Exame Bioengenharia Unip

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As células-tronco são classificadas em, pelo menos, três tipos diferentes. As totipotentes são encontradas no estágio de mórula.
São exemplos de células-tronco multipotentes as seguintes:
células da medula óssea e do cordão umbilical.
As células-tronco são células primitivas, produzidas durante o desenvolvimento do organismo. unipotentes, pluripotentes, oligopotentes e totipotentes.
Em relação à sua natureza, as células-tronco podem ser classificadas em:
Adultas, quando extraídas dos diversos tecidos humanos, tais como medula óssea, sangue, fígado, cordão umbilical, placenta etc. Entretanto, estudos demonstram que sua capacidade de diferenciação é limitada e que a maioria dos tecidos humanos não podem ser obtidos a partir delas.
Segundo a Dra. Mayana Zats (USP): As células-filhas geradas são cromossomica e geneticamente iguais à célula-mãe inclusive no caso de haver gene "defeituoso"
Células-tronco adultas possuem grande potencial terapêutico... Pesquisas com células-tronco podem apontar caminhos para novas técnicas de terapias celulares.
SORO E VCACINA
Atualmente, o isolamento de genes ou DNAs é uma técnica dominada.. as células do sistema imunológico conseguem reconhecer a mensagem transmitida pelo plasmídeo  e disso decorre a ativação da resposta imunitária.
Além de imunidade humoral e celular específica, as vacinas de DNA oferecem vantagens... adquirida persiste por longo período de tempo devido à constante produção do antígeno no interior da célula hospedeira e à capacidade destas de estimularem linfócitos de memória imunológica.
A vacina de DNA, ou vacina gênica, pode ser aplicada por via intramuscular... dispensa revacinações.
As vacinas recombinantes são um tipo de vacina de subuinidade protéica.. a mesma que a ativada pelas vacinas inativadas
Em campanhas de vacinação contra o vírus da Influenza... As estirpes são duplicadas em ovos de galinha e, posteriormente, purificadas. No entanto, há o risco de algumas proteínas animais estarem presentes mesmo após essa purificação.
A tuberculose volta a ser um dos mais graves problemas de saúde pública... DNA
FUNDAMENTOS
A produção de pão e de cerveja pelo uso da levedura Saccharomyces cerevisae, da coalhada pode utilizar organismos vivos para obter algum produto de interesse. pode utilizar organismos vivos para obter algum produto de interesse.
Denomina-se cultura de células ao conjunto de técnicas.. cultura iniciada de um tecido ou órgão.
Cultura de tecidos refere-se ao desenvolvimento de tecidos e/ou células separados de um organismo. água, sais minerais, nutrientes e, algumas vezes, soro sanguíneo.
PRODUÇÃO DE PROTEÍNA RECOMBINANTE
Um dos primeiros passos para a clonagem de determinado gene é: o isolamento do fragmento de DNA que contém o gene a ser clonado.
Uma das estratégias utilizadas para selecionar células que contenham o plasmídio com o gene de interesse é: utilizar plasmídios que contenham sequências de genes de resistência a determinados antibióticos, tais como ampicilina e cloranfenicol
Se, na análise do sequenciamento de um gene de uma proteína .. a produção de uma proteína não funcional.
Existem vetores de expressão que codificam sequências úteis, como a cauda de seis histidinas. A cauda de poli-histidinaS... auxilia na purificação de proteínas recombinantes
Não é característica essencial de um vetor de expressão de proteínas heterólogas: Capacidade de integração do gene de interesse no genoma da bactéria.
Na purificação de uma proteína recombinante expressa em bactérias .a massa molecular das proteínas.
