AULA 1 DIAGNÓSTICO LABORATORIAL (1)

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07/08/2018
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COLETA, TRANSPORTE E ARMAZEMENTO DE 
AMOSTRA PARA MICROBIOLOGIA CLÍNICA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLINICA
Tipo de amostra Qualidade da amostra
Armazenamento Transporte
Sucesso no 
Diagnóstico
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� PROCESSO IDEAL:
Anamnese
Epidemiologia
Exames de 
triagem
Diagnóstico 
presuntivo
Colheita 
espécime clinico 
e transporte
Processamento
Exame direto
Exame indireto
Isolamento e 
identificação
FECHAMENTO DO 
DISGNÓSTICO (PÓS 
CLÍNICO – Etapa 4) 
Requisição
Etapa 1: 
Clínica
Etapa 2: Pré-
analítica
Etapa 3: Analítica
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� DIAGNÓSTICO IDEAL
� Evidência clínica (febre, prurido, pústulas, etc)
� Isolamento e identificação fúngica compatível
� Demonstração dos elementos fúngicos invadindo o tecido 
(qdo aplicável)
� Compatibilidade das estruturas morfológicas entre exames 
micológicos e histopatológico (qdo aplicável)
� Resposta imunológica ao fungo isolado e identificado (qdo
aplicável)
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� PROCESSO IDEAL:
Anamnese
Epidemiologia
Exames de 
triagem
Diagnóstico 
presuntivo
Colheita 
espécime clinico 
e transporte
Processamento
Exame direto
Exame indireto
Isolamento e 
identificação
FECHAMENTO DO 
DISGNÓSTICO 
Requisição
Etapa 1: 
Clínica
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
Anamnese
Epidemiologia
Exames de 
triagem
Diagnóstico 
presuntivo
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� ETAPA 1: CLÍNICA
� Identificação clara do paciente 
� Informações sobre o paciente que são 
relevantes para o diagnóstico do processo 
infecioso
� Descrição da amostra
� Natureza do Teste Solicitado
� Testes de sensibilidade
� Testes especiais
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
� Identificação clara do paciente 
Requisição
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� ETAPA 1: CLÍNICA
� Informações sobre o 
paciente que são 
relevantes para o 
diagnóstico do 
processo infecioso
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
� Descrição da amostra
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� ETAPA 1: CLÍNICA
� Natureza do Teste Solicitado
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
� Testes de sensibilidade
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� ETAPA 1: CLÍNICA
� Testes especiais Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
� Identificação clara do paciente 
� Informações sobre o paciente que são 
relevantes para o diagnóstico do processo 
infecioso
� Descrição da amostra
� Natureza do Teste Solicitado
� Testes de sensibilidade
� Testes especiais
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� ETAPA 1: CLÍNICA
� Fatores que podem comprometer o exame 
microbiológico: 
� Hipótese diagnóstica mal elaborada
� Informações mal colhidas, incompletas, ou 
não devidamente interpretadas
� Requisição inadequada da análise laboratorial
Requisição
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 1: CLÍNICA
� Fatores que podem comprometer o exame 
microbiológico: 
� Coleta, conservação e transporte inadequados
� Falhas técnicas no processamento da análise
� Demora na liberação de resultado
� Má interpretação dos resultados
Requisição
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� PROCESSO IDEAL:
Anamnese
Epidemiologia
Exames de 
triagem
Diagnóstico 
presuntivo
Colheita 
espécime clinico 
e transporte
Processamento
Exame direto
Exame indireto
Isolamento e 
identificação
FECHAMENTO DO 
DISGNÓSTICO 
Requisição
Etapa 1: 
Clínica
Etapa 2: Pré-
analítica
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 2: PRÉ-ANALÍTICA - COLHEITA
� AMOSTRA REPRESENTATIVA DA DOENÇA
(sitio, estágio, profundidade, quantidade 
adequados)
� Seguir Manual específico para cada tipos e 
amostra (ANVISA 2010)
� Realizados por profissionais treinados
� Antes da antibioticoterapia (se possível)
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� ETAPA 2: PRÉ-ANALÍTICA - COLHEITA 
� Coletar sempre após antissepsia do sítio 
anatômico
� E de forma asséptica (Boas práticas de 
coleta de amostras clínicas)
� EPI e EPC adequados
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ETAPA 2: PRÉ-ANALÍTICA –
COLHEITA E TRANSPORTE
� Recolher em recipientes adequados e 
estéreis
� Recipientes devem ser acondicionados 
em embalagens individuais e 
devidamente etiquetados
� Embalagens individuais devem ser 
acondicionadas em caixa térmica 
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� ETAPA 2: PRÉ-ANALÍTICA –TRANSPORTE
� Acompanhados das solicitações
� Encaminhados imediatamente para
