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Slide 1 O Q U E A T R A V E S S A A S M E M B R A N A S T I P O S D E T R A N S P O R T E : D I F U S Ã O , M E D I A D O E A C I N É T I C A D E C A D A T I P O A E N E R G I A E N V O L V I D A E X E M P L O S M A I S C O M U N S Movimento de moléculas através da membrana ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 2 A natureza restritiva da membrana Íons não => necessita da mecanismos especiais para K+, Na+, Cl- e HCO3 -. Etapas do movimento através da membrana (1) Soluto sair do meio aquoso (2) entrar e atravessar a membrana (3) sair da membrana para o lado oposto ao inicial => Cada etapa envolve um equilíbrio de 2 estados => influenciado por fatores termodinâmicos e cinéticos. LADOLADO ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 3 Difusão Conceito geral Aplicado a membranas: velocidade solubilidade no meio hidrofóbico => Coeficiente de difusão lipídica. H2O: poros que excluem outras substâncias pelo tamanho; ou “gaps” na porção lipídica. Na direção do gradiente de concentração 1ª Lei de Fick – taxa ou fluxo da difusão=m/t= J = - D.A(C/x), onde de é o coeficiente de difusão, C concentração e espaço a percorrer (distância) e A é a área onde ocorre a difusão. Se C => velocidade. Se C iguais nos dois lados => velocidade é cte ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 4 Transporte mediado Características específicas de cada célula para o transporte Proteínas integrais de membrana: translocases, transportadoras, „porter‟, permeases ou sistema de membrana. Algumas „bombas‟. Com alto grau de especificidade pelo soluto a ser transportado. se S1 soluto no lado 1 e S2 soluto no lado 2, então [S1][S2] para atingir o equilíbrio então: [S1] + T [S-T] [S2] + T No equilíbrio [S1] = [S2] ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 5 2 tipos de transporte mediado Mecanismo mediado passivo Mecanismo mediado ativo Tem cinética de saturação Idem Especificidade no soluto a ser transportado Idem Cinética de inibição* Idem O soluto move a favor do gradiente de concentração O soluto move contra o gradiente de concentração Não despende energia para o transporte Despende energia para realizar o transporte * O que mais acentua a diferença da difusão Cinética de saturação e especificidade igual à enzimas onde se definem constantes de KM e VMÁX. E ainda em inibição competitiva e não competitiva. ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 6 Comparando a cinética do movimento de solutos por difusão e transporte de soluto mediado Velocidade do movimento através de uma membrana TRANSPORTE MECIADO DIFUSÃO CONCENTRAÇÃO DO SOLUTO A ATRAVESSAR ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 7 Reconhecimento: Transporte: Liberação: Recuperação: ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 8 Hipótese Expansão da equação Reconhecimento (semelhante Enzimas) Transporte (várias hipóteses: simples difusão do transportador ou mudança conformacional) Liberação (simples equilíbrio de a favor do gradiente, ou se contra gradiente perda da afinidade por T2 ou mudança no soluto. Recuperação (equilíbrio de formas) Transporte mediado Reconhecimento: Transporte: Liberação: Recuperação: ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 9 Mecanismo proposto de modificação conformacional da proteína transportadora Reconhecimento: Transporte: Liberação: Recuperação: LADO LADO ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 10 Tipos de transportadores segundo direção e solutos Eletrogênicos: se gerar separação de cargas através da membrana (transporte de Na+, K+ e íons orgânicos Se move-se um contra íon na mesma direção é neutro ou silecioso. Uniporte Simporte Antiporte LADO LADO ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 11 Energia dos sistemas de transporte Energia necessária para realizar o trabalho. (intrínseca que o sistema tem que ter ou oferecer para realizar). C1 >C2 a favor do gradiente => G < 0 C1<C2 contra o gradiente => G>0 Energia livre de “GIBBS” se C1 C2 ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 12 Quando envolve transporte de carga em quantidades diferentes Onde R=cte universal dos gases = 1,9 cal.mol-1.k-1 Z = carga da espécie em movimento F = 23,063 kcal.V-1.mol-1 = diferença em potencial elétrico em volts através da membrana. Potencial eletroquímico ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 13 Transporte mediado passivo e ativo Não necessita de energia: PASSIVO Igual difusão com cinética de saturação Necessita fornecer energia: ATIVO Hidrólise de ATP Gradiente eletroquímico (tipo de Na+ e K+, ou H+) Exemplo: pH estômago Intracelular=7,4 (4x10-8M) Extracelular=0,8 (0,15M) ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 14 Grupo de translocação Problemas da liberação contra gradiente de concentração No transporte mediado (principalmente ativo) onde precisa liberar o soluto no lado 2. ALTERAR O SOLUTO ANTES DE SER LIBERADO => PERDE AFINIDADE PELO TRANSPORTADOR, ENTÃO É LIBERADO; ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 15 Transporte de aminoácidos contra gradiente glutationa Ciclo do -glutamil-transferase ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 16 Canais e Poros Se diferenciam os canais dos poros pela especificidade em relação ás moléculas que atravessam a membrana. São proteínas intrínsecas Canais são seletivos para cátions e ânions inorgânicos específicos; (superfamilia de proteínas) Poros: não são seletivos; permitem a passagem sem especificidade; Diferença devida à diferentes tamanhos das áreas aquosa na estrutura da proteína, e os resíduos de aminoácidos presentes dentro desta região ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 17 Canais Abertura e fechamento controlado Efeito: mudança na estrutura da proteína; Causa: Ex: Canais voltagem dependentes Condução nervosa, contração muscular. Acionados por agonistas (ativador) ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 18 Canais De sódio: voltagem sensível Na+ intracelular após a despolarização da membrana em células nervosas e musculares; ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 19 Poros ou junções tipo Fenda (Gap junctions) Aberturas grandes Conectam 2 células: troca de metabólitos pequenos e íons e não moléculas grandes; Normalmente abertos. Fecham por Ca2+ intracelular, alteração de metabólitos, queda no potencial transmembrãnico ou acidificação do citoplasma; Oligômero de peptídeo chamado de conexina (12 x 32kDa); 90 Å de diâmetro Em bactérias gran-negativas = Porinas (6 – 23 Å) ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 20 Ionóforos Foram descobertos como antibióticos; Movimento de íons mono e di valentes inorgânicos Não são proteínas. São moléculas pequenas. Dois grupos: Carreadores móveis Semelhantes a canais Atuam na mudança da fluidez São específicos São quelantes de íons (retiram camada de solvatação) Difundem-se livremente na membrana; ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 21 Ionóforo ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 22 Em eritrócitos Membrana interna da mitocondria Transporte mediado passivo: antiporte a concentração de um soluto dirige o movimento do outro ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 23 Transporte mediado ativo: acopla energia ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 24 Na+-K+ ATPase (bomba) Lado extracelular 40 kDa glico proteina Lado citossolico 95 kDa ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 25 ATPase Na+ - K+ 1 ATP para 3 Na+ sair e 2 K+ entra => gera potencial de membrana +; Gasta 60-70% do ATP da célula ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ Slide 26 Na+- dependente sistema simporte Transporte ativo conduzido pelo gradiente de sódio formado. Para transporte de açúcares e aminoácidos; Túbulos renais e epitélio intestinal ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________
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