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BIOSSEGURANÇA NO LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR Equipe Anne Guzzo Beatriz Wessler Gabriel Lima Isadora Daneluz Stéfani de Souza Ytalo Ribeiro Condutas pré-práticas Utilização do POP para o manuseio de cada equipamento para garantir a biossegurança; Conhecimento prévios dos riscos; Treinamento de segurança apropriado. Vestimenta Jaleco; Luvas sem talco; Máscaras; Óculos de proteção; Toucas; Sapatos fechados; Calças sem aberturas. Equipamentos Espectrofotômetro Vortéx Equipamentos Termociclador Sequenciamento de DNA Equipamentos Capela de fluxo laminar Pipetas Equipamentos Autoclave Centrífuga Métodos de Esterilização Físicos Calor seco (estufa) Calor úmido (Vapor sob pressão - autoclave) Radiação (Gama - Cobalto 60, Cobalto Ultravioleta) Técnica Extração do DNA PCR Eletroforese Isolamento do RNA Evitando contaminações das amostras Sempre usar luvas, trocando-as frequentemente; Material livre de DNAases e RNAases (microtubos, ponteiras); DNA: Usar ponteiras com barreiras; Minimizar a geração de aerossóis pela rápida centrifugação dos microtubos antes de abri-los Especial atenção com a água utilizada (ultra pura) Referências Bibliográficas HIRATA, Mario Hiroyuki; HIRATA, Rosario Dominguez Crespo; MANCINI FILHO, Jorge. Manual de Biossegurança. 2. ed. Barueri, Sp: Manole, 2012. LIPAY, Monica V. N.; BIANCO, Bianca. Biologia Molecular: métodos e interpretação. Rio de Janeiro: Roca, 2015. NASCIMENTO, Ivana L. de O. et al. Manual de Biossegurança: Biossegurança no Laboratório de Diagnóstico e de Pesquisa. 2001. Disponível em: <http://www.ccs.saude.gov.br/visa/publicacoes/arquivos/p3_laboratorios.pdf>. Acesso em: 18 mar. 2019.
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