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Bases para a Vigilância Sanitária de Alimentos Prof. Heloisa Osanai Vigilância Sanitária de Alimentos O objetivo é garantir a qualidade dos serviços de alimentos. As ações da divisão são válidas para todos os tipos de alimentos, matérias-primas, coadjuvantes de tecnologia, processos tecnológicos, aditivos, embalagens, equipamentos, utensílios e também aos aspectos nutricionais. A fiscalização e inspeção dos serviços fica a cargo das Secretarias Municipais de Saúde e pode ser complementado pela VISA Estadual. Diagnóstico • Muitas vezes é possível perceber que o alimento não está próprio para o consumo: aparência, odor, consistência... • Mas nem sempre isso é possível. Sendo necessário análise para detectar a presença de microrganismos patogênicos, ou seja, causadores de doenças. Colonização X Contaminação Colonização Evidência microbiológica ou sorológica sem expressão patológica, que, em alguns casos, é referida como infecção não aparente, infecção subclínica ou infecção assintomática Microbiota. Contaminação Introdução não intencional ou acidental de material infeccioso como bactérias, fungos, vírus, protozoários ou suas toxinas e subprodutos. Infecção X Intoxicação Infecção alimentar São doenças que resultam na ingestão de alimentos contaminados com microrganismos patogênicos. Intoxicação alimentar Ocorre quando o indivíduo ingere alimentos que já possuem substâncias tóxicas produzidas por microrganismos, como bactérias, fungos e substâncias químicas . Toxinfecção alimentar • São doenças causadas pela ingestão de alimentos contendo microrganismos patogênicos e que ainda liberam substâncias tóxicas no organismo. • Exemplo de toxinfecção alimentar: cólera (doença causada pela enterotoxina produzida pela bactéria Vibrio cholerae). A importância da higiene Métodos de controle Métodos de controle • Vão desde o modo correto de lavar as mãos até os processos indicados, de acordo com normas do Ministério da Saúde, para limpar, esterilizar e/ou desinfetar equipamentos, utensílios e superfícies de manipulação de alimentos à estocagem dos alimentos. Higienização Controle de microrganismos Eliminar ou reduzir perigos microbiológicos Limpeza DesinfecçãoSanitização Esterilização Limpeza Desinfecção ou Sanitização Higienização Limpeza Simples remoção mecânica de sujidades ou resíduos macroscópicos de natureza orgânica ou inorgânica. A limpeza poderá ser feita por meio da fricção mecânica com água, sabão, esponja, pano ou escova. Lavagem Procedimento que envolve a utilização de água e sabão ou detergentes para melhor remoção das sujidades, podendo ou não reduzir os patógenos até níveis suportáveis. H ig ie n iz aç ão Limpeza Desinfecção (agentes químicos – desinfetantes – eliminação de agentes patogênicos) Sanitização (agentes químicos - utensílios alimentares e equipamentos – diminuição da vida microbiana) Antissepsia (tecidos vivos) Esterilização • Eliminação total dos microrganismos e esporos; • Figura: Autoclave Métodos de controle de microrganismos Físico Químico F ís ic o Temperatura (calor/frio) Radiação Remoção de O2 Dessecação Filtração Vibração ultrassônica Calor Seco • Flambagem - Chama direta; • Estufa - Esterilização com ar quente. Úmido • Fervura • Autoclave • Pasteurização O ovo integral pasteurizado, a clara pasteurizada e a gema pasteurizada são indicados para indústrias de maionese, massas, chocolate, sorvete, confeitarias, panificação e outras. Pasteurizadores Radiação Ultravioleta Impede a reprodução e as atividades nocivas dos microrganismos • Os alimentos são irradiados para torná-los mais seguros e estender o período de estocagem, o que privilegia a comercialização, seja de frutas ou de cereais. Nas doses mais altas, utilizadas para estender a vida de prateleira ou controlar bactérias nocivas. Remoção de O2 Dessecação Liofilização ou criodessecação • É um processo de desidratação usado para preservar alimentos perecíveis, princípios