A DROGA CONHECIDA COMO IMATINIB OU GLIVEC. INDICAÇÕES: 
pacientes adultos com Leucemia Mieloide Crônica / pacientes adultos com Leucemia Linfoblástica Aguda / pacientes adultos com tumores estromais gastrintestinais
Mecanismo de ação : 
O IMATINIB É UMA PEQUENA MOLÉCULA INIBIDORA DA PROTEÍNA TIROSINOCINASE QUE INIBE POTENCIALMENTE A ATIVIDADE TIROSINOCINASE Bcr- Abl, BEM COMO VÁRIOS RECEPTORES COM ATIVIDADE TIROSINOCINASE(TK): KIT, RECEPTOR PARA O FATOR DAS CELULAS GERMINATIVAS( SCF ) CODIFICADO PELO PROTO-ONCOGENE c- KIT, OS RECEPTORES DO DOMINIO DISCOIDINA (DDR1 E 2), RECEPTOR DO FATOR ESTIMULADOR DE COLONIAS (CSF-1R) E RECEPTORES DO FATOR DE CRESCIMENTO DERIVADO DAS PLAQUETAS ALFA E BETA (PDGFR- ALFA E PDGFR-BETA). O IMATINIB TAMBEM PODE INIBIR AS VIAS CELULARES MEDIADAS PELA ATIVAÇÃO DESTES RECEPTORES COM ATIVIDADE TIROSINOCINASE.
AS VACINAS RECOMBINANTES SÃO UM TIPO DE VACINA DE SUBUNIDADE PROTEICA. EXPLICQUE COMO É FEITA, ISTO É, DESENVOLVIDA...
É EXTRAIDO UMA SUBUNIDADE DO MICRO ORGANISMO, PURIFICADO E COLOCADO EM MEIO DE CULTURA COM UMA PARTÍCULA DO NOSSO GENE HUMANO. APÓS É COLOCADO EM UM VETOR PARA MULTIPLICAÇÃODE CELULAS E ASSIM É INJETADO NO NOSSO ORGANISMO. A RESPOSTA IMUNOLÓGICA OCORRE QUANDO HÁ QUALQUER INVASÃO NO CORPO ESTRANHO, PORTANTO A REAÇÃO IMUNOLÓGICA VAI OCORRER QUANDO A VACINA FOR INJETADA NO ORGANISMO.
QUAIS AS ETAPAS DO DESENVOLVIMENTO EMBRIONARIO:
- MÓRULA, BLASTOCISTO, CELULAS EM CUKTURA QUE FORAM EXTRAIDAS DA MASSA INTERNA DO EMBRIÃO OU BOTÃO EMBRIONÁRIO, CELULAS EM MEIO DE CULTURA DIFERENCIAÇÃO CELULAR EM TECIDOS ESPECIALIZADOS
Sequencia para produzir bioproduto usando Tecnologia DNA RECOMBINANDTE:
A TÉCNICA DE DNA RECOMBINANTE É QUANDO VC UTILIZA O GENE DA PROTEINA DE INTERESSE E COLOCA EM UM VETOR PARA SER EXPESSO, DESSA FORMA, OBSERVANDO O RESULTADO ESPERADO É INJETADO O MATERIAL JÁ EXPRESSO NO PRODUTO QUE QUER OBTER O MELHORAMENTO
COMO PODEM SER DETERMINADOS OS POTENCIAIS RISCOS PARA A SAUDE HUMANA DE UM PRODUTO GENET MODIFICADO
UM DOS MAIORES RISCOS À SAÚDE HUMANA É PELO FATODA COMPOSIÇÃO QUIMICA DO ALIMENTO SER MODIFICADO, PODENDO IMPLICAR EM RESULTADOS NÃO FAVORAVEIS AO ORGANISMO HUMANO, DESSA FORMA, DEIXANDO A POPULAÇÃO RECEIOSA COM ESSA NOVIDADE. OUTRO MOTIVO É NA MODIFICAÇÃO QUE A NATUREZA SOFRE EM VIRTUDE DAS MODIFICAÇÕES
DESCREVA OS PASSOS NA TRANSF DA RESISTENCIA AO GLIFOSATO PÁRA UMA PLANTA. VOCE ACHA QUE ESSA CARACTERISTICA PODE ESCAPAR DA PLANTA CULTIVADA E TORNAR OS INÇOS RESISTENTER A GLIFOSATO. PORQUE
SIM, PELO FATO DE SE MANTEREM PROXIMOS PODE OCORRER MUTAÇÃO DESSE MATERIAL DOS INÇOS, ONDE PODE SE OBTER ESSA RESSITENCIA AO PRINCIPIO ATIVO DO INSETISIDA.
