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ÁCIDOS NUCLEÍCOS RIBOSSOMO E SÍNTESE PROTEÍCA ÁCIDOS NUCLÉICOS: Moléculas orgânicas complexas, formadas pela polimerização de nucleotídeos (DNA e RNA) (1) Contêm a informação que determina a seqüência de aminoácidos (aa) e a estrutura e função das proteínas (DNA); (2) Fazem parte das estruturas celulares e alinham os aa de forma correta quando uma cadeia polipeptídica está sendo sintetizada (RNA); (3) Catalisam uma série de reações químicas fundamentais nas células (pontes peptídicas entre os aa) ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLÉICO (DNA) - Polímero linear longo e de fita dupla, composto por unidades de desoxirribonucleotídeo ligadas covalentemente. Serve como armazenador e o carreador da informação genética. - Contém toda a informação necessária para a construção das células e tecidos de um organismo. ÁCIDO RIBONUCLÉICO (RNA) - Polímero formado por monômeros de ribonucleotídeos covalentemente ligados. Apresenta 3 tipos de RNA celular (mRNA, tRNA e rRNA), com papéis diferentes na síntese de proteínas. -RNAm: transporta as instruções do DNA que especificam a ordem exata dos aa durante a síntese de proteínas. -RNAt: interpreta as informações do RNAm e transporta aa durante a síntese de proteínas. -RNAr: auxilia o RNAt no processo de tradução. DNA e RNA Estrutura comum: um grupo de fosfato ligado por uma ligação fosfodiéster a uma pentose (molécula de açúcar com 5 carbonos), que por sua vez esta ligada a uma base nitrogenada. Estrutura geral dos Nucleotídeos. (a) Adenosina-5-monofosfato (AMP), presente no RNA e (b) ribose e desoxirribose, as pentoses dos RNAs e DNAs. GRUPO FOSFATO BASE NITROGENADA AÇUCAR Nucleosídeo: açúcar + base Nucleotídeo: fosfato + açúcar + base Bases Nitrogenadas DNA e RNA - quimicamente muito semelhantes - constituídos por 4 nucleotídeos A, G – purinas (contém um par de anéis fusionados) T, C e U – pirimidinas (anéis simples) Fita de Ácido Nucléico ilustrando sua orientação -orientação: sempre 5´ para 3´ -Ligação fosfodiéster: ligação química entre nucleotídeos adjacentes no DNA e RNA (estrutura 1º) Esqueleto do ácido nucléico Formado por unidades repetidas de fosfato-pentose a partir das quais as bases purinas e pirimidinas se estendem como grupamentos laterais. DNA: -Dupla hélice -Fitas antipararelas (reverse) -Pontes de Hidrogênio entre as bases nitrogenadas (A=T e C=G) -Fitas Complementares A dupla hélice de DNA. (a) Modelo tridimensional e (b) estrutura química. Ribossomos são os locais de síntese de proteína. Eles não são limitados por membranas e portanto ocorrem tanto em procariontes quanto em eucariontes. Unidos pelo RNAm formam o polissomo Ribossomos Ribossomos são complexos grandes de RNA e proteínas. Mais da metade do peso do ribossomo é de RNA. Possui 2 subunidades (pequena e grande); A subunidade pequena se liga ao mRNA e tRNA; A subunidade grande catalisa a ligação peptídica entre os aas A maioria dos genes produz moléculas de RNAm que geram proteínas. Como a célula converte a informação presente no RNAm em proteína? Problema da codificação: informação linear de nt é traduzida em uma seqüência de aa. Transferência de informação por meio da transcrição: DNA (ác. nucléico) RNA (ác. nucléico): pareamento de bases complementares origina um transcrito (ex. escrito a mão x escrito no computador). Tradução: transferência da informação para outra língua (4nt x 20aa). RNAm é traduzido em seqüência de aa por meio do código genético. Seqüência de nt é lida consecutivamente em grupos de 3 (códons). RNA: polímero de nt; existem 64 (4x4x4) possíveis combinações de códons. aa: existem apenas 20. Cada códon especifica um aa, o código é degenerado e existe mais de um códon para cada aa (CÓDIGO DEGENERADO) O código genético é universal. A tradução do RNAm depende de moléculas adaptadoras que reconhecem tanto o códon quanto o aa designado (RNAt). 