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Estudo dirigido Biotecnologia – Curso de Química 1) A fermentação é um dos mecanismos que permite a degradação parcial de moléculas orgânicas complexas em moléculas mais simples, liberando certa quantidade de energia. Essa via é muito utilizada por fungos, bactérias e células musculares esqueléticas de nosso corpo que estão em contração vigorosa. Sobre o processo de fermentação é incorreto afirmar: A. Qualquer processo de conversão de uma substância em certo produto, correspondendo a uma reação catalisada por um microrganismo. B. Os microrganismos podem ser incluídos durante as transformações bioquímicas ocorridas no transcorrer do processo. C. Fermentação também pode ser definida como uma transformação química de substância orgânica provocada por um fermento vivo ou por um princípio extraído de fermento. D. É um processo químico, com a ausência de gás oxigênio (O2), no qual fungos e bactérias realizam a transformação de matéria orgânica em outros produtos e energia. E. Nos organismos vivos, a fermentação ocorre na mitocôndria célula e com o auxílio de enzimas, as quais atuam como catalisadores. 2) Na descrição típica de um processo de fermentação descontínuo simples, ou descontínuo tradicional, também chamado de processo em batelada inicialmente é preparado o meio de cultura adequado à nutrição e desenvolvimento dos microrganismos, bem como ao acúmulo do produto desejado, em seguida este meio de cultura é esterilizado. O inóculo deve ser preparado, escalonado e adicionado ao fermentador e o processo se inicial, com controle de pH, Oxigênio e espuma. Após isto, o fermentador é descarregado e são executadas as operações unitárias para a obtenção do produto. Entretanto, são várias as maneiras de se conduzir um processo fermentativo industrial, o qual visa a maior obtenção de produto com menor custo. No processo descontínuo: A. Todos os nutrientes são adicionados ao biorreator antes do início do processo, exceto O2, e outros produtos químicos necessários para controle de pH e espuma e o volume no decorrer da fermentação permanece constante. B. O meio de fermentação é inoculado durante o processo sempre que necessário e incubado em condições adequadas;; C. No decorrer da fermentação são adicionados antiespumante, ácido e base, bem como o meio de fermentação que é reposto periodicamente. D. Uma das vantagens do processo descontínuo é que pode ocorrer alteração da produtividade se o substrato exercer repressão ou desvio do metabolismo celular a outros produtos diversos do produto de interesse. E. Apresenta maior risco de contaminação justamente devido à alimentação do meio ser realizada durante o processo. 3) Biorremediação é o uso de microrganismos, como bactérias, algas e fungos para a descontaminação dos solos e águas contaminadas com substâncias perigosas ao meio ambiente, como petróleo, solventes, pesticidas agrícolas, óleo alimentar, entre outras, transformando-as em substâncias menos perigosas ou não perigosas. Pesticidas são contaminantes ambientais altamente tóxicos aos seres vivos e, geralmente, com grande persistência ambiental. A busca por novas formas de eliminação dos pesticidas tem aumentado nos últimos anos, uma vez que as técnicas atuais são economicamente dispendiosas e paliativas. A biorremediação de pesticidas utilizando microrganismos tem se mostrado uma técnica muito promissora para essa finalidade, por apresentar vantagens econômicas e ambientais. Para ser utilizado nesta técnica promissora, um microrganismo deve ser capaz de A. transferir o contaminante do solo para a água. B. absorver o contaminante sem alterá-lo quimicamente. C. apresentar alta taxa de mutação ao longo das gerações. D. estimular o sistema imunológico do homem contra o contaminante. E. metabolizar o contaminante, liberando subprodutos menos tóxicos ou atóxicos. 