DESCREVA COMO SÃO OBTIDAS AS CELULAS TRONCO PLURIPOTENTES INDUZIDAS E A QUE SE DESTINAM.
TÉCNICA PARA OBTER: (1)As células doadoras são isoladas e cultivadas. 
(2)Transferem-se os genes das células-tronco associadas para as células doadoras por meio de vetores virais. As células vermelhas indicam as células que manifestam os genes exógenos. 
(3)As células cultivadas são colhidas de acordo com estratégias de cultivo de células-tronco, pela utilização de fibroblastos mitoticamente inativos (cor cinza claro)
(4)Um pequeno subgrupo dessas células transfectadas tornam-se células-tronco pluripotente induzidas e a partir desse momento produzem colônias de células-tronco.
O QUE SÃO CELULAS TRONCO PLURI.. INDUZIDAS
São células somáticas adultas reprogramadas para entrarem em um estado de célula tronco pluripotente, por ter sido forçadas a expressar fatores importantes para a manutenção do "stemness"de células-tronco embrionárias
Elas possuem vantagem por poder ser introduzida no próprio indivíduo que as forneceu ...Essa possibilidade (de realizar transplantes autólogos) é muito interessante pois descarta o problema de imuno-compatibilidade do órgão do doador e do transplantado. Diabetes - para infunfir o pâncreas com novas células produtoras de insulina.  Cegueira - para repor as células da retina.  Danos na medula espinhal - para reposição das células neurais da medula espinhal.  Doenças renais - para repor as células, tecidos ou mesmo o rim inteiro.  Doenças hepáticas - por repor as células hepáticas ou o fígado todo. 
OS RESULTADOS DOS ENSAIOS QUE UTILIZAM TECNICAS DE ANÁLISE DOS ÁCIDOS NUCLEICOS PODEMSER ÚTEIS NO DIAGNOSTICO, PROGNOSTICO, DETERMINAÇÃO DA TERAPIA A SER UTILIZADA E ATÉ MESMO NA AVALIAÇÃO DA SUSCETIBILIDADE A DOENÇAS. SOBRE ESTES RESULTADOS COMENTE CADA UMA DAS AFIRMATIVAS ABAIXO:
Na área de doenças infecciosas, detecção rápida de microorganismos de crescimento lento, ou daqueles na cultiváveis se torna possível através das técnicas de biologia molecular
A DETECÇÃO DE DOENÇAS INFECCIOSAS É POSSÍVEL POR TERCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR( HIBRIDIZAÇÃO IN SITU, SOUTHERN E NORTHERN BLOT, POR EX) POIS ELAS IDENTIFICAM AS SEQUENCIAS ESPECÍFICAS DE NUCEOTÍDEOS QUE PODEM CONTER O MATERIAL GENETICO DO PATOGENO, PODENDOIDENTIFICAR ATÉ NO PERÍODO DE INCUBAÇÃO, ONDE OCORRE A REPLICAÇÃO DESSE MATERIAL VIRAL, POR MÍNIMA QUANTIDADE QUE SEJA, JÁ QUE ISSO PODE SER AMPLIFICADO. UM DOS EXEMPLOS É A PCR EM TEMPO REAL, QUE QUANTIFICA CARGA VIRAL E É USADA PARA MONITORAMENTO EM DOENÇAS RESIDUAIS MÍNIMAS. AS TÉCNICAS SÃO MUITO PRECISAS E JUNTAMENTE COM OS EXAMES COMPLEMENTARES, PODE DETECTAR DIVERSOS GRAUS DE INFECÇÃO. 
