III Unidade INTRODUÇÃO Dosagem de Colesterol e Trigliceridio (1)

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHÃO
CCBS- CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FISIOLÓGICAS
CURSO DE FARMÁCIA
PROF. DRª ANA PAULA SILVA DE AZEVEDO DOS SANTOS
DOSAGEM DE TRIGLIGERÍDEOS E COLESTEROL
Anna Beatriz Soares Freitas
Emylly Dhayara da Silva
Gabriel Silva Abrantes Reis
Mychely Martiliano Nunes
Sandy Mara da Silva Souza 
São Luís
2019
1 INTRODUÇÃO
O colesterol é o esteroide característico dos tecidos animais e desempenha várias funções essenciais no organismo. Por exemplo, o colesterol é componente de todas as membranas celulares, modulando sua fluidez e, em tecidos especializados, é o precursor de ácidos biliares, hormônios esteroides e da vitamina D. (CHAMPE,2011)
Portanto, é muito importante para o organismo manter um suprimento contínuo de colesterol. Um complexo sistema de transporte, biossíntese e mecanismos regulatórios estão envolvidos no atendimento dessa necessidade. (CHAMPE,2011)	
O colesterol pode também ser enviado para os tecidos periféricos como componente das lipoproteínas plasmáticas. Em humanos, o balanço entre o influxo e o efluxo de colesterol não é meticuloso, resultando em sua deposição gradual nos tecidos, particularmente no endotélio vascular. Essa ocorrência se torna um fator potencial de risco, quando a deposição de lipídeos leva ao estreitamento dos vasos, com formação de placas (aterosclerose), aumentando o risco de doença arterial coronariana (DAC). (CHAMPE,2011)
O colesterol é insolúvel em água e, consequentemente, insolúvel no sangue. Para ser transportado através da corrente sanguínea ele liga-se a diversos tipos de lipoproteínas. As duas principais lipoproteínas usadas para diagnóstico dos níveis de colesterol são as Lipoproteínas de baixa densidade e Lipoproteínas de alta densidade
Lipoproteínas de baixa densidade (Low Density Lipoproteins ou LDL): acredita-se que são a classe maléfica ao ser humano, por serem capazes de transportar o colesterol do fígado até as células de vários outros tecidos. Lipoproteínas de alta densidade (High Density Lipoproteins ou HDL): acredita-se que são capazes de absorver os cristais de colesterol, que começam a ser depositados nas paredes arteriais/veias (retardando o processo arterosclerótico). (LEHNINGER, 2006)
Triglicérides, ou triglicerídeos, são um tipo de gordura, composto por uma molécula de glicerol e três moléculas de ácidos graxos. Os triglicérides são a principal forma de estocagem de energia dos animais. Os triglicérides são tipos de gorduras que podem ser produzidas pelo organismo ou ingeridas através dos alimentos. Assim como o HDL, LDL, os triglicérides quando encontram-se em níveis alterados no sangue podem causar prejuízos à saúde, principalmente se este aumento estiver associado ao aumento das frações de colesterol citadas. (LEHNINGER, 2006)
Níveis elevados de triglicérides na corrente sanguínea estão associados ao aparecimento de doenças coronarianas e por esse motivo todos devem ter consciência do quanto é importante ter as taxas de triglicérides dentro do limite recomendado
As gorduras desempenham papéis importantes em nosso organismo, como fornecer energia ao corpo e proteger os nossos órgãos. A camada de gordura isola o organismo, preserva o calor do organismo e mantém a sua temperatura do mesmo. A gordura também auxiliam no transporte e absorção das vitaminas lipossolúveis, A, D, E e K. (LEHNINGER, 2006)
Triglicérides são a forma de armazenamento energético mais importante no organismo, constituindo depósitos no tecido adiposo no tecido muscular. Porém, o excesso de gordura na alimentação pode ser bastante prejudicial à saúde.