ativos, bactérias, etc. • Processo por congelamento; • A água é retirada por sublimação, ou seja, não passa pelo estado líquido. • Preservação dos nutrientes; Curiosidade • O primeiro produto a ser liofilizado foi o vírus da raiva, em 1911. Durante a Segunda Guerra Mundial a liofilização atingiu o processo industrial devido a elevada necessidade por plasma sanguíneo. Além disso, a tecnologia também avançou com o desenvolvimento dos projetos espaciais, quando liofilizou-se alimentos para astronautas da NASA. Filtração – Filtro de ar HEPA (High Efficiency Particulate Arrestance) • Recomendada para materiais termolábeis em solução, sobretudo na descontaminação do ar, em fluxos laminares e sistemas de ventilação nos quais o controle microbiológico é especialmente importante, como salas de manipulação de nutrição parenteral e manipulação de certos alimentos. Filtro para ar HEPA: Consegue reter partículas maiores que 0,3 μm e é utilizado no controle microbiológico em salas de cirurgia. Filtro para líquidos HEPA: Consegue reter partículas maiores que 0,25 μm (organismos procariotos) e é utilizado para esterilização de meios de cultura e outras substâncias termolábeis. Micrômetro • É definido como 1 milionésimo de metro. • Equivale à milésima parte do milímetro e sua abreviatura é µm. • Unidade de medida usada para medir estruturas e distâncias microscópicas. Logo ... • 1cm (centímetro) = Centésima parte de 1 metro; • 1mm (milímetro) = Milésima parte de 1 metro; • 1µm (micrômetro) = Milionésima parte de 1 metro Vibração ultrassônica • Vibrações ultrassônicas em alta frequência que levam o rompimento da célula, degradação de compostos e quebras do DNA. M ét o d o s Q u ím ic o s Desinfecção (Hipoclorito de Sódio) Sanitização Antissepsia Preservativos (antioxidantes ...) Antisséptico – Álcool 70% • A concentração de 70% é exigida porque a presença de aproximadamente 30% de água, nessa solução, propicia a desnaturação de proteínas e de estruturas lipídicas da membrana celular, e a consequente destruição do microrganismo, com maior eficiência do que em porcentagens menores ou maiores de etanol. Nesse último caso, o álcool evapora mais rápido, diminuindo o tempo em que o mesmo fica em contato com o micro- organismo, sendo, portanto, menos eficaz. Introdução à microbiologia e fisiologia bacteriana Microbiologia É o ramo da biologia que estuda os microrganismos: • Bactérias – Procariontes; • Protozoários e fungos – Eucariontes; • Vírus – organismos acelulares; Microrganismos • Os microrganismos constituem mais de 90% da biomassa e a maior biodiversidade da Terra; • Contribuem na fertilização do solo, na degradação de detritos, beneficiam a natureza ao fixar e utilizar matéria orgânica e inorgânica. • Têm grande função na reciclagem de materiais e na desintoxificação do ambiente. São usados na produção de vinagres, bebidas alcoólicas, queijos, iogurtes, pães e antibióticos. Quanto à organização estrutural, as células são divididas em: eucariontes e procariontes Os Seres vivos, quanto ao número de células, podem ser unicelulares e pluricelulares. Seres vivos microscópicos unicelulares pluricelulares ÁcaroImportante Vírus são seres acelulares • Os vírus são organismos extremamente simples, diferindo dos demais seres vivos por não possuírem organização celular, metabolismo próprio e por não serem capazes de se multiplicar sem auxílio de uma célula hospedeira. São parasitas intracelulares obrigatórios. Bactérias São seres procariontes e unicelulares • Características morfológicas – São as dimensões, formas, estruturas e arranjos que cada espécie possui: • Dimensões: Variam de 0,1 a 2,0 µm de diâmetro e 2 a 8 µm de comprimento; • Possuem diversas formas (esféricas, em bastão ...); • A estrutura pode ter flagelo, fímbrias, etc... • Grupos de bactérias formam arranjos variados: em cachos, em cadeia, em dupla... Bactérias Seres microscópicos, unicelulares e procariontes Algumas doenças causadas por bactérias • Tuberculose: bacilo