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Parede celular bacteriana e coloração de Gram Universidade Federal do Piauí - UFPI Campus Ministro Reis Veloso Disciplina: Bacteriologia Parede celular bacteriana e coloração de Gram Prof. Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira Parede celular bacteriana -Conferem rigidez – grande pressão osmótica -Impede a ruptura -Forma bacteriana 2 grupos: - Gram positivas - Gram negativas Gram-negativa Gram-positivaGram-negativa Gram-positiva Kelly Raphysa Nota geral nos temos 4 tipos de bactérias relacionada a parede, primeiro nos temos bactérias que não tem parede, bactérias que tem parede diferenciada, e o que uma parede diferenciada? É uma parede que possuem alguns componentes, que uma boa parte das bactérias não tem, agora quanto a bactéria que não tem parede, quanto bactérias que tem parede diferenciada são a minoria, pq? Porque mais de 90% das bactérias, vao se enquadrar em 2 tipos de parede celular, que a gente chama de parede gram positiva e de parede gram negativa, ou seja, quase sempre que vcs estiverem estudando uma espécie bacteriana, vcs estaram identificando uma parede que e gram positiva ou gram negativa. Parede celular bacteriana Peptideoglicano -Também chamada mureína -Responsável pela rigidez -Formado de dissacarídeos (N-acetilmurâmico, N-acetilgrlicosamina) e aminoácidos. -Gram-positivas – 90% de peptideoglicano (várias camadas) Gram-negativa Gram-positiva Membrana plasmática Peptideoglicano Gram-negativa Gram-positiva Kelly Raphysa Nota é a estrutura chamada peptideoglicano, sendo que as positivas possuem em maior quantidade, o peptideoglicano é o que da rigidez a parede celular. De que ele e formado? Formado de dissacarídeos (N-acetilmurâmico, N-acetilglicosamina) e interligados por aminoácidos. Todo peptideoglicano é igual? Não. Os aminoácidos podem variar de bactéria para bactéria. O que vamos perceber e que as gram positivos, tem bem mais peptídeo do que as negativas, cerca de 90% das bactérias positivas, tem sua aparência maior de peptideoglicano, o peptideoglicano no negativo é cerca de 30% a 40%. Entao já é uma primeira diferença Parede celular bacteriana – Gram positiva Ácido tecóico Ácido lipotecóico Membrana plasmática Peptideoglicano Kelly Raphysa Nota Bezatasil é beta-lactamicos. Que são antibióticos que agem inibindo o peptideoglicano. Ela para a multiplicação do peptídeos, entao não consegue fazer parede Parede celular bacteriana – Gram negativa Membrana externa Membrana plasmática Peptideoglicano Kelly Raphysa Nota somente em bacteria gram negativa Kelly Raphysa Nota porinas Kelly Raphysa Nota bacterias quando morrm libram LPS Kelly Raphysa Nota As negativas não sofrem de todos os beta-lactamicos. Pq a membrana externa inibe a entrada deles. Parede celular bacteriana – Gram negativa Membrana externa -Carga negativa – evasão da fagocitose -Barreira contra alguns antibióticos -Barreira contra enzimas digestivas (lisozima), detergentes, corantes Kelly Raphysa Nota Lizosima degrada os polissacarideos. Parede celular bacteriana – Gram negativa Lipopolissacarídeo (LPS) Lipídeo A Polissacarídeo O periplasma lipoproteína porinas Parede celular bacteriana – Gram negativa LPS: Lipopolissacárídeo O Lipídeo A – endotoxina – febre e choque séptico Liberada com a morte bacteriana Antibióticos – liberação de toxinas: piora – melhora. Espaço periplasmático / periplasma: Contêm enzimas hidrolíticas Beta-lactamases Porinas: Proteínas transmembrana Permeabilidade da membrana – moléculas pequenas Dano à parede celular: Parede celular bacteriana – ótimo alvo de drogas antimicrobianas Lisozima: degrada os polissacarídeos do peptideoglicano Alvo: gram-positivas - mais sensíveis gram-negativa – pouco peptideoglicano Penicilina e Beta-lactâmicos: interferem com a formação do peptideoglicanopeptideoglicano Alvo: gram-positivas mais sensíveis gram-negativas: membrana externa – barreira de entrada beta-lactamases no periplasma Gram-negativas mais susceptíveis aos antibióticos inibidores de síntese protéica: estreptomicina, cloranfenicol, tetraciclina. Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas? Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas? Coloração de Gram 1884 – Hans Christian Gram 1 – Prepara um esfregaço na lâmina 2 – Fixa pelo calor na chama 3 – Cobre com um corante púrpura (violeta de 3 – Cobre com um corante púrpura (violeta de genciana, cristal violeta) 4 – Lava com água e cobre com iodo (mordente) 5 – Lava com água e depois com álcool ou acetona 6 – Lava com água e cobre com corante vermelho (safranina) 7 – Lava com água, seca e visualiza no microscópio Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas? Gram-positivas Gram-negativas Fixação Cristal violeta Iodo Álcool/Acetona Safranina Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas? Cristal violeta Iodo Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas? Cristal violeta Iodo Safranina Gram-positivas Gram-negativas Bacillus anthracis Bordetella pertussisBacillus anthracis Clostridium botulinum Clostridium perfringens Clostridium tetani Corynebacterium diphtheriae Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Streptococcus pneumoniae Bordetella pertussis Escherichia coli Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae Proteus vulgaris Pseudomonas aeruginosa Salmonella sp; Shigella sp. Treponema pallidum Vibrio cholerae
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