2 regiões de nt não pareados em cada uma das extremidades: Extremidade 3’: sítio de ligação com o aa correspondente ao códon. Anticódon: 3 nt consecutivos pareiam com o códon complementar no RNAm. O pareamento de bases é mais rigoroso nas posições 1 e 2 do códon: apenas pareamentos convencionais são permitidos. Posição 3: presença de inosina (por ex.) permite o reconhecimento de U ou C no RNAm (códon). Ex: aa VALINA, códons GUA, GUC, GUG e GUU. Cada RNAt se liga ao seu aa apropriado. Reconhecimento e ligação do RNAt ao aa correto aminoacil-tRNA sintetase (ligação covalente entre o aa e o RNAt). Uma enzima sintetase para cada aa. Síntese de proteínas: subunidades do ribossomo se unem sobre o RNAm, próximo à extremidade 5’. Encontro com o códon de terminação: ribossomo libera a proteína finalizada e as duas subunidades se separam. Eficiência de síntese: 2aa/seg. Como manter a rapidez e eficiência? 4 sítios de ligação para moléculas de RNA: 1 sítio: ligação do RNAm. 3 sítios (A, P e E): ligação de RNAt. Sítio de início da síntese de RNAm: indica a fase de leitura. Códon de iniciação: AUG (ATG no DNA) possui um RNAt especial (iniciador) que carrega o aa METIONINA. Somente o RNAt iniciador carregado com metionina é capaz de se ligar à subunidade menor do ribossomo (sem a presença da subunidade maior). A subunidade menor do ribossomo faz uma varredura no RNAm a procura do primeiro AUG (códon de iniciação). Encontrado o AUG, os fatores de iniciação se dissociam e a subunidade maior do ribossomo pode se acoplar. O ribossomo está completo. O RNAt encontra-se no sítio P e o sítio A está livre para que o próximo aa seja incorporado. Iniciada a síntese de proteínas: cada aa novo é adicionado à cadeia em extensão em um ciclo de 3 etapas. PASSO 1: um RNAt carregando o próximo aa a ser incorporado chega ao sítio A, pareando com o códon do RNAm já posicionado. PASSO 2: O rRNA da subunidade grande catalisa a ligação peptídica entre os aas do aminoacil- tRNA e do peptidil- tRNA e os dois tRNAs vão para os sítios P e E; PASSO 3: O ribossomo desliza sobre o mRNA exatamente 3 nt adiante, fazendo com que o o sítio A fique liberado para uma nova ligação de um novo aminoacil- tRNA. Final da mensagem: presença de códons de terminação (UAA, UAG e UGA). Não são reconhecidos por RNAt e não determinam um aa mas sinalizam o término da tradução para o ribossomo. Fatores de liberação se ligam ao ribossomo que apresenta um códon de terminação no sítio A. Uma molécula de água é adicionada à extremidade C terminal (ao invés de outro aa). A adição da molécula de água libera a extremidade C terminal da proteína de sua ligação com o RNAt e com o ribossomo. O RNAm é liberado e as duas subunidades do ribossomo se separam. A síntese da maioria das proteínas leva entre 20s e alguns minutos. No entanto, assim que o ribossomo tenha traduzido o suficiente de uma seqüência polipeptídica, a extremidade 5’ do RNAm é capturada por um novo ribossomo. Tradução ocorrem em polirribossomos ou polissomos permite a produção de um número grande de moléculas protéicas. Slide 1 Slide 2 Slide 3 Slide 4 Slide 5 Slide 6 Slide 7 Slide 8 Slide 9 Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15 Slide 16 Slide 17 Slide 18 Slide 19 Slide 20 Slide 21 Slide 22 Slide 23 Slide 24 Slide 25 Slide 26 Slide27 Slide 28 Slide 29 Slide 30 Slide 31 Slide 32 Slide 33 Slide 34
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