Na área da genética humana, a biologia molecular tornou-se ferramenta fundamental no diagnostico das doenças monogênicas, permitindo não só a identificação do gene afetado, mas também da mutação responsável pela doença.
EM DOENÇAS MONOGÊNICAS, A BIOLOGIA MOLECULAR PODE SER EMPREGADA PARA IDENTIFICAÇÃO DO GENE AFETADO E DA MUTAÇÃO RESPONSÁVEL POR TECNICAS QUE AMPLIFICAM AS ENZIMAS DO DNA, PERMITINDO UMA RÁPIDA GENOTIPAGEM DOS POLIMORFOS E MUTAÇÕES ALEM DE RASTREÁ-LOS; A TÉCNICA DE FISH LOCALIZA ESSES MARCADORES MOLECULARES. ISSO ENVOLVE ANEMIA FALCIFORME, FIBROSE CISTICA, HEMOFILIA. EM FIBROSE CISTICA, A PCR É FEITA PARA ENSAIOS, SENDO FEITA A DISCRIMINAÇÃO ALÉLICA POR TAMANHO, ONDE PEQUENAS DELEÇÕES OU INSERÇOES NOS ALELOS PODEM SER DETECTADAS, E PELA SUSCETIBILIDADE DAS ENZIMAS DE RESTRIÇÃO, QUE PODEM SER ALTERADA SUA LOCALIZAÇÃO OU FORMA PELA MUTAÇÃO. A TÉCNICA TAMBEM UTILIZADA PARA DOENÇAS MONOGENICAS É A GOLD STANDART.
O QUE É TERAPIA GÊNICA ? QUAIS DOENÇAS PODEM SER TRATADAS E QUAIS NÃO PODEM ?
A terapia gênica (TG) é um tratamento para doenças hereditárias que se caracteriza pela inserção de um gene funcional dentro da célula humana a fim de conferir uma nova função ou melhorar os efeitos de um gene anormal.
TRATA: Doenças hereditárias, como : Anemia Falciforme, fibrose cística
NÃO TRATA: Doenças multigenicas ou multifatoriais como: doenças do coração, pressão alta, mal de Alzheimer, artrite e diabetes.
O QUE É NECESSÁRIO PARA UM VETOR SER CONSIDERADO IDEAL:
é necessário a capacidade de acomodação de um transgene, baixo custo, ser facilmente produzido e manipulado, baixa imunogenicidade e citotoxicidade, apresentar expressão estável, ser facilmente direcionado para células e tecidos.
PROBLEMAS DA TERAPIA GÊNICA
 Problemas com a eficiência da implantação dos genes substitutos 
(inserção em locais cromossômicos aleatórios);  Problemas de direcionamento do vetor do gene para as células 
desejadas (células alvo);  Retirada das células alvo – terapia ex vivo;  O sistema imune é um dos maiores obstáculos à terapia gênica em razão das acentuadas respostas imunes aos vetores virais;  Vetores mais interessantes – Adnovírus (AVV) e lentivírus (HIV).
DESCREVA COMO SÃO OBTIDAS AS CELULAS TRONCO PLURIPOTENTES INDUZIDAS E A QUE SE DESTINAM.
TÉCNICA PARA OBTER: (1)As células doadoras são isoladas e cultivadas. 
(2)Transferem-se os genes das células-tronco associadas para as células doadoras por meio de vetores virais. As células vermelhas indicam as células que manifestam os genes exógenos. 
(3)As células cultivadas são colhidas de acordo com estratégias de cultivo de células-tronco, pela utilização de fibroblastos mitoticamente inativos (cor cinza claro)
(4)Um pequeno subgrupo dessas células transfectadas tornam-se células-tronco pluripotente induzidas e a partir desse momento produzem colônias de células-tronco.