4) A irradiação de alimentos consiste em um processo físico de tratamento que pode ser utilizado para o controle do desenvolvimento microbiano em alimentos, bem como para o controle fisiológico de vegetais, inibindo o brotamento e o amadurecimento desses produtos. A respeito desse tipo de tratamento, considere as afirmativas abaixo e assinale a alternativa correta. I. No processo de irradiação, os alimentos são dispostos em caixas plásticas e colocados no interior da câmara de irradiação. A energia alfa, proveniente principalmente do carbono-14, penetra no alimento e em sua embalagem, sendo grande parte dessa energia retida no alimento, de modo a inibir eficientemente o desenvolvimento microbiano. II. A aplicação de doses elevadas de radiação nas frutas e hortaliças pode promover o aparecimento de efeitos indesejáveis, dentre eles a diminuição do teor de vitaminas e a decomposição acelerada durante o armazenamento. III. A irradiação de ovos com casca, a fim de controlar a contaminação por Salmonella spp, pode produzir efeitos indesejáveis, visto que a dose de radiação requerida para essa finalidade pode afetar a viscosidade da clara ou a integridade da membrana da gema. A. Apenas a afirmativa I é correta B. Apenas a afirmativa II é correta C. Apenas as afirmativas I e II são corretas D. Apenas as afirmativas II e III são corretas E. Apenas as afirmativas I e III são corretas 5) O desenvolvimento e a vida dos microrganismos, além de outros fatores, somente são possíveis em suas faixas de preferências de temperatura, sendo que cada grupo de microrganismos tem sua temperatura ótima de crescimento. As oscilações da temperatura em alimentos, mesmo pequenas, são capazes de interferir na qualidade da flora microbiana atuante, que poderá ser substituída por outra, que encontra na nova temperatura condições de crescimento a distintos microrganismos. Assinale a alternativa que apresenta a sua seletividade para os diferentes graus calóricos. A. Psicrófilos, Mesófilos, Termófilos e Termodúricos B. Psicrófilos, Xerófilos, Mesófilos e Termodúricos C. Hidrófitos, Mesófilos, Termófilos e Termodúricos D. Psicrófilos, Mesófitos, Termófilos e Termodúricos E. Psicrófilos, Mesófilos, Xerófitos, e Termodúricos 6) Os estudos de degradação de compostos químicos têm mostrado vários micro-organismos extremamente versáteis em catabolizar moléculas recalcitrantes. Trabalhos atuais em biotecnologia indicam fungos e bactérias como principais micro-organismos eficientes na degradação de poluentes, possuindo alto potencial de ação na recuperação de ambientes contaminados. Em relação ao processo de Biorremediação, é incorreto afirmar que: A. Biorremediação é um processo no qual organismos vivos, normalmente plantas, microorganismos são utilizados tecnologicamente para remover (remediar) ou reduzir poluentes no ambiente, mas suas enzimas não podem ser aplicadas. B. O processo metabólico que tem se mostrado mais apto em biodegradar moléculas xenobióticas (moléculas conhecidas ao ambiente natural) recalcitrantes (moléculas de difícil degradação) nos processos de biorremediação, é o microbiano. C. Os microorganismos desempenham a tarefa de reciclar a maior parte das moléculas da biosfera, sem participar dos principais ciclos biogeoquímicos e representando o suporte de manutenção da vida na Terra. D. O termo biorremediação pode ser definido como um processo biotecnológico no qual se utiliza o metabolismo de micro-organismos para a eliminação rápida de poluentes, com o objetivo de reduzir sua concentração a níveis aceitáveis, transformado-os em compostos de baixa toxicidade. E. Os fungos não podem (correto: podem!) ser aplicados em sistemas de biorremediação pois não possuem a capacidade de crescer sob as condições de estresse ambiental. 7) Muitos micro-organismos também têm sido utilizados para a degradação de gasolina, óleo diesel e resíduos de petróleo provenientes de derramamentos, nos oceanos ou no solo. Não está entre as estratégias utilizadas em biorremediação: A. A utilização de micro-organismos autóctones, ou seja, do próprio local, sem qualquer interferência de tecnologias ativas de remediação (biorremediação intrínseca ou natural), denominada Biorremediação in situ. B. Adição de agentes estimulantes, como nutrientes, oxigênio e biossurfactantes (bioestimulação) com o uso de biorreatores, onde as condições ambientais de pH, os nutrientes, a aeração (ou anaerobiose) e a