilização em batelada ocorra um problema com o controlador de temperatura no aquecimento de tal maneira que ela aumenta normalmente de 100 a 115 °C, permanecendo constante por 10 minutos a esta temperatura. Depois da correção do defeito, a temperatura sobe os restantes 5 °C na taxa normal, de modo que o período total de permanência a 120 °C pode ser diminuída. Qual será o novo tempo de permanência a 120 °C. RESPOSTAS: 1) θe = 5 min e 16 segundos, 2) L= 51,62 m , 3) θe’= 2 min e 4 segundos 15- Um biorreator contínuo com volume útil de 50.000 litros é alimentado com mosto cujo teor em substrato é 11,11 g/100 ml. Atingindo o regime permanente, verifica-se que a velocidade de consumo de substrato no interior do biorreator é dS/dt = 40 x 10-5 Kg/L min, e que a concentração de substrato no mosto fermentado que deixa a dorna é um décimo da do mosto de alimentação. O mosto que alimenta o biorreator é previamente processado em esterilizador contínuo, onde o tubo espera, cujo diâmetro interno é 10 cm, tem um comprimento de 88 metros. É desprezível a condensação de vapor d’água no ejetor. A esterilização visa a destruição de esporos de um contaminante para o qual foram levantados os seguintes dados da variação da constante K da velocidade de destruição térmica com a temperatura t: K (min-1) T (°C) 0,092 103,0 0,53 11,6 3,1 120,7 60,0 137,0 Sabendo-se que o mosto a ser esterilizado contém 10 5 esporos do contaminante por ml e que o nível de esterilidade exigido é tal que em cada 10.000 m3 de mosto esterilizado possa haver apenas um esporo de microorganismo contaminante, pede-se: 1- O tempo em que o mosto permanece na temperatura de esterilização 2- A temperatura de esterilização 3- A produção do fermentador, em volume de mosto fermentado por unidade de tempo. 4- A velocidade específica de crescimento do microorganismo no fermentador. RESPOSTAS:1) θe = 3,45 minutos, 2) Te = 127 °C, 3) Produção volumétrica = 200 L/min, µ = 0,24 h-1