O QUE SÃO CELULAS TRONCO PLURI.. INDUZIDAS
São células somáticas adultas reprogramadas para entrarem em um estado de célula tronco pluripotente, por ter sido forçadas a expressar fatores importantes para a manutenção do "stemness"de células-tronco embrionárias
Elas possuem vantagem por poder ser introduzida no próprio indivíduo que as forneceu ...Essa possibilidade (de realizar transplantes autólogos) é muito interessante pois descarta o problema de imuno-compatibilidade do órgão do doador e do transplantado. Diabetes - para infunfir o pâncreas com novas células produtoras de insulina.  Cegueira - para repor as células da retina.  Danos na medula espinhal - para reposição das células neurais da medula espinhal.  Doenças renais - para repor as células, tecidos ou mesmo o rim inteiro.  Doenças hepáticas - por repor as células hepáticas ou o fígado todo. 
Transplante nuclear para gerar células tronco embrionárias: ÓVULO FERTILIZADO, EMBRIÃO DE 8 DIAS, BLASTOCISTO= PLURIPOTENTES, podendo diferenciar-se em neurônio, musculo, cel do sangue
DOENÇAS TRATADAS COM CELULA TRONCO: diabetes, esclerose, infarto, distrofia muscular, Alzheimer e Parkinson.
CELULAS TRONCO EMBRIONÁRIAS: essas cels são coletadas da massa celular interna do embrião jovem, podem proliferar indefinidamente cultura e ainda reter um potencial de desenvolvimento restrito
CLONAGEM- é a produção de indivíduos geneticamente iguais. É um processo de reprodução assexuada que resulta na obtenção de cópias geneticamente idênticas dum mesmo ser vivo- microorganismo, vegetal ou animal. É possível criar o clone a partir de uma célula DIFERENCIADA SOMÁTICA.
VACINAS Vacina 1º geração: Injeta um org completo (BCG) Vacina 2º geração: pedaço de um organismo
1º GE= Utilizam antígenos mortos ou atenuados para forçar o organismo a desenvolver imunidade
2º GE= São denominadas acelulares e utilizam geralmente toxinas dos antígenos para promover a imunidade.
3º GE= utilizam informações genéticas dos antígenos responsáveis para induzir a imunização ativa.
AS VACINAS DE 2º E 3º GERAÇÃO SÃO MAIS SEGURAS, EM FUNÇÃO DOS AVANÇOS QUE INCORPORAM.
2 As subunidades essenciais que compõe o DNA e o produto imediato de transcição são----- NUCELOTÍDEOS E RNA
1 A tec do DNA recombinante permitiu a inserção e a expressão em bactérias, gene humano responsável pela síntese de insulina. INCORRETA--- independência do pâncreas de animais p/ produção de insulina
3 um organismo genet modif que pode passar seus novos genes de descendência é dito----TRANSGÊNICO
5 A biotecnologia rejuvenesceu com a revolução da engenharia genética----feijão e lentilha
6 testes de DNA para determinação de paternidade--- I e II
7 muitos explos q envolveram organismos transgênicos---- os produtos alimenticeos genet modif são testados em camundongos
8 com relação a prod transg é possível afirmar q ---são org q possuem parte de sua formação genet proveniente de outro ser vivo
9 um dos assuntos polêmicos da atual é a prod de aliment transg cmo resultado----- A MODIFICAÇÃO DE ORG ATRAVEZ DE TEC DE ENG GENET CONSISTE EM TRANSF DE GENE DE UMA ESPECIE PARA OUTRA
10 definição de clone--- população de cel originadas de uma única célula que são idênticas entre si
11- Maria manteve relações sexuais --- permitiu que o juiz identificasse Alfredo como filho de um dos gêmeos dizigóticos.
14 entre as linhagens de cel mais promissoras a serem desenvolvidas---- essas cels são coletadas da massa celular interna do embrião jovem, podem proliferar indefinidamente...
17 Em 1928 Sir Alexander Fleming--- Todas as moléculas citadas
19”a ativação dos genes...” OGM PODEM TER QUALQUER ALTERAÇÃO DE SEU DNA......