Mycobacterium tuberculosis; Hanseníase (lepra): bacilo de Hansen (Mycobacterium lepra). • Difteria: bacilo diftérico ; Coqueluche: bactéria Bordetella pertussis. • Pneumonia bacteriana: bactéria Streptococcus pneumoniae ; • Escarlatina: Streptococcus pyogenes. • Tétano: bacilo do tétano (Clostridium tetani); Leptospirose: causada pela Leptospira interrogans. • Tracoma: Chlamydia trachomatis; Gonorréia ou blenorragia: bactéria gonococo (Neisseria gonorrhoeae). • Sífilis: bactéria Treponema pallidum ; Meningite meningocócica: bactéria meningococo. • Cólera: bactéria Vibrio cholerae , o vibrião colérico; Febre tifóide: causada pela Salmonella typhi. Bactéria Bactérias Organização celular bastante simples: parede celular rígida, formada de peptideoglicana, e uma membrana citoplasmática, composta basicamente de fosfolipídios e proteínas, além de gliceroglicolipídeos; O DNA encontra-se no citoplasma, formando a região conhecida como nucleóide. Os ribossomos encontram-se dispersos no citoplasma. Externamente, podem apresentar o glicocálice, formado por glicoproteínas e glicolipídeos, que é importante na virulência e também na fixação a diversas superfícies.. Podem apresentar diferentes arranjos, em pares, em tétrades (grupo de quatro), em grupo de oito, em cachos e até em cadeias. Algumas espécies apresentam flagelo de locomoção, e outras podem possuir fímbrias de adesão e pilli. • É reprodução mais comum nas bactérias, sendo por bipartição ou cissiparidade. Ocorre a duplicação do DNA bacteriano e uma posterior divisão em duas células. Assexuada • Para as bactérias considera-se reprodução sexuada qualquer processo de transferência de fragmentos de DNA de uma célula para outra. Sexuada Reprodução - Bactérias Assexuada – Fissão binária ( em 20 min) Sexuada Transformação: Absorção de moléculas de DNA do meio (de outras bactérias mortas) Transdução: Moléculas de DNA são transferidas de uma célula para outra por meio de vírus bacteriófagos (vetores). Conjugação: Pedaços de DNApassam diretamente de uma bactéria doadora, o "macho", para uma receptora, a "fêmea". através de microscópicos tubos proteicos, chamados pili, que as bactérias "macho" possuem em sua superfície. Transformação Transdução Conjugação Nutrição - bactérias • Agridem outros seres vivos • Decompositoras (saprófitas) • Simbiontes Heterotrófica • Quimiossintetizantes (ausência de luz); • Fotossintetizantes Autotróficas Bactérias heterotróficas • São as que, por meio de inúmeros mecanismos, agridem outros seres vivos para a obtenção de alimento orgânico e causam inúmeras doenças. • As decompositoras (frequentemente denominadas sapróvoras, saprofíticas ou saprofágicas) obtêm o alimento orgânico recorrendo à decomposição da matéria orgânica morta e são importantes na reciclagem dos nutrientes minerais na biosfera. • As que são associadas de forma harmônica (sem agredir) a outros seres vivos são denominadas de simbiontes. É o caso das bactérias encontradas no estômago dos ruminantes (bois, cabras), que se nutrem da celulose ingerida por esses animais, fornecendo, em troca, aminoácidos essenciais para o metabolismo proteico do mesmo. Nutrientes necessário para crescimento de bactérias – Fontes de: Carbono (carboidratos) Nitrogênio (proteínas) Minerais (Mg, Ca, Fe) Vitaminas (A, B...) Obs: Absorção depende da água disponível. Condições ambientais para o crescimento de bactérias: Temperatura Grupo Temperatura em ºC para crescimento Mínima Ótima Máxima Termófilos 35 - 45 45 - 65 60 - 90 Mesófilos 5 - 25 25 - 40 40 - 50 Psicrófilo -5 - +5 10 - 15 15 - 20 Psicotrófico -5 - +5 25 – 30 30 - 35 Classificação de acordo com as exigências atmosféricas: • Crescem na presença de O2 livre; Aeróbias • Crescem na ausência de O2 livre; Anaeróbias • Crescem na ausência ou na presença de O2; Anaeróbias facultativas • Crescem em pequenas concentrações de O2 (10%).Microaerófilas Faixa de pH para o crescimento de bactérias Crescimento bacteriano Técnica de Gram O método de