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Métodos de Exame Parasitológico de Fezes

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Prévia do material em texto

 Exame macroscópico - verificar a consistência, odor, presença 
de elementos anormais ( muco ou sangue) e de vermes adultos 
ou parte deles. 
 
 Exame microscópico - pesquisar e visualizar as formas 
parasitárias 
 MÉTODOS QUALITATIVOS 
 
 SEDIMENTAÇÃO ESPONTÂNEA 
 Método de Hoffmann, Pons & Janer (HPJ) ou Lutz 
SEDIMENTAÇÃO POR CENTRIFUGAÇÃO 
 Método de Blagg ou MIFC e método de Richie 
FLUTUAÇÃO ESPONTÂNEA 
 Método de Willis 
CENTRIFUGOFLUTUAÇÃO 
 Método de Faust 
CONCENTRAÇÃO DE LARVAS DE HELMINTOS 
 Métodos de Baermann-Moraes, Rugai e Harada 
 
 MÉTODOS QUANTITATIVOS 
 
 Método de Kato-Katz 
ovos, larvas e cistos, alguns oocistos. 
1. Cálice de decantação; 
2. Cálice de diluição; 
3. Peneira ou Gaze dobrada em 4; 
4. Água corrente ou destilada; 
5. Espátula de madeira (tipo abaixador de língua); 
6. Lâmina e lamínula; 
7. 4 gramas de fezes. 
 
•MATERIAL NECESSÁRIO 
• Tomar cerca de 4 g de fezes recém emitidas; 
 
• Dissolvê-las no próprio recipiente de coleta (frasco padrão para coleta de amostra) 
utilizando um pouco de água; 
 
• Transferir o material dissolvido para um cálice de decantação fazendo filtrar em peneira 
contendo gaze em 4. 
 Procedimento 
• Completar até ¾ do volume de água; 
 
• Deixar repousar em superfície firme e livre de vibrações por no mínimo 2 h; 
 
• Retirar o sedimento com pipeta; 
 
• Transferir para lâmina de vidro adicionando 2 gotas de solução de Lugol e cobrindo com 
lamínula. 
 
• Observar ao microscópio em objetiva de 10x. 
 
 Procedimento 
ovos, larvas, cistos e oocistos. 
 
Luvas descartáveis 
▪ 2 gramas de fezes frescas 
▪ Béquer 
▪ Palheta de madeira 
▪ Água 
▪ Tubo de ensaio 
▪ Funil 
▪ Filtro de gaze 
▪ Centrífuga 
▪ SWAB 
▪ Formaldeído 10% ou MIF 
▪ Acetato de Etila 
•MATERIAL NECESSÁRIO 
1. Colher as fezes recém-emitidas em liquido conservador de MIF ou formaldeído. 
2. Homogeneizar bem. 
3. Filtrar a suspensão de fezes em gaze cinírgica dobrada em quatro, num copo plástico descartável. 
4. Transferir 1 a 2mL do filtrado para um tubo cônico de centrifugação, com capacidade para 15mL. 
5. Acrescentar 4 a 5mL de éter sulfúrico e agitar vigorosamente (importante Para desengordurar 0 material). 
6. Centrifugar por um minuto a 1.500rpm. 
7. Com o auxílio de um bastão, descolar a camada de detritos da parede do tubo. 
8. Inverter o tubo para desprezar o liquido, mantendo-o com a boca voltada para baixo, até limpar a parede do mesmo, 
utilizando um bastão de vidro (ou palito de picolé) contendo algodão na extremidade. 
9. Acrescentar ao sedimento gotas de salina elou lugol. 
10. Inverter o tubo em uma lâmina, deixando escoar todo o sedimento. Se a quantidade de sedimento for excessiva, 
utilizar uma pipeta para colhê-lo e preparar as lâminas. 
1 1. Cobrir com lamínula e examinar com as objetivas de 1Ox e/ou 40 x. 
 Procedimento 
Indicado para pesquisa de ovos leves (ancilostomídeos). 
1- Colocar 10g de fezes num frasco de Borrel ou no próprio recipiente onde estão as fezes 
2- Homogeneíza-las com um pouco de solução saturada de sal (NaCl) ou de açúcar 
3- Completar o volume até a borda do frasco. 
4- Colocar na boca do frasco uma lâmina, que deverá estar em contato com o líquido. 
5- Deixar em repouso por 5 minutos. 
6- Findo esse tempo, retirar rapidamente a lâmina, deixando a parte molhada voltada para 
cima. 
7- Cobrir com lamínula, corar com Lugol e examinar com objetiva 10x e/ou 40x 
Utilizado para pesquisa de cistos e oocistos de protozoários e de ovos leves. 
1- Diluir 10g de fezes em 20 ml de água 
2- Homogeneizar bem. 
3- Filtrar em gaze dobrada em quatro, num copo plástico, e transferir para um tubo de 
Wasserman. 
4- Centrifugar por um minuto a 2.500 rpm. 
5- Desprezar o líquido sobrenadante e ressuspender o sedimento em água 
6- Repetir as operações 4 e 5 até que o sobrenadante fique claro. 
7- Desprezar o sobrenadante claro e ressuspender o sedimento com uma solução de sulfato de 
zinco a 33%, densidade de 1,18 g/ml. 8- Centrifugar novamente por um minuto a 2.500 rpm. 
9- Os cistos e os ovos leves presentes estarão na película superficial; a mesma é recolhida 
com alça de platina, colocada numa lâmina junto com uma gota de Lugol e coberta com 
lamínula. O material deve ser examinado imediatamente. O sulfato de zinco pode deformar os 
cistos e os ovos. 
 