laboratório 
� Mantidos sob refrigeração (4º C) 
� (ver quadro do manual pg 17 Módulo 4)
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� ESPÉCIMES CLÍNICOS PARA MICROBIOLOGIA:
� Secreções respiratórias superiores e inferiores
� Escarro/induzido
� Lavado brônquio-alveolar
� Sangue
� Medula óssea
� LCR
� Tecido (pele, parênquima cerebral, pulmão, linfonodos, óssos, etc)
� Urina e Fezes
� Secreções de feridas, genitais
� Ponta de catetere intravascular
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� AMOSTRAS INADEQUADAS POR FORNECEREM RESULTADOS 
QUESTIONÁVEIS:
� Material clinico recebido em solução de formalina
� Material conservado inadequadamente com 
relação a temperatura (urinas colhidas ha mais de 24
horas, que ficaram guardadas em geladeira, ou 
colhidas ha mais de duas horas, sem refrigeração)
� Ponta de cateter de Foley
� Swab (de abscessos, de queimadura, de lesão 
periodontal, úlcera de decúbito, Swab seco)
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� PROCESSO IDEAL:
Anamnese
Epidemiologia
Exames de 
triagem
Diagnóstico 
presuntivo
Colheita 
espécime clinico 
e transporte
Processamento
Exame direto
Exame indireto
Isolamento e 
identificaçãoFECHAMENTO DO DISGNÓSTICO 
Requisição
Etapa 1: 
Clínica
Etapa 2: Pré-
analítica
Etapa 3: Analítica
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� FASE 3: FASE ANALÍTICA
� Tratamento físico e químico que dá à amostra antes de 
ser analisada:
� Digestão com mucolíticos + centrifugação para escarro 
induzido
� Concentração (centrifugação)
� Maceração + digestão + centrifugação para biópsias
� Etc (ANVISA, 2010)
Processamento
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� FASE 3: FASE ANALÍTICA
� 1- Direto
� Pesquisa do agente etiológico
� 2 - Indireto
� Pesquisa da resposta do hospedeiro 
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� FASE 3: FASE ANALÍTICA
� 1- Direto
� Exame Microbiológico
Exame direto (coloração)
Cultura
Provas 
fisiológicas/bioquímicas
� Detecção do Antígeno
Prova do látex
ELISA
� Bio Mol e outros
PCR
MSLT
 FRLP
Sequenciamento
MOLD-TOF-MS
� Exame Histopatológico
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� FASE 3: FASE ANALÍTICA
� EXAME DIRETO
� Visualização entre lâmina/lamínula ao MO
� Objetiva encontrar o agente etiológico na amostra 
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� FASE 3: FASE ANALÍTICA
� EXAME DIRETO
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� CULTURA
� Obj: isolar e identificar o agente 
etiológico
� Meios (manuais ANVISA )
� FASE 3: FASE ANALÍTICA
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� PROVAS FISIOLÓGICAS
� Assimilação e fermentação de 
carboidratos 
� FASE 3: FASE ANALÍTICA
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� LAUDO
� Meta principal é substanciar o médico 
com um laudo claro
� Capaz de auxiliá-lo na conduta clínica
� “microbiologuês” X despreparo da 
população médica p/ esses termos
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� LAUDO – PAPEL DO MICROBIOLOGISTA� Comunicar/dialogar aos interessados:
� novos padrões de relatórios
� novos agentes, seu potencial patogênico,
� mudanças de padrões (p. Ex. de antibiograma), 
disponibilidade de recursos diagnósticos
� Tomar iniciativa de procurar o medico para esclarecer 
duvidas sobre exames e materiais
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� LAUDO – PAPEL DO MICROBIOLOGISTA
� O microbiologista deve ter em mente:
� Principais agentes etiológicos em cada sítios anatômicos e a 
respectiva
� S. pyogenes, N. gonorrhoeae e Mycobacterium tuberculosis – sempre 
de são importância clinica e epidemiológica
� N. meningitidis e H. influenzae, isoladas no LCR ou sangue, sao de 
importância indiscutível, mas quando isoladas em mucosas costumam 
representar microbiota normal (flora) e seu relato e discutível
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
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� LAUDO – PAPEL DO 
MICROBIOLOGISTA
� O microbiologista deve ter em mente:
� Relatar os achados da bacterioscopia, com 
identificação sumaria (bacilos ou coco-bacilos 
não fermentadores), ou ao nível de gênero 
(enterobactérias e alguns Gram-positivos), se 
o estafilococo e aureus ou coagulase negativo
� Número médio de bacterias anotadas no 
mínimo em 10 campos observados de 
imersão
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
� LAUDO – PAPEL DO MICROBIOLOGISTA
� O microbiologista deve ter em mente:
� Conservar a bactéria por 5 a 7 dias (possibilidade de prosseguir nos testes)
� Resultados quantitativos são mais uteis que qualitativos, usando ou diluição do 
material ou semeando com alça calibrada
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
Resultado 
de 
coloração 
de gram