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Genética Molecular Estrutura do DNA Estrutura do DNA Qual é a importância de conhecermos a estrutura do DNA? => Entender como o DNA pode estocar e transmitir grandes quantidades de informação. Avanços científicos: => descoberta de dados novos e interpretações diferentes destes dados Estrutura do DNA Antes dos ácidos nucleicos serem identificados como material genético, os pesquisadores reconheciam que, qualquer que fosse a natureza do material genético, ele deveria possuir: 1 – Capacidade de estocar grandes quantidades de informação 2 – Capacidade de ser copiado com precisão 3 – Capacidade de “codificar”(determinar) as características e funções de um organismo, ou seja, o fenótipo História do DNA Estrutura do DNA Estudo da estrutura do DNA tem mais de 100 anos! Johann Friedrich Miesher (1869): Descoberta da “nucleína” (DNA) nas células do pus humano. Leucócitos com grandes núcleos Material nuclear com substância levemente ácida e rica em fósforo História do DNA Estrutura do DNA Johann Friedrich Miescher (1868): Descoberta da “nucleína” nas células do pus humano. Função do material genético: Genotípica: replicação Fenotípica: expressão gênica Evolutiva: mutação Evidências indiretas do DNA como material genético: • Maior parte do DNA está nos cromossomos (vs. RNA e ptns) • Correlação entre quantidade de DNA e conjuntos cromossômicos • Composição DNA igual em diferentes tipos celulares • DNA é mais estável que RNA e ptns Estrutura do DNA Final do século XIX – Kossel determinou que o DNA continha quatro bases nitrogenadas: - Adenina - Citosina - Guanina - Timina História do DNA Ludwig Karl Martin Leonhard Albrecht Kossel (1853- 1927) Estrutura do DNA 1910 – Levene descobriu que o DNA consistia em um grande número de unidades ligadas, repetidas, chamadas nucleotídeos: Porém, incorretamente...teoria dos tetranucleotídeos?! A-G-C-T =>A-G-C-T-A-G-C-T-A-G-C-T-A-G-C-T... História do DNA Phoebus Aaron Theodore Levene (1869- 1940) Estrutura do DNA Erwin Chargaff (1947): Análises da composição do DNA. • [Timina] = [Adenina] • [Citosina] = [Guanina] • [Purinas] = [Pirimidinas] Estrutura do DNA 1948 - Erwin Chargaff e cols dosaram as quantidades das quatro bases no DNA de uma variedade de organismos => Encontraram muita variação! => Teoria dos tetranucleotídeos estava errada! Descobriram também que havia uma regularidade nas proporções de bases: A=T e G=C - quantidade de adenina sempre igual à de timina - quantidade de guanina sempre igual à de citosina Estrutura do DNA Erwin Chargaff (1949): Análises da composição do DNA [Timina] = [Adenina] [Citosina] = [Guanina] [Purina] = [Pirimidina] Estrutura do DNA Desde 1887 – Reconhecimento de que a base física da hereditariedade estava no núcleo Cromatina contém ácido nucleico e proteínas Qual destes representava a informação genética? História do DNA Estrutura do DNA Estrutura do DNA Frederick Griffith (1928): Descoberta do PRINCÍPIO TRANSFORMANTE Alteração de linhagens de Pneumococos Avirulenta x virulenta Estrutura do DNA Frederick Griffith (1928): descoberta da Transformação em Streptococcus pnemoniae. Estrutura do DNA • Estrutura do DNA 1944 - Avery, McLeod & McCarty : =>IDENTIFICAÇÃO DA NATUREZA DO PRINCÍPIO TRANSFORMANTE Estrutura do DNA Avery, McLeod & McCarty (1944): Prova de que o DNA medeia a transformação. Estrutura do DNA 1952 – Alfred Hershey e Martha Chase : => Estudo dos bacteriófagos (vírus que infectam bactérias) Hershey & Chase (1952): O DNA leva a informação genética em bacteriófagos T2. Estrutura do DNA Estrutura do DNA 1953 – Maurice Wilkins e Rosalind Franklin : => Estudaram a estrutura tridimensional do DNA usando a técnica de difração de Raio-X História do DNA Estrutura do DNA Franklin, Goslin, Wilkins, et al. (1953): O DNA é uma dupla hélice, com base na sua cristalografia por raio-X. Estrutura do DNA 1953 – James Watson e Francis Crick : Descoberta da estrutura tridimensional do DNA (Modelo de pareamento de bases no DNA dupla fita) Aplicando as leis da química estrutural, as imagens de Raio-X e utilizando modelos de arame e placa de metal História do DNA Watson & Crick (1953): Modelo de pareamento de bases no DNA dupla fita. Estrutura do DNA Estrutura do DNA Estrutura do DNA Watson & Crick juntamente com Wilkins receberam o Prêmio Nobel em 1962. Rosalind Franklin morreu em 1957 de câncer e não foi candidata a compartilhar o prêmio. Estrutura do DNA Nucleotídeos No RNA Estrutura do DNA Bases nitrogenadas (purinas e pirimidinas) Bases nitrogenadas Estrutura do DNA Estrutura do DNA Nucleotídeos No RNA No DNA Estrutura do DNA Nucleotídeos Nucleotídeos Estrutura do DNA Estrutura do DNA DNA X RNA Estrutura do DNA Nucleotídeos são unidos por ligações fosfodiéster Grupo 5’-fosfato de um nucleotídeo se liga ao átomo de carbono 3’ do nucleotídeo seguinte Estrutura do DNA Estrutura do DNA Ligações fosfodiéster e pareamento de bases Pareamento de Bases Estrutura do DNA Estrutura do DNA DNA dupla hélice com pareamento de bases Estrutura do DNA Outras conformações do DNA A-DNA B-DNA Z-DNA Estrutura do DNA Estrutura do DNA Conformações do DNA DNA-B => estrutura predominante na célula; giro para a direita (10pb por giro); mais estável DNA-A => estrutura adotada quando há pouca água; menor e mais larga que DNA- B; giro para a direita DNA-Z => estrutura pode ser adotada quando o DNA estiver em uma solução com muito sal; hélice com giro para a esquerda; o arcabouço açúcar-fosfato faz um “zigue-zague” Estrutura do DNA Busca pelas respostas “Subirei sobre este filamento de DNA para ver onde a vida me levará…” Estrutura do DNA FIM
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