MIGRAÇÃO ATIVA DE LARVAS - hidro e termotropismos positivos - 
Métodos de Baermann-Moraes (A e B) e de Rugai (C) - larvas. 
 
usados para pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis 
1. Retirar a tampa do recipiente que acondiciona as fezes e envolvê-lo em uma gaze dobrada em 
quatro, fazendo uma pequena "trouxa". 
2. Colocar o material assim preparado, com a abertura voltada para baixo, num cálice de 
sedimentação, contendo água aquecida (45"C), em quantidade suficiente para entrar 
em contato com as fezes. 
3. Deixar uma hora em repouso. 
4. Colher o sedimento no fundo do cálice, com a ajuda de uma pipeta. 
5. Examinar no microscópio, com a objetiva de 10x. 
6. Corar as larvas com o lugol e observá-las com o maior aumento, para identificação. 
CONCENTRAÇÃO DE OVOS ATRAVÉS DE FILTRAÇÃO DAS FEZES EM 
TELA METÁLICA OU DE NÁILON - - ovos de alguns helmintos 
Método é indicado para ovos de S. mansoni, A. lumbncoides, T.trichiura e Ancylostomatidae 
 1. Preparar uma solução de verde malaquita (essa solução tem a finalidade de conservar 
as fezes e clarificar as formas parasitárias), de acordo com a seguinte fórmula: 
Glicerina 100mL 
Água destilada 
Verde-malaquita a 3% 
 
2. Cortar papel celofane semipermeável em pedaços de 24mm por 30mm e deixá-los 
mergulhados na solução de verde malaquita por pelo menos 24 horas. 
3. Colocar, sobre um papel higiênico, uma porção da amostra de fezes a ser examinada. 
 
4. Comprimir as fezes com um pedaço de tela meiálica (marca IBRAS - São Bemardo 
do Campo - no 120 - fios, urdume e trama: 0,091nm) ou similar de náilon. Nesta malha 
passam ovos de helmintos e detritos menores do que eles. 
5. Retirar as fezes que passaram para a parte superior da tela e transferi-las, com o 
auxílio de um palito, para o orifício (6mm de diâmetro) de um cartão retangular de 
plástico, 
colocado sobre uma lâmina de microscopia. 
6. Após encher completamente o orificio, retirar o cartão, cuidadosamente, deixando as 
fezes (aproximadamente 42mg) 
7. Cobrir as fezes com a lamínula de papel celofane embebida na solução de verde 
malaquita, inverter a lâmina, sobre uma folha de papel absorvente e comprimi-la. 
8. Aguardar uma a duas horas e examinar ao microscópio, contando todos os ovos 
presentes na preparação. 
9. O número de ovos encontrados no esfregaço fecal, multiplicado por 23, 
corresponderá ao número de ovos por grama de fezes. 
Ovo de Ancylostomidae Ovo de Ancylostomidae 
(larvado) 
Ovo de Trichuris trichiura Ovos de Ascaris lumbricoides 
Ovo de Enterobius 
vermicularis 
Ovo de Taenia sp. Ovo de Hymenolepis sp. 
Larva rabditóide L1 ou L2 Larva filarióide L3 
Larva filarióide L3 de 
Strrongyloides stercoralis 
Giardia lamblia e Entamoeba 
histolytica/E dispar 
DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO DE FEZES 
PRANCHA: OVOS, LARVAS E CISTOS 
Ovo de Schistosoma 
mansoni 
DETRITOS 
DETRITOS 
DETRITOS 
• Boca com três lábios 
• Dióicos com dimorfismo sexual 
 
Morfologia: Verme adulto 
Morfologia: Fêmea 
Infértil 
 
 Fértil com casca 
 
 Fértil sem casca 
Morfologia: Ovo 
• VERMEADULTO 
 
 
• OVO 
 
 
 
• LARVA 
• 3 a 5 cm 
 
• 100 a 200 proglotes 
 
• Escólex: 4 ventosas e rostro 
 armado e retrátil 
• Quase esférico 
 
• Transparentes e incolores 
 
• Membrana delgada 
 
• “Chapéu de Mexicano” 
Ancilostomídeos 
• Ancylostoma 
 
• Necator 
 
 Forma oval 
 60μm x 40μm 
 Claro 
 
OVO 
1 
 
 
 2 
 (dupla 
 membrana) 
1 2 3 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Observar em (1) ausência de bainha 
E em (2) e (3) a presença da bainha 
Fêmea Macho 
Ovo 
Vermes adultos 
Esôfago 
 claviforme 
(rabfitóide) 
 
Asa 
cefálica 
Macho Fêmea 
 
 
 Ovos 
 
 
 
 
 
 
 
 
Cauda 
recurvada 
Ovos

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