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Imunologia clínica – NP3, Resumo Técnicas: Precipitação em gel agarose – Gel com ANTICORPOS fundidos, faz-se buracos e coloca-se ANTÍGENOS. Formação de halo significa resultado positivo. Imunodifusão dupla – Pesquisa de anticorpos associados à doenças auto- imunes(precipitação do sistema imune), forma-se agregado quando estiver interação de ANTICORPO com o que quer ser visto (bactéria, protozoário, etc). Aglutinação direta – serve para tipagem sanguínea , ANTÍGENO + ANTICORPO, se tem o antígeno o anticorpo vai ligar e precipitar. Há inibição do teste quando há infecção, que gera aglutinação espontânea das hemácias. Aglutinação indireta – absorção de ANTICORPO ou ANTÍGENOS em látex, que não interferem na interação antígeno+anticorpo. O Látex vai auxiliar na pesquisa de anticorpos específicos. Hemaglutinação passiva – Amostra diluída com ANTICORPO, placa, reagente, aguarda-se. Positivo forma-se um tapete, negativo forma-se um botão. Há inibição quando tem-se a diminuição do concentrado de ANTÍGENOS. Coombs – Anticorpos que o ratinho produziu irá auxiliar para indentificar imunoglubulinas diretamente na hemácia e indiretamente na indentificação do anticorpo. Eristoblase fetal – Descobre se há anemia hemolítica. Sangue total da mãe + soro de Coombs. Indiretamente faz-se dando imunossupressor para a mãe não produzir ANTICORPOS). Elisa sanduíche/direto –ANTICORPO de captura + ANTÍGENO(amostra)+ ANTICORPO do kit específico ao antígeno que está querendo ser pesquisado + ENZIMA + SUBSTRADO Elisa indireto – ANTÍGENO do kit + ANTICORPO(amostra) + ANTICORPO do kit que é uma imunoglobulina que irá notar a ligação entre o primeiro ANTÍGENO E ANTICORPO + ENZIMA + SUBSTRATO. Vê se já entrou em contato com a doença. ELISA competição – Presença de ANTICORPO em determinado soro que é revelado pela competição de um ANTICORPO específico dirigido contra o ANTÍGENO. Imunofluorecência fluorófofo – MUITO UTILIZADO PARA SÍFILIS. Princípio do teste ELISA. Kit com o ANTÍGENO + amostra do paciente + ANTICORPO contra o agente. Brilha se há porção conservada (chave-fechadura). Quimioluminescência – Elisa da qual no lugar da enzima há luciforese, que faz uma turbidimetria. Western Blotting – Indentifica epítopo da proteína através de um anticorpo específico por meio de de eletricidade e tamanho. Pega a proteína do gel e passa para um papel (intracelulose), que faz a separação por massa molecular , adiciona o anticorpo ao papel e vê se há ligação. Teste rápido – AMOSTRA > ANTÍGENO > ANTÍGENO E AMOSTRA> ANTICORPO kit para controle positivo Região teste: ANTÍGENO + AMOSTRA (teste) Região conjulgado(ou ANTÍGENO): ANTICORPO ligante à aquele antígeno. CUTOFF ou Limiar de reatividade: Tem como princípio indicar os valores positivos, negativos, falsos positivos/negativos ou também chamados de indeterminados (zona cinza). Valores POSITIVOS (0,7 – 5,0) indicam doentes e NEGATIVOS (0,0 – 1,0) não doentes. Doenças e Diagnósticos: Doenças Congênitas Marcadores para DIAGNÓSTICO: Já teve: Mãe terá IGG, feto terá IGG da mãe e recém nascido terá IGG da mãe. Adoeceu: Mãe terá IGM, feto terá seu próprio IGM, assim como o recém nascido. A mãe irá evoluir sua resposta imune e terá IGG, o feto terá IGG próprio e da mãe, assim como o recém nascido. HIV/SIDA/AIDS – Via de transmissão: secreção. Agente etiológico: Retrovírus DIAGNÓSTICO: Busca pela glicoproteína ANTÍGENO e ANTICORPO p24 por meio de ELISA para triagem e Westernblotting para confirmação. MARCADORES: p24, IGM, IGG e RNA viral (indentificação por PCR) Como ocorre a doença? HIV tem tropismo pelo linfócito TCD4, inicia-se adentrando com 1 fita de RNA para dar sua replicação, que irá se ligar ao C-DNA por transcriptase reversa, que incorporará o DNA viral ao DNA hospedeiro, que irá ser sintetizado por meio do ribossomo. Anticorpos estarão ativados em busca do vírus mas não irão encontrá-lo, voltam ao seu estado normal, MHC classe II irá ser o responsável por capturar (quando o capturar), fará com que TCD8 elimine linfócitos TCD4 fazendo com que o hospedeiro torne-se imunodeficiente. Citomegalovírus – Via de transmissão: secreções uterinas ou leite materno. Agente etiológico: Citomelaovírus. DIAGNÓSTICO: Aglutinação e ELISA. MARCADORES: IGG e IGM. Sintomas: Febre prolongada, fraqueza, sudorese, e eventual hepatoesplenomegalia. Sintomas congênito: Hepatoesplenomegalia, icterícia, petéquias, microcefalia, coriorretinite, calcificações cerebrais, que pode levar à: surdez, perda de visão, retardo mental e déficit neurológico. Rubéola – Agente etiológico: Rubella vírus. DIAGNÓSTICO: ELISA. MARCADORES: Detecção do antígeno. Sintomas: Exantema/erupções cutâneas discretas, adenopatia/aumento do volume dos gânglios linfáticos, pouca ou nenhuma febre. Sintomas congênito: Púrpura/manchas roxas trombocitopenicas, anemia hemolítica, hepatite, surdez, doença cardíaca, catarata, glaucoma, retinopatia, retardo mental ou diabetes mellitus (como manifestação tardia). Sífilis – Via de transmissão: secreções. Agente etiológico: Treponema pallidium (bactéria). DIAGNÓSTICO: ELISA. Pesquisa do treponema. MARCADORES: IGM no líquor do estágio 3 OU presente no congênito. Sintomas: Há 3 estágiosde sífilis, na primária: tem-se lesão no local, ulceração incolor, bordas endurecidas e reação ganglionar satélite. na secundária: tem-se roséola no corpo, lesões nas mucosas e lindoadenopatia generalizada – TODOS após 1-6 meses. na terciária: GOMA (lesão tecidual), e neurosífilis (lesão no SNC, tem-se psicose, demência, tabes dorsalis, AVC, meningite aguda e lesões de nervos cranianos) Sintomas congênito: até o segundo ano de vida pode ter anemia intensa, hemorragias e icterícia, após o segundo ano de vida tem-se GOMA. Toxoplasmose – Via de transmissão: ingestão/inalação de oocistos. Agente etiológico: Toxoplasma gongii. DIAGNÓSTICO: ELISA para ver o ANTICORPO. MARCADORES: IGM e IGG contra Toxoplasmose, no congênito: IGM (PADRÃO OURO), IGG e IGA (da placenta) ou Linfócitos T que são ativados pelo protozoário. Sintomas: Assintomático ou sintomatologia semelhante à gripe com febre diária e linfoadenopatia. Sintomas congênito: Assintomático ou Tétrade de Sabin (problema no olho, calcificação cerebral, cisto no cérebro, perturbações neurológicas, microcefalia ou hidrocefalia).
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