Aula 02 Parede celular bacteriana e coloracao de Gram

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Parede celular bacteriana e 
coloração de Gram
Universidade Federal do Piauí - UFPI
Campus Ministro Reis Veloso
Disciplina: Bacteriologia
Parede celular bacteriana e 
coloração de Gram
Prof. Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira
Parede celular bacteriana
-Conferem rigidez – grande pressão osmótica
-Impede a ruptura
-Forma bacteriana
2 grupos:
- Gram positivas
- Gram negativas
Gram-negativa Gram-positivaGram-negativa Gram-positiva
Kelly Raphysa
Nota
geral nos temos 4 tipos de bactérias relacionada a parede, primeiro nos temos bactérias que não tem parede, bactérias que tem parede diferenciada, e o que uma parede diferenciada? É uma parede que possuem alguns componentes, que uma boa parte das bactérias não tem, agora quanto a bactéria que não tem parede, quanto bactérias que tem parede diferenciada são a minoria, pq? Porque mais de 90% das bactérias, vao se enquadrar em 2 tipos de parede celular, que a gente chama de parede gram positiva e de parede gram negativa, ou seja, quase sempre que vcs estiverem estudando uma espécie bacteriana, vcs estaram identificando uma parede que e gram positiva ou gram negativa. 
Parede celular bacteriana
Peptideoglicano
-Também chamada mureína
-Responsável pela rigidez
-Formado de dissacarídeos (N-acetilmurâmico, N-acetilgrlicosamina) e 
aminoácidos.
-Gram-positivas – 90% de peptideoglicano (várias camadas)
Gram-negativa Gram-positiva
Membrana 
plasmática
Peptideoglicano
Gram-negativa Gram-positiva
Kelly Raphysa
Nota
é a estrutura chamada peptideoglicano, sendo que as positivas possuem em maior quantidade, o peptideoglicano é o que da rigidez a parede celular. De que ele e formado? Formado de dissacarídeos (N-acetilmurâmico, N-acetilglicosamina) e interligados por aminoácidos. Todo peptideoglicano é igual? Não. Os aminoácidos podem variar de bactéria para bactéria. O que vamos perceber e que as gram positivos, tem bem mais peptídeo do que as negativas, cerca de 90% das bactérias positivas, tem sua aparência maior de peptideoglicano, o peptideoglicano no negativo é cerca de 30% a 40%. Entao já é uma primeira diferença
Parede celular bacteriana – Gram positiva
Ácido tecóico
Ácido lipotecóico
Membrana 
plasmática
Peptideoglicano
Kelly Raphysa
Nota
Bezatasil é beta-lactamicos. Que são antibióticos que agem inibindo o peptideoglicano. Ela para a multiplicação do peptídeos, entao não consegue fazer parede
Parede celular bacteriana – Gram negativa
Membrana externa
Membrana plasmática
Peptideoglicano
Kelly Raphysa
Nota
somente em bacteria gram negativa
Kelly Raphysa
Nota
porinas
Kelly Raphysa
Nota
bacterias quando morrm libram LPS
Kelly Raphysa
Nota
As negativas não sofrem de todos os beta-lactamicos. Pq a membrana externa inibe a entrada deles. 
Parede celular bacteriana – Gram negativa
Membrana externa
-Carga negativa – evasão da fagocitose
-Barreira contra alguns antibióticos
-Barreira contra enzimas digestivas (lisozima), detergentes, corantes
Kelly Raphysa
Nota
Lizosima degrada os polissacarideos. 
Parede celular bacteriana – Gram negativa
Lipopolissacarídeo (LPS)
Lipídeo A
Polissacarídeo O
periplasma
lipoproteína
porinas
Parede celular bacteriana – Gram negativa
LPS:
Lipopolissacárídeo O
Lipídeo A – endotoxina – febre e choque séptico
Liberada com a morte bacteriana
Antibióticos – liberação de toxinas: piora – melhora.
Espaço periplasmático / periplasma:
Contêm enzimas hidrolíticas
Beta-lactamases
Porinas:
Proteínas transmembrana
Permeabilidade da membrana – moléculas pequenas
Dano à parede celular:
Parede celular bacteriana – ótimo alvo de drogas antimicrobianas
Lisozima: degrada os polissacarídeos do peptideoglicano
Alvo: gram-positivas - mais sensíveis
gram-negativa – pouco peptideoglicano
Penicilina e Beta-lactâmicos: interferem com a formação do 
peptideoglicanopeptideoglicano
Alvo: gram-positivas mais sensíveis
gram-negativas: membrana externa – barreira de entrada
beta-lactamases no periplasma
Gram-negativas mais susceptíveis aos antibióticos inibidores de 
síntese protéica: estreptomicina, cloranfenicol, tetraciclina.
Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas?
Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas?
Coloração de Gram
1884 – Hans Christian Gram
1 – Prepara um esfregaço na lâmina
2 – Fixa pelo calor na chama
3 – Cobre com um corante púrpura (violeta de 3 – Cobre com um corante púrpura (violeta de 
genciana, cristal violeta)
4 – Lava com água e cobre com iodo (mordente)
5 – Lava com água e depois com álcool ou acetona
6 – Lava com água e cobre com corante vermelho 
(safranina)
7 – Lava com água, seca e visualiza no microscópio
Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas?
Gram-positivas Gram-negativas
Fixação
Cristal violeta
Iodo
Álcool/Acetona
Safranina
Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas?
Cristal violeta
Iodo
Mas como diferenciar bactérias Gram-positivas de Gram-negativas?
Cristal violeta
Iodo
Safranina
Gram-positivas Gram-negativas
Bacillus anthracis Bordetella pertussisBacillus anthracis
Clostridium botulinum
Clostridium perfringens
Clostridium tetani
Corynebacterium diphtheriae
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
Streptococcus pneumoniae
Bordetella pertussis
Escherichia coli
Haemophilus influenzae
Neisseria gonorrhoeae
Proteus vulgaris
Pseudomonas aeruginosa
Salmonella sp; Shigella sp.
Treponema pallidum
Vibrio cholerae