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RELATORIO AULA PRATICA DE MICROBIOLOGIA Isadora Tomas Rocha Mariana Ingrid Messias Gonçalves Mariane Resende David Rafaela de Andrade Santos Thayna Pereira A primeira aula prática ministrada pelo Professor André foi iniciada com a separação da turma em grupos e cada um destes deveria criar um meio de cultura segundo as instruções do docente. Os meios de cultura são preparações que contêm nutrientes necessários e condições propícias para o crescimento de microrganismos (água, nutrientes, temperatura). Podem ser sólidos, líquidos ou semissólidos e devem conter nutrientes essenciais e em concentrações adequadas. Os fatores necessários para o crescimento microbiano podem ser divididos em duas categorias principais- físicos e químicos. ● Fatores físicos essenciais- temperatura, ph e pressão osmótica. ● Fatores químicos essenciais- fontes de carbono e nitrogênio, enxofre, fósforo, oligoelementos, oxigênio e fatores orgânicos de crescimento. Utilizamos dois gramas do meio de cultura não seletivo TSA para cinquenta mililitros de água destilada medida na proveta conforme as indicações do fabricante. Inicialmente, colocamos o Becker na balança e pesamos dois gramas do meio de cultura, depois adicionamos também a água destilada, assim como um imã. Em seguida, colocamos a mistura para ser aquecida e homogeneizada no agitador magnético. Após o meio de cultura estar devidamente dissolvido o transferimos para o frasco de âmbar deixando o imã no Becker. O frasco de âmbar com o meio de cultura, os tubos de ensaio e as placas de Petri foram inseridas na autoclave para esterilização. É importante que o meio seja estéril, ou seja, não deva apresentar microrganismos vivos- e contenha somente os microrganismos que sejam adicionados à solução, para que os resultados não sejam prejudicados por contaminação de seres vivos do meio. Nenhuma forma de vida deve estar presente antes da inoculação com o microrganismo, pois isso pode alterar o estudo. Os tipos de microrganismo mais comumente encontrados tem a temperatura ótima de crescimento entre 25 e 40 graus Celsius. Ademais, a temperatura de muitas bactérias patogênicas fica em torno de 37 graus celsius, dessa forma, as estufas em laboratórios clínicos utilizam normalmente essa temperatura. A maioria das bactérias cresce melhor em meios com poucas variações de ph sempre perto da neutralidade entre 6,5 e 7,5. Para manutenção do ph são adicionados tampões químicos no meio de cultura como peptonas, aminoácidos e sais de fosfato. Para o crescimento de microrganismos no laboratório, há uma grande variedade de meios de cultura. A maioria desses meios disponíveis de forma comercial já contém todos os componentes necessários, sendo preciso somente a adição de água para posterior esterilização. Os diversos meios de cultura são utilizados de acordo com a preferência para reprodução de bactérias específicas. Podem ser classificados como seletivos, diferenciais, de enriquecimento e de transporte. Os meios seletivos favorecem o desenvolvimento de algumas bactérias em detrimento de outras. Meios diferenciais promovem uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos. Meios de transporte não possuem nutrientes, apenas um agente redutor e mantêm as bactérias viáveis por mais tempo – quando não é possível a semeadura imediata do material. Já os meios de enriquecimento proporcionam nutrientes favoráveis ao crescimento de microrganismos presentes geralmente sob-baixos números ou de crescimento lento. Os exemplos situados durante a aula foram - KASVI (seletivo), TSA ( não- seletivo). Além disso, também foram citadas as bactérias Fastisiosas que por terem dificuldade de se desenvolverem precisam ser estimuladas com nutrientes específicos. O TSA utilizado em sala de aula contém Agar, o qual e colocado na placa e resultara num material gelatinoso. Foi nos mostrado, também, processos de esterilização como por exemplo a autoclavagem, câmara de fluxo e câmara de fluxo. Na câmara de fluxo é criado um ambiente estéril, devido ao fluxo de ar que vem de cima para baixo impedindo a contaminação do ar. As placas que estão sendo esterilizadas só vão ser abertas dentro dessa câmera de fluxo para não contaminarem com ar. Esse instrumento não será contaminado devido aos filtros z. Já a luz violeta funciona análogo à uma radiação, pois provoca uma quebra do DNA. Ela só causa esterilização daquilo que precisa. Ao final do processo as placas são novamente fechadas e levadas para outro lugar. Já o processo de autoclavagem é um tratamento térmico que consiste em manter o material contaminado a uma temperatura elevada para esterilização (121º e 1 atm.).Esses meios de esterilização são importantes já que o material precisa ser esterilizado para garantir que não haja o desenvolvimento de outros micro-organismos, apenas o material desejado, no caso, a bactéria.
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