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26/8/2010 1 Métodos de identificação de parasitos EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES (EPF) ESFREGAÇOS SANGUÍNEOS EPF INTRODUÇÃO Objetivo: Parasitoses intestinais Elementos parasitários nas fezes Exemplos Vermes adultos ou partes deles Ovos e larvas de helmintos Cistos, trofozoítas e oocistos de protozoários EXAME MACROSCÓPICO Consistência das fezes Odor Presença de muco e/ou sangue Vermes adultos Áscaris, proglotes de tênias etc. Tamisação EXAME MICROSCÓPICO Quantitativos: contagem de ovos nas fezes (carga parasitária). Ex: método de Kato-katz Qualitativos: identifica as formas parasitárias sem se preocupar em quantificá-las 26/8/2010 2 CONSERVANTES Frio: geladeira – por até 48 horas Químicos: mais utilizados • formol a 10% • MIF (merthiolate, iodo e formol) • SAF (Sódio Acetato Formol) COLETA DAS FEZES Frasco de boca larga limpo e seco com as seguintes informações: • nome do paciente • idade • data e se possível a hora Obs: o frasco não precisa ser estéril PROCESSOS DE ENRIQUECIMENTO Baseiam-se no princípio da densidade das formas parasitárias em determinadas soluções: • Flutuação: os meios são mais densos que as formas parasitárias • Sedimentação: os meios são menos densos que as formas parasitárias PROCESSOS DE ENRIQUECIMENTO Sedimentação espontânea método de Hoffmann, Pons e Janer ou método de Lutz Sedimentação por centrifugação método de Blagg ou de Ritchie Método de Lutz (sedimentação espontânea) Método de Ritchie (sedimentação por centrifugação) 26/8/2010 3 PROCESSOS DE ENRIQUECIMENTO FLUTUAÇÃO Flutuação espontânea método de Willis Centrifugo-flutuação método de Faust Método de Willis (flutuação espontânea) As fezes são dissolvidas com uma solução saturada de cloreto de sódio ou açúcar Método de Faust (centrifugo-flutuação) OUTROS MÉTODOS Concentração de larvas de helmintos por migração ativa: método de Baermann-Moraes clássico e modificado e método de Rugai Pesquisa de ovos de Enterobius vermicularis na região anal e perianal: método de Graham ou da fita adesiva Método de Baermann-Moraes (pesquisa de larvas) 26/8/2010 4 Método de Rugai (pesquisa de larvas) Método de Graham (pesquisa de Enterobius) MÉTODOS DE COLORAÇÃO DE FEZES Exame e diagnóstico de infecções por protozoários Pesquisa de cistos e trofozoítos de protozoários cavitários (amebas e giárdia) Coloração de hematoxilina férrica (HF) Pesquisa de Cryptosporidium método de Ziehl-Neelsen modificado Coloração de Hematoxilina Férrica (pesquisa de protozoários intestinais) Destaca as estruturas nucleares que se coram em negro, o restante do esfregaço fica com um aspecto cinza-azulado Método de Ziehl-Neelsen modificado (pesquisa de Cryptosporidium) Os oocistos retêm a coloração rosa, vermelho ou púrpura e o fundo cora-se em azul ou verde Método ou coloração A. lumbri- coides E. vermi- cularis Ancilos- tomídeos S. man- soni Taenia sp E. histo- litica/dispar G. lamblia C. parvum Direto ++ + + + + + + Lutz (S) ++++ ++ ++ ++++ ++ +++ +++ Ritchie (S) +++ ++ ++ +++ ++ +++ +++ Faust (F) ++ + +++ + ++++ ++++ Willis (F) + ++++ + + Baerman + + + + + Graham ++++ ++ Tamisação ++++ Coloração Z-N ++++ Coloração H-F ++++ ++++ + = achado ocasionalmente ++= pode ser encontrado +++ = encontrado freqüentemente ++++= método de escolha 26/8/2010 5 Parasitos do sangue e dos tecidos Indicações Hemoparasitos Trypanosoma cruzi Plasmodium spp Babesia bigemina Wuchereria bancrofti Tipos de exame Esfregaços de sangue delgados Esfregaços de sangue espessos (gota espessa) Sangue colhido com anticoagulante Coloração do esfregaço Caracterização morfológica e identificação específica Esfregaços sanguíneos delgados Gota de sangue em lâmina Sangue com EDTA Estirar a gota com ajuda de outra lâmina Coloração do esfregaço Métodos de Giemsa (Semelhante a Hematoxilina/Eosina) 45º 26/8/2010 6 Esfregaços sanguíneos espesso Três a 4 gotas de sangue em lâmina Sangue com EDTA Reunir as gotas com ajuda de outra lâmina Deixar secar e mergulhar em água corrente Hemólise 26/8/2010 7