A dosagem de triglicérides pode ser realizada para estudar o metabolismo lipídico, para calcular o VLDL-colesterol, para determinar o risco de pancreatite, para avaliar eventual hipertrigliceridemia secundária ao uso de drogas anti-hipertensivas e para analisar a eficiência de tratamentos de redução dos níveis dessa gordura. Considerando que há grande variação biológica, de cerca de 20%, é importante que o raciocínio clínico não se baseie em dosagens isoladas. Mudanças na dieta e na atividade física e o uso de bebidas alcoólicas são as causas mais frequentes de grandes variações nos níveis de triglicérides.
2 OBJETIVO
Determinar triglicerídeos e colesterol em amostra de soro.
3 MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 MATERIAIS
• Tubos de ensaio
• Banho Maria
• Espectrofotômetro
• Sangue (soro)
• Kit para dosagem de colesterol
• Pipeta
• Pipetador e ponteira
3.2 METODOLOGIA
Para dosagem de triglicerídeos e colesterol foram utilizados três tubos de ensaio para cada dosagem, totalizando 6 tubos, os quais foram identificados por B (branco), A (amostra) e P (padrão). Em cada tubo foram pipetados 2 ml do reagente. No tubo P, foi adicionado ainda, com o auxílio de pipetador e ponteira, 20 uL da solução padrão do kit; e no tubo A, 20 uL da amostra. 
Após esse processo, os tubos foram agitados e colocados em banho maria por 10 min. Em seguida, os tubos foram levados para leitura de absorbância da amostra e do padrão no espectrofotômetro a 505 nm, acertando o zero com o branco, para que os cálculos pudessem ser realizados.
4 MATERIAIS E MÉTODOS
COLESTEROL
		
	COLESTEROL
	INDICATIVO
	Desejável
	<200
	Reflete baixo risco de doença cardíaca
	Limiar
	200 – 239
	Reflete risco moderado, o médico pode julgar necessário um exame de perfil lipídico para entender melhor o tipo de colesterol que está causando levando ao limite.
	Elevado
	≥240
	Reflete alto risco de doença cardíaca e o médico pode proceder como relatado anteriormente.
	Muito elevado
	-
	
Dados obtidos no aparelho de espectrometria: 
Padrão: 0,459
Amostra: 0,344
	Colesterol = 29,97
Figura 1. Estrutura química colesterol
Colesterol esterificado → Colesterol + Ácidos graxos
Através da enzima Colesterol esterase.
Colesterol + O2 → Colestenase + H2O2
Através da Colesterol oxidase.
O resultado obtido através do aparelho de espectrometria foi muito abaixo do comum o que pode acontecer devido alguns interferentes como manuseio e manipulação incorretas durante o preparo para a leitura no aparelho de espectrometria, ou também pode caracterizar um problema durante a leitura no aparelho, de qualquer forma o resultado obtido foi inferior a um possível problema de colesterol alto.
O colesterol é uma substância (um esteroide) essencial para a vida. Faz parte das membranas de todas as células do corpo. É usado para fabricar hormônios essenciais para o desenvolvimento, o crescimento e a reprodução. Forma ácidos biliares necessários para a absorção de nutrientes dos alimentos. Uma pequena parte do colesterol do corpo circula no sangue em partículas complexas chamadas lipoproteínas. Estas incluem partículas que transportam o excesso de colesterol dos tecidos para serem eliminadas no fígado (colesterol HDL) e partículas que depositam o colesterol nos tecidos e órgãos (colesterol LDL). O exame de colesterol mede o colesterol total no sangue. É importante ressaltar que não é correto usar termos genéricos para caracterizar os diferentes tipos de colesterol encontrados no organismo humano, haja vista a necessidade de ambos para a manutenção de uma vida saudável, dessa forma como futuros profissionais da saúde é imprescindível orientar os pacientes de forma acessível mas acima de tudo correta para que compreendam a necessidade de uma ingesta equilibrada de alimentos e a também a prática de esportes, além de um correto tratamento e orientação quando este apresentar algum problema patológico relacionado ao seu metabolismo.
