Cromossomos Humanos

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CROMOSSOMOS HUMANOS
O Ciclo Celular
Compactação do Material Genético
Mitose
Célula mãe
A cromatina condensa-se em cromossomos e a carioteca é desfeita
Alinhamento dos cromossomos
Separação das cromátides irmãs
Descondensação das cromatinas, divisão do citoplasma
Duas células filhas
Anáfase
Telófase
Metáfase
Prófase
Conferências:
Denver (1960)		
Londres (1963)		
Chicago (1966) 
Paris (1971,1975) 
ISCN (1978 a 1995)
Padronização Cariotípica
Conferência de 
Denver (1960)
Propostas
 Classificação básica para cromossomos mitóticos humanos
 Divisão em 7 grupos, distribuídos de acordo com tamanho e morfologia
p
q
Conferência de 
Londres (1963)
Propostas
 Os 7 grupos foram denominados com letras (A a G)
 Descrição morfológica detalhada dos grupos A, C, D, E e G
Conferência de 
Chicago (1966)
Propostas
 Regras para a descrição do cariótipo (fórmula cariotípica)
 Criação dos símbolos utilizados na descrição de cariótipos normais e anormais, em coloração convencional
46,XX mulher
46, XY homem
47,XY+21 - homem, trissomia do 21
45,X0 - mulher com Síndrome de Turner
Sangue
Periférico
 Protocolos otimizados
 Microcultura e macrocultura
 Cultura a curto prazo - 48 a 72h
 Cultura a longo prazo - 92h
 Pouco invasivo
linfócito
Meio
de Cultura
 RPMI 1640
 Fitohemaglutinina
 Soro fetal bovino
 Penicilina
 Estreptomicina
 L-Glutamina
 Colchicina 
Rotina
Citogenética
Diante da cultura efetivada realiza-se a técnica de squash, a qual consiste de gotejar o material cultivado sobre uma lâmina de vidro (com um breve afastamento para ação da gravidade). 
Observa-se a metáfase mais apropriada para avaliação, fotografa, amplia e realiza o cariótipo simples. Caso seja solicitação de Cariótipo por bandeamentos cora-se o material com a banda adequada e posteriormente realiza-se o cariótipo.
Obs.: A técnica de bandeamento refere-se a frações sensíveis a corantes expostos e não a frações gênicas. 
Classificação dos cromossomos
Metacêntrico → Centrômero posicionado no centro do cromossomo; 
Submetacêntrico → Centrômero deslocado para uma das extremidades do cromossomo; 
Acrocêntrico → Cromossomo portador de uma esfera terminal (satélite), localizada na extremidade do braço curto; 
Telocêntrico → Cromossomo formado por apenas um braço, com centrômero estritamente terminal. 
Classificação Universal de Denver
Grupos
Morfologia
Pares
A
Grandes - Metacêntricosou Submetacêntricos
1 a 3
B
Grandes– Submetacêntricos
4 e5
C
Médios– Submetacêntricos
6a 12 – X
D
Médios-Acrocêntricos
13 a 15
E
Pequenos – Metacêntricosou Submetacêntricos
16 a 18
F
Pequenos– Metacêntricos
19 e20
G
Muito Pequenos – Acrocêntricos
21e 22 -Y
Bandeamento GTG
 Permitiu o pareamento cromossômico
 Localizar o local afetado
 Identificar bandas claras e escuras
Bandeamento G
Os cromossomos são inicialmente tratados com tripsina, para a desnaturação das proteínas cromossômicas e em seguida são corados com o corante Giemsa. 
Identificação dos Cromossomos
Bandeamento
 GTG
Tripsina 
5%
NaCl 
100%
Giemsa 
4%
dH2O
Identificação dos Cromossomos
 	Bandeamento Q
Os cromossomos são tratados com mostarda de quinacrina ou compostos semelhantes e, em seguida, examinados por microscopia de fluorescência. Os cromossomos coram-se num padrão específico de bandas brilhantes e opacas 
Identificação dos Cromossomos
Bandeamento R
Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor antes da coloração Giemsa . Nesse caso, as bandas claras e escuras resultantes são o inverso das produzidas por bandeamento G. 
Bandeamento C 
Envolve a coloração da região centromérica de cada cromossomo e outras regiões que contenham heterocromatina. 
Identificação dos Cromossomos
Bandeamento de alta resolução
Esse tipo de bandeamento cora cromossomos preparados num estágio inicial da mitose (prófase ou prometáfase) que estão ainda em uma condição relativamente não-condensada. 
Citogenética molecular
Podem-se usar sondas de DNA específicas para cromossomos ou regiões cromossômicas particulares ou diagnosticar rapidamente a existência de um número anormal de cromossomos no material clínico. 
Banda NOR
Identificação cromossômica mediante o uso de nitrato de prata.
Autoradiografia
Os cromossomos são identificados mediante a eliminação de substâncias radiotivas expelidas. É prejudicada a visualização em detrimento de não haver homeostasia celular.
Análise
Citogenética
 Indicação Clínica
 Tipo de Amostra
 Qualidade do material
 Experiência do analista
 Recursos de análise
Tipos
de Amostras
Sangue periférico e biópsia de pele
Contagem: 15-20 células
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
linfócito
fibroblastos
Medula Óssea
Contagem: 15-20 células
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
Tipos
de Amostras
Tipos
de Amostras
Líquido Amniótico
Cultura em frascos
Contagem: 15-20 células de duas culturas
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 células
AMNIONCENTESE
Vilosidades Coriônicas
Direto
Contagem: 15-20 células, se possível
Análise: 4-5 células, se possível
Cariótipo: 2 células (1 de cada teste)
Cultura
Contagem: 15-20 células (de cada cultura)
Análise: 4-5 células
Cariótipo: 2 (de cada cultura
Tipos
de Amostras
Tipos
de Amostras
Células Tumorais
Contagem: Não se recomenda apenas a contagem sem a análise completa da célula
Análise: 15-20 células
Cariótipo: 2 células
Métodos e 
Ferramentas de
 Análise
Métodos e 
Ferramentas de
 Análise
Axioplan-Imaging®
Carl Zeiss
Componente
Explicação
6
Número do cromossomo.
p
Encontra-se no braço curto do cromossomo (pparapetitem Francês);qindica o braço longo.
21.3
O número seguinte a letra representa a posição no braço: banda 21, sub-banda 3. As bandas são visíveis aomicroscópioquando o cromossomo está devidamente corado. Cada banda é numerada sendo a número 1 a mais próxima docentrômero.Sub-bandasandsub-sub-bandassão visíveis a resoluções mais altas.
Ex.: 6p21.3 - 15q21 (fibn1) – Síndrome de Marfan - HAD