temperatura são otimizados para o máximo crescimento microbiano, sendo possível também, a inoculação de micro-organismos com capacidade degradativa conhecida, o que torna o processo bastante eficiente. C. Dentre os processos biológicos aeróbios, o sistema de lodos ativados é o mais utilizado no tratamento de águas residuárias, sendo a alternativa aplicada em mais de 90% das ETEs de médio e grande porte dos países desenvolvidos. D. O sistema de lodos ativados consiste em provocar o desenvolvimento de uma cultura microbiológica na forma de flocos (lodos ativados) em um tanque com aeração mecânica, posteriormente onde o sobrenadante do decantador é o efluente tratado. Este lodo pode então ser desidratado e destinado à adubação de culturas agrícolas. E. A utilização de micro-organismos nativos ou introduzidos no ambiente, em reatores biológicos, não possui sucesso em refinarias de petróleo (correto: possui), sendo apenas aplicadas aos resíduos de indústrias têxteis, de celulose e farmacêutica. 8) A indústria alimentar tem em conta a relação entre microrganismos e alimentos através das seguintes intervenções: Utilização de microrganismos na produção de certos alimentos, por fermentação;; utilização de microrganismos como fonte de enzimas para o processamento de alimentos;; desenvolvimento e aperfeiçoamento de métodos de conservação de alimentos que retardam a sua deterioração devido à atividade de microrganismos ou a outros fatores;; desenvolvimento de técnicas de melhoramento de alimentos ou de produção de novos alimentos. Sobre a obtenção de alimentos pela ação de microorganismos é correto afirmar: A. A levedura Saccharomyces cerevisiae é utilizada na produção de pães, vinho e cerveja. Tanto na produção de pão como vinho e cerveja, CO2 e etanol são formados, sendo que na produção de pães, ocorre a evaporação do etanol através do calor e na obtenção de vinho, a concentração de etanol é monitorada em níveis de no máximo 50% (correto: 12%) para não prejudicar o crescimento das leveduras. B. Na fermentação do mosto de grãos de cevada germinados e secos e outros materiais ricos em amido como arroz, milho ou sorgo, além de lúpulo, água e leveduras das espécies Saccharomyces cerevisiae ou Saccharomyces carlsbergensis, os níveis de CO2 e etanol produzidos são monitorados em níveis não mais de 3,8% cada. C. Após a fermentação acética (correto: alcoólica), a cerveja é armazenada durante alguns meses, durante os quais ocorre a precipitação de leveduras, proteínas e outras substâncias indesejáveis, como o ácido acético, por exemplo. Por fim, a cerveja é carbonatada, clarificada, filtrada e engarrafada. D. Na obtenção do vinagre, o açúcar é convertido em etanol através da fermentação alcoólica (correto é acética), processo anaeróbio realizado por leveduras, e posteriormente o etanol é convertido a ácido acético por um processo de oxidação. Neste processo são aplicadas bactérias como pertencentes aos gêneros Propionibacterium e Lactobacillus (correto: Acetobacter e Glucanobacter pois propioni.. é p ferm. Propiônica e lacto.. é p ferm. láctica), por exemplo. E. Na panificação, o CO2 é um produto de interesse decorrente do processo fermentativo, uma vez que faz crescer a massa, dando ao pão uma textura porosa. 9) A penicilina foi o primeiro antibiótico produzido em escala industrial. Os autores afirmam que o estímulo a sua produção foi devido ao sucesso de sua utilização durante as duas guerras mundiais. A produção da Penicilina em escala industrial e os avanços da biotecnologia têm sido de grande utilidade para o desenvolvimento de novos antibióticos e drogas de elevada eficiência no combate aos microrganismos, cada vez mais resistentes devido as modificações genéticas naturais. Sobre a produção de antibióticos é incorreto afirmar que: A. A produção dos antibióticos utilizando processos fermentativos aeróbios vem despertando interesse industrial devido à simplicidade de produção já que os antibióticos podem ser moléculas complexas, bons rendimentos reacionais e possibilidade de aplicação à produção de diversos antibióticos. B. Para a produção de antibióticos via fermentação os parâmetros