20 Na agricultura a uniformidade entre plantas cultivadas---- coleção de germoplasma
21 os transg estão sendo amplamente estudados pela embrapa ---- cana de açúcar
Clonagem Dolly representou marco na biologia/provouque é possível criar um mamífero adulto a partir de uma cel isolada/introduziu novos desafios éticos/ foi criada por meio de clonagem reprodutiva. IMPORTANCIA: Antes da Dolly os cientistas já tinham obtido embriões de ovelha a partir da fusão de uma célula blástula com oócito anucleado. Experimentos com rãs já tinham provado que uma célula animal adulta poderia readquirir sua totipotência e formar um novo organismo. Problemas Um embrião formado por transferência de um núcleo de célula adulta apresenta o mesmo número de cromossomos (2n) que a célula-ovo fertilizada (zigoto). No núcleo de uma célula adulta a maioria dos genes está inativada .É necessário que haja reprogramação completa do material genético 
Clone: O termo pode ser empregado para designar diferentes processos de duplicação do material biológico. Transferência de um fragmento de DNA, de um organismo para um vetor, com a finalidade de multiplicá-lo em inúmeras cópias dentro de uma célula hospedeira.
Clonagem reprodutiva:Processo de gerar um animal com exatamente o mesmo DNA nuclear que outro animal.
Clonagem Natureza:quando uma planta emite um ramo que desenvolve raízes e gera uma nova planta. A segunda planta é geneticamente igual a primeira e originou por rep assexuada.
Trasnf. Nuclear: óvulo>cultura de cel de gland.mamária>Remoção do núcleo>5 dias em meio de Cult pobre>cel em est de dormência>fusão das memb cel por eletroporação>6dias em Cult>implantação em fêmea recipiente>5 meses>nascimento do clone.
Clonagem terapêutica (embrionária):É a produção de embriões para pesquisa. Realizada da mesma forma que a clonagem reprodutiva, mas com propósito completamente diferente. Recuperar células-tronco (pluripotentes). Usadas no tratamento de doenças. 
Células-tronco: São capazes de se diferenciar em qualquer um dos 216 tecidos que formam o corpo humano/ Podem substituir células degeneradas em pacientes. O processo de extração das células-tronco destrói o embrião.
Riscos da clonagem : Taxa de sucesso ainda muito baixa (1%) . Diferentes espécies apresentam diferenças no desenvolvimento do embrião durante os primeiros estágios Reprogramação incompleta ou inadequada do material genético. Pode causar alterações na expressão gênica. Pode provocar anormalidades nos fetos. Desenvolvimento da placenta anormal. Aumento do peso e gestação prolongada .Alterações no sistema imunológico .Tumores .Artrite .Anemia .Morte súbita .Envelhecimento precoce.
Células Tronco Embrionárias: Essas células são coletadas da massa celular interna do embrião jovem, podem proliferar indefinidamente em cultura e ainda reter um potencial de desenvolvimento irrestrito, só podem ser encontradas nos embriões humanos e são classificadas como totipotentes ou pluripotentes, dado seu alto poder de diferenciação.
As células totipotentes são encontradas nos embriões nas primeiras fases de divisão, isto é, quando o embrião tem até 16 - 32 células, que corresponde a 3 ou 4 dias de vida;
Pluripotentes ou multipotentes, aquelas células capazes de diferenciar-se em quase todos os tecidos humanos, excluindo a placenta e anexos embrionários, ou seja, a partir de 32 - 64 células, aproximadamente a partir do 5º dia de vida, fase considerada de blastocisto.
Tec. DNA Rec: tec central é a clonagem molecular, a qual consiste no isolamento e propagação de mol de DNA idênticas.
Gene: Segmento de DNA que codifica uma proteína
DNA: guarda toda a informação de um organismo
Transcrição: Transcreve a informação de uma linguagem para outra, em seguida há uma edição onde são retirados as partes que não interessam
PCR: sequencia iniciadora(primer)adição das bases complementare–dNTP. Quando acaba as bases, acaba a PCR
Organismos transgênicos: são aqueles que apresentam algum tipo de gene modificado, isto é, um gene que codifica para uma proteína nesse organismo foi transformado para codificar outra proteína.