Resumo tipos de ELISA

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Métodos competitivos de ELISA
Utilizados na detecção de antígenos
Resultado positivo: ausência de cor
ELISA competitivo com antígeno marcado
Contém anticorpos imobilizados na fase sólida, onde o soro do paciente será colocado.
O antígeno da amostra compete com o antígeno marcado para se ligar aos anticorpos da fase sólida.
ELISA competitivo com anticorpo marcado
Contém antígenos imobilizados na fase sólida.
O antígeno da amostra compete com o antígeno da fase sólida pelo anticorpo conjugado livre.
Métodos não-competitivos de ELISA
Podem ser utilizados para detectar antígeno ou anticorpo
Resultado positivo: presença de cor
Pesquisa de antígeno:
ELISA de captura de antígeno (sanduíche)
Anticorpo específico fixo na fase sólida
Após a lavagem é adicionado um segundo anticorpo específico marcado com enzima, que se liga ao substrato cromogênico.
Pesquisa de anticorpo:
ELISA indireto
Contém antígeno de interesse fixado na fase sólida.
Utiliza um conjugado de anti-Ig marcado com enzima.
Após a adição da amostra é feita uma lavagem, seguida pela adição do Anti-Ig marcado.
Quanto mais intensa a cor, maior a quantidade de anticorpo presente na amostra.
ELISA de captura de Ig específica
Geralmente utilizado com IgM
Possui anti-Ig específico para a classe Ig fixado na fase sólida, ao qual a Ig da amostra irá se ligar.
São adicionados antígenos marcados após a lavagem.
Pode ser usado um anticorpo específico marcado, que irá se ligar ao antígeno ligado ao anticorpo da amostra.
ELISA sanduíche
Possui antígenos específicos na fase sólida.
Anticorpos da amostra se ligam aos antígenos da fase sólida.
Após lavagem, é adicionado o anti-Ig marcado com enzima, que se liga ao anticorpo ligado ao antígeno.