AULA 02 MICRO E IMUNOLOGIA

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD 
 
AULA 02 
 
DATA: 
09/ 03/ 2019 
 
 VERSÃO:01 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA–Aula 02 
 
NOME: Kácia Acinara M. M. da Cruz MATRÍCULA: 01272265 
CURSO: Enfermagem POLO: Quintino 
PROFESSOR (A) ORIENTADOR (A): Ronald Cristóvão de Souza Mascarenhas 
 
TEMA DE AULA: CONTAGEM DE LEVEDURAS POR DILUIÇÃO SERIADA 
 
RELATÓRIO: 
 Segundo Martins (2014), a diluição seriada é a técnica que permite a contagem do 
número de microrganismos de amostras com concentrações muito elevadas. 
 Considerando-se que cada colônia de bactérias formada sobre um meio de cultivo se 
origine de uma unidade formadora de colônia (cadeia ou grumo de bactérias), quando a 
concentração de microrganismos inoculados é muito grande, haverá o crescimento de colônias 
de maneira sobreposta impossibilitando a contagem. A amostra deve então ser diluída seriada 
mente para que a concentração de microrganismos diminua, dando origem a colônias 
suficientemente separadas, possibilitando a contagem. Assim, a determinação do número de 
microrganismos da amostra original multiplica-se o número de colônias formadas a partir da 
amostra diluída, pelo volume de diluição. 
A diluição é feita a partir de 225 ml de um diluente adequado para a matriz da amostra 
trabalhada (Água peptonada 0,1% para lácteos e Solução salina 0,1% para cárneos) aos quais 
são adicionados 25g da amostra, sendo esta a diluição inicial. 
 A partir de então se transfere 1 ml da diluição anterior para um tubo de ensaio 
contendo 9ml de diluente apropriado, sucessivamente, até obtenção de diluição que contenha 
a quantidade de inoculo contável (Figura 1). 
 A preparação da diluição seriada é o cerne da análise da contagem padrão em placa, 
que tem por finalidade fornecer um número viável de organismos em uma determinada 
amostra. 
O cultivo em placas mais utilizados são por meio de semeadura em superfície e pour-
plate (OLIVEIRA, ?), podendo microrganismo ser isolado posteriormente pela técnica de 
esgotamento. Os resultados das contagens são expressos em notação científica. 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD 
 
AULA 02 
 
DATA: 
09/ 03/ 2019 
 
 VERSÃO:01 
 
Figura 1: Demonstração esquemática da diluição seriada (OLIVEIRA, ?) 
 
 
Em aula, foi trabalhada uma amostra de fermento biológico seco (Saccharomyces 
cerevisae), processada de acordo com o protocolo descrito acima, e inoculada pela técnica 
pour-plate em meio Agar Sabouraud Dextrose, colocando-se 1 ml de cada diluição em 
placa, cobrindo-a com ágar e homogeneizando. A técnica segue com incubação em 
estufa bacteriológica (não disponível na unidade). Havia placas já cultivadas disponíveis para 
contagem sendo contadas 23 colônias na placa identificada com diluição 10
4
. 
 Segue cálculo para emissão de resultado: (registro de imagens em apêndice). 
 
N= Número de colônias contadas (ufc) x Diluição selecionada (positiva) 
Volume inoculado 
N= 23 ufc x 10
4 
1 
N= 2,3 ufc x 10
5 
 
 
REFERENCIAS: 
 
MARTINS, L. Microbiologia. 35 ed. Porto Alegre: Artmed, 2014. 
OLIVEIRA, L. S. Análise microbiológica de Alimentos: Legislação e Métodos de Análise. 
Disponível em: https://slideplayer.com.br/slide/12544843/. Acesso em: 11 mar.2019. 
SEHNEM, N. T. (Org.). Microbiologia e imunologia. – São Paulo: Pearson Education do 
Brasil, 2015. (Coleção Bibliografia Universitária Pearson). 
 
 
 
 
 
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AULA 02 
 
DATA: 
09/ 03/ 2019 
 
 VERSÃO:01 
TEMA DE AULA: COLORAÇÃO DE GRAM 
 
RELATÓRIO: 
 A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação 
inicial das bactérias. Esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no 
microscópio, uma vez que sem a coloração é impossível observá-las ou identificar sua 
estrutura. 
O método recebeu esse nome em homenagem ao patologista Hans Christian Joachim 
Gram que realizou a descoberta em 1884 e até hoje continua sendo a mais utilizada nos 
laboratórios de análises clínicas e microbiologia. Através da técnica de coloração é possível 
identificar e diferenciar os dois principais grupos de bactérias, Gram-positivas e Gram-
negativas. 
O procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com 
base nas diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular. O uso dos corantes 
permite aumentar o contraste e evidenciar a estrutura bacteriana. 
É considerado o procedimento mais importante da microbiologia, sendo eficaz na 
identificação de bactérias de importância clínica, auxiliando inclusive na escolha do 
antibiótico a ser usado no tratamento (LEVINSON, 2016). 
O procedimento de coloração de Gram envolve 3 etapas principais: 
1. Coloração com cristal violeta (um corante solúvel em água, roxo); 
2. A descoloração (utilizando etanol / acetona); 
3. A contra coloração (utilizando corante Safranina, vermelho). 
A técnica foi aplicada em aula, e pode-se visualizar tanto bactéria Gram-positiva 
quanto Gram-negativa. 
A bactéria Gram-positiva visualizada foi a Staphylococcus. 
A bactéria Gram-negativa foi a Escherichia. 
 
REFERENCIAS: 
LEVINSON, W. Microbiologia médica e Imunologia. Tradução: Daian, D. S. de O. Porto 
Alegre: AMGH, 2016. 
SEHNEM, N. T. (Org.). Microbiologia e imunologia. – São Paulo: Pearson Education do 
Brasil, 2015. (Coleção Bibliografia Universitária Pearson).