O colesterol é diferente de outros exames porque não é usado para diagnosticar ou monitorar uma doença e, sim, para avaliar o risco de desenvolver uma doença, especificamente doença cardíaca. Como colesterol alto está associado a endurecimento das artérias (aterosclerose), a doença cardíaca e ao risco elevado de morte por infarto do miocárdio, o exame é feito como parte da rotina de cuidadospreventivos de saúde.
Vale ressaltar que as categorias de risco alteram de acordo com a idade, e as utilizadas para a prática foram as categorias de um adulto, mesmo não tendo completa compreensão da procedência do sangue utilizado. 
TRIGLICERÍDEOS
		
	TRIGLICERÍDEOS
	Desejável
	<150
	Limiar
	150 – 199
	Elevado
	200 – 499
	Muito elevado
	>500
Dados obtidos no aparelho de espectrometria: 
Padrão: 0,457
Amostra: 0,065
	TRIGLICERÍDEOS = 28,44	
Figura 2. Estrutura dos triglicerídeos
Triglicerídes → Glicerol + Ácidos graxos
Por meio da lipase lipoproteica
Glicerol + ATP → Glicerol – 3P + ADP
Por meio da glicerolquinase
Glicerol – 3P + O2 → Didroxicetona + H2O2
Por meio da glicerol 3P oxidase 
2H2O2 + Aminoantipirina → Quiononina + 4H2O
Puoxidase
A prática realizada permitiu medir a quantidade de triglicerídeos no sangue, os triglicerídeos são uma forma de gordura e uma fonte de energia importante para o corpo é encontrado em maior parte no tecido adiposo, mas uma quantidade circula no sangue para fornecer combustível para os músculos.
Os triglicerídeos são transportados pelo sangue do intestino para serem armazenados no tecido gorduroso. Entre as refeições, triglicerídeos são liberados do tecido gorduroso para serem usados como fonte de energia pelo corpo. A maior parte dos triglicerídeos é transportada no sangue por lipoproteínas chamadas lipoproteínas de densidade muito baixa (em inglês, VLDL, very low density lipoproteins).
Níveis altos de triglicerídeos no sangue estão associados a um risco aumentado de doença cardiovascular. Alguns fatores podem contribuir para elevar os níveis de triglicerídeos e para o risco de doença cardiovascular, incluindo falta de exercício, excesso de peso, fumo, consumo excessivo de álcool e problemas clínicos como diabetes e doença renal.
Diante dos resultados encontrados é evidente que assim como o colesterol foram muito abaixo do desejável o que pode indicar um erro durante o preparo da amostra ou leitura do no aparelho de espectrometria.
5 CONCLUSÃO
No experimento realizado a dosagem de triglicérides foi realizada para estudar o metabolismo lipídico e para calcular o colesterol, usando soro a partir do método do colorimetria, onde o reativo reage com uma fração de solução sulfúrica, para formar um composto de coloração rósea, cuja intensidade de cor é proporcional à concentração de lipídios. A partir dessa prática foi possível determinar a concentração de colesterol e triglicerídeos no sangue, onde os resultados obtidos foram 29,97 mg/dL e 28,44 mg/dL respectivamente. Ambos os resultados obtidos foram abaixo do desejável em comparação aos valores de referência de <150 mg/dL para o triglicerídeo e <200 para o colesterol. A diferença entre os valores obtidos e os valores de referência podem ser atribuídos a um erro na preparação amostral ou até mesmo a um erro do aparelho na leitura da amostra.
REFERÊNCIAS
LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princípios de Bioquímica. 2. ed. São Paulo: Sarvier, 2000.
CHAMPE, P. C.; HARVEY,R.A.; FERRIER,D.R. Bioquímica Ilustrada. 5ª ed. São Paulo: Artmed, 2011