concentração do substrato, concentração de oxigênio dissolvido no meio fermentativo, concentração da biomassa, volume de cultura, concentração de penicilina no meio, concentração de dióxido de carbono no meio, pH, temperatura de fermentação, taxa de aeração e potência do agitador empregado para homogeneização do meio reacional são fatores importantes. Uma vez que se tratam de reações envolvendo microrganismos sensíveis, variações bruscas destas variáveis, podem afetar o rendimento da produção. C.A síntese bioquímica associada com a recombinação genética proporcionam o desenvolvimento de antibióticos de baixa complexidade e síntese química e os processos industriais se baseiam nas técnicas biotecnológicas de produção. D. Os reatores utilizados nos processos produtivos são do tipo bateladas, que permitem agitação, aeração e entrada das correntes de substrato que requer o processo, assim como controle de temperatura do meio. E. Na produção de antibióticos um inóculo da cultura de fungo ou bactérias produtoras do composto desejado é utilizado para se realizar a via metabólica de produção da droga desejada. Na síntese de Penicilina são utilizados principalmente fungos das espécies Penicillium chrysogenum. 10) Um problema que vem causando transtornos aos tratamentos com antibiótico é o fato de que algumas bactérias desenvolveram resistência às drogas que deveriam combatê-las. parte da quantidade de antibióticos ingeridas que não foram absorvidas pelo organismo são excretadas, dessa forma resíduos dos antibióticos podem chegar às Estações de Tratamento de Esgoto (ETE's) ou ao curso hídrico no caso de localidades onde não há o tratamento de esgoto doméstico e uma pequena concentração desses medicamentos se acumula nos cursos hídricos e podem assim desequilibrar todo o sistema ecológico aquático a partir da absorção desses medicamentos pelos animais ali presentes causando possíveis disfunções de seus sistemas biológicos. Alguns estudos vêm sendo realizados afim de buscarem técnicas capazes de remover os resíduos de antibióticos das águas residuais para se evitar a disseminação dos problemas ambientais e de saúde causados pelo acúmulo desse tipo de composto nas águas. Acerca deste assunto é incorreto afirmar: A. Métodos como bioreatores com membranas, processos oxidativos avançados e adsorção em carvão ativado são processos de tratamento que viabilizariam a remoção dos antibióticos em efluentes de estações de tratamento ou promoveriam a conversão desses medicamentos a compostos menos prejudiciais à saúde e ao meio ambiente. B. Processos oxidativos avançados visam degradar as moléculas de antibióticos presentes nos resíduos, entre eles estão a oxidação com ozônio, com peróxido de hidrogênio, com radiação ultravioleta, processo Felton (em que utiliza catalizador de íons ferrosos) e associação do peróxido com a radiação, além da fotodegradação. C. Fotocatálise heterogênea com luz UV/dióxido de titânio (TiO2) ou luz UV/TiO2/peróxido de hidrogênio (H2O2), bem como a adsorção dos materiais argilosos LECA (agregados de argila expandida) podem ser aplicadas para todos os tipos de antibióticos. D. Todos os testes de inativação dos resíduos de antibióticos ambientais foram realizados em escala laboratorial, embora a necessidade de remoção de antibióticos dos efluentes seja eminente, ainda não há aplicação de nenhum processo em escala real, sendo que esta a área de estudo que deve ser aprofundada em projetos de maiores dimensões. E. Novas pesquisas para isolamento de microrganismos com capacidade de produção de antibióticos que consigam combater os microrganismos que criaram resistência aos antibióticos já administrados se mostra cada vez mais necessária. Outro ramo de pesquisa se direciona na questão da remoção dos antibióticos dos efluentes, muitos métodos têm sido testados, mas nenhum com grande eficácia e sem testes conclusivos em escala industrial. 11) (RESOLVIDA EM SALA) Considere as curvas de Lineweaver-Burk e informações fornecidas e responda o que se pede: a) Calcule Vmáx e Km para a reação sem inibidor e com os inibidores A, B e C b) Caracterize o tipo de inibição de cada inibidor.