coloração de Gram se baseia na diferença de composição da parede bacteriana e a capacidade destas paredes em reter os corantes utilizados. Assim é possível a classificação em: Gram positiva - Coloração roxa Gram negativa – Coloração rosa ou vermelha Quais são as vantagens de estabelecer a diferença entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas? • A técnica de coloração das bactérias ajuda a reconhecer as características de cada caso de infecção e determinar os tratamentos mais convenientes. • Cerca de 90 a 95% das bactérias Gram-negativas são patogênicas e muitas Gram-positivas são não patogênicas. Microrganismos indicadores • São um grupo ou espécies de microrganismos que, quando presentes em um alimento, podem fornecer informações sobre a ocorrência de contaminação de origem fecal, sobre a provável presença de patógenos ou sobre a deterioração potencial do alimento, além de poderem indicar condições sanitárias inadequadas durante o processamento, produção ou armazenamento. O indicador de contaminação fecal e higiênico- sanitário do alimento - Características • Habitat exclusivo do trato intestinal do homem e outros animais; • Ocorrer em número alto nas fezes; • Apresentar alta resistência ao ambiente extra enteral (fora do intestino); • Para usa detecção e/ou contagem são utilizadas técnicas rápidas, simples e precisas. Indicadores de contaminação fecal e higiênico-sanitário do alimento Coliformes totais - 35-37°C • São grupos de microrganismos que fazem parte da família Enterobacteriaceae. • São bacilos Gram-negativos; • Indicam contaminação ambiental e possível presença de patógenos fecais. • Representam esse grupo: a Escherichia coli (habita o trato intestinal do homem e animais) e Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella (habitam o trato intestinal, vegetais e solo). Coliformes fecais ou termotolerantes e Escherichia coli - 44° a 45°C • Como a Escherichia coli é a única dentro do grupo dos coliformes que tem como hábitat primário apenas o intestino, o crescimento a essa temperatura confirma a contaminação fecal. • Indicam a presença de material fecal (na água, alimentos, materiais...) Enterococcus fecalis e Enterobacter faecium • A presença deles no alimento ou na água em número elevado indica práticas sanitárias inadequadas, exceto em produtos fermentados. UFC – Unidade Formadora de Colônia Quando a quantidade é maior que 106 UFC/g do alimento, já é possível observar alterações detectáveis no alimento. A contagem elevada em alimentos não perecíveis indica: • Processamento inadequado do ponto de vista sanitário; • Matéria-prima contaminada;• Contaminação ambiental; • Tempo prolongado do alimento em temperatura ambiente, • Temperatura inadequada de refrigeração. Bactérias psicrófilas (10º e 15º) e termófilas (45º e 60º) • Avaliam o grau de deterioração de alimentos refrigerados ou tratados termicamente. Bactérias anaeróbias • A presença indica condições favoráveis para multiplicação de patogênicos anaeróbios como Clostridium botulinum e Clostridium perfrigens. • São bacilos gram-positivos e com capacidade de formar endosporo. Staphylococcus aureus A presença em número elevado no alimento indica existência de toxina, sanificação deficiente e presença de manipulador. Bolores (fungos) e leveduras (fungos) em alimentos • Em sua maioria são microrganismos de origem ambiental. • Indicam: contato excessivo com o meio ambiente, manipulação sem a devida higiene, armazenamento por tempo prolongado em refrigeração, alto risco de produzir micotoxinas alergênicas, alto risco de deterioração. Em água: A presença de Candida Albicans (leveduras), mesmo em baixas contagens, pode indicar contaminação fecal (humana ou animal) ou contaminação humana não fecal (pele, secreções), e indica também o nível de eficiência do tratamento de água de piscinas. Bolores (fungos) em equipamento A contagem é usada como indicadora de sanificação em equipamentos e superfícies das operações de processamento.