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Centro Universitário Estácio de Belo Horizonte Unidade Floresta Biotecnologia Professora Valéria dos Santos Carvalho RELATÓRIO Aula prática de Antibiograma. Aluna: Mary aparecida da Silva Matricula 201802346392 Sabrina de Almeida Silva Matricula 20181077861 Período 3° Turma – 1006 Curso - Biomedicina Belo Horizonte 2019 1.Introdução. Antibiograma. O antibiograma, também conhecido por Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA), é um exame capaz de determinar a sensibilidade da bactéria aos antibióticos, podendo indicar ao médico qual o antibiótico mais aconselhado para tratar a infecção do paciente. Antibiograma por difusão em ágar: neste procedimento são colocados pequenos discos de papel que contêm diferentes antibióticos na placa onde as bactérias crescem. Após algumas horas observa-se se existiu crescimento de bactérias em voltas dos discos e na ausência de crescimento bacteriano, descobre-se qual o antibiótico mais adequado. Antibiograma baseado em diluição: neste procedimento existe um recipiente com várias diluições de antibiótico com doses diferentes, onde são colocadas as bactérias que serão analisadas. No recipiente onde não houve crescimento bacteriano, é que está a dose correta do antibiótico. Atualmente existe o antibiograma automatizado em que resultado é obtido através de um equipamento informático que verifica o efeito dos antibióticos sobre as bactérias e indica o melhor tratamento para tratar a infecção. 1 2. Objetivos. O objetivo desta aula foi demonstrar de forma prática como fazer o teste de antibiograma – teste de sensibilidade dos microrganismos aos agentes antimicrobianos. 2 3.Materiais. 2-Swab 1-Placa de petri com Agar nutritivo 1-Cultura bacteriana crescida 1-frasco de solução fisiológica 1-Lamparina (esterilizante) 1-Tubo de ensaio 1- Caixa de fosforo 1-Estante para tubos de ensaio Discos de antibióticos. 1 - Pinça 3 4.Métodos Procedimento. Agitar bem a cultura bacteriana. Que foi colocada em tubo de ensaio com solução fisiológica. Umedecer o Swab na suspensão bacteriana, retirando o excesso ao apertar o Swab contra a parede interna do tubo Espalhar a suspensão bacteriana em toda a superfície do meio de cultura, de modo homogêneo, inclusive nas bordas Colocar os discos de antibióticos com auxilio de pinça sobre a superfície do meio e de modo equidistante- usar 4 antibióticos por placa. Incubar a placa a 37 graus C por 18 horas. Utilizando um Swab aplicar por toda a superfície da placa de Petri a cultura bacteriana crescida. Aplicar os discos de antibióticos na superfície da placa utilizando a pinça. 4 5.Resultados. A leitura e interpretação serão avaliados na próxima aula. O resultado do antibiograma pode demorar até cerca de 3 a 5 dias, e é obtido através da análise do efeito dos antibióticos no crescimento das bactérias. O antibiótico que inibir o crescimento das bactérias é o indicado para tratar a infecção. 6. Conclusão. Serão observados a presença de halo de inibição ao redor dos discos. E a verificação sobre o microrganismo ser resistente, parcialmente resistente ou sensível aos antibióticos colocados na placa. 6 Respostas dos exercícios: Que procedimentos deveriam ser tomados para a determinação da concentração inibitória (MIC) dos antibióticos? Resposta: Na microbiologia, a concentração inibitória mínima (CIM) é a concentração mais baixa de um produto químico que impede o crescimento visível de uma bactéria (ou seja, que tem atividade bacteriostática), enquanto que a concentração bactericida mínima (MBC) é a concentração que resulta na morte microbiana. Que fatores podem interferir no perfil de sensibilidade a antibióticos em uma linhagem bacteriana? Resposta: O antibiótico que inibir o crescimento das bactérias é o indicado para tratar a infecção, mas caso as bactérias cresçam e os antibióticos não tenham efeito, indica que a bactéria não é sensível àquele antibiótico. Um exemplo muito comum é o antibiograma realizado para infecções urinárias. A resistência a antibióticos expressos por uma linhagem bacteriana pode ser considerada um fator de virulência? Justifique. Resposta: A resistência bacteriana aos antimicrobianos está aumentando de prevalência no mundo todo. Este acúmulo reflete o desenvolvimento de novos mecanismos de resistência, a transferência dos genes de resistência entre as bactérias e a propagação das linhagens resistentes entre os pacientes. A importância relativa destes fatores depende da combinação da espécie com os antimicrobianos, mas cada processo é determinado pela pressão seletiva do uso de antimicrobianos. Quais são os halos para os demais antibióticos (Resistente, intermediário e sensível), que não estão descritos na tabela de Kirbe & Bauer. Resposta: Resistente: significa que a bactéria analisada apresenta resistência ao antibiótico utilizado e a eficácia da droga está comprometida, não exercendo efeito satisfatório no controle da doença. Intermediário: Significa que a bactéria analisada apresenta resistência intermediaria ao antibiótico utilizado no disco e a eficácia da droga esta suspeita de estar comprometida, podendo não exercer efeito satisfatório no controle da doença. Sensível: Significa que a bactéria analisada apresenta susceptibilidade ao antibiótico utilizado no disco e é aconselhável a utilização do antibiótico para combater a doença, causada pela bactéria analisada. 7 8. Referências. https://www.tuasaude.com/antibiograma/ 2- Apostila de aulas práticas: Fundamentos de Microbiologia e Imunologia. 3-https://www.google.com/search?q=foto+de+antibiograma&tbm=isch&source=iu&ictx=1&fir=RKBfwQz3LNk6TM%253A%252CMse8RaPCIdYNlM%252C_&vet=1&usg=AI4_-kQMs24DLUvLLSCvnPXPFkBuzX8X2A&sa=X&ved=2ahUKEwiLpM-RrfPhAhX_GbkGHcdwDCAQ9QEwAHoECAkQBA#imgrc=NI2vd04sqil-_M:&vet=1 https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/handle/1884/15458/texto%20da%20tese3.pdf?sequence=3 7 Sumario Introdução.................................................................................1 Objetivos....................................................................................2 Materiais....................................................................................3 Metodos......................................................................................4 Resultados..................................................................................5 Conclusão...................................................................................6 Respostas do exercício...............................................................7 Referencias